Development of a sensitive and spec

Development of a sensitive and speci
fi
c multiplex PCR method for the
simultaneousdetection ofchicken, duckandgooseDNA in meat products
Hou Bo, Meng Xianrong
⁎
, Zhang Liyuan, Guo Jinyue, Li Shaowen, Jin Hui
National Key Lab of Agricultural Microbiology, College of Veterinary Medicine, Huazhong Agricultural University, 430070 Wuhan, PR China
abstract
article info
Article history:
Received 17 December 2013
Received in revised form 26 October 2014
Accepted 12 November 2014
Available online 22 November 2014
Keywords:
Food authenticity
Mitochondrial DNA
Multiplex PCR
Poultry
Species identi
fi
cation
Identifyingtheoriginofanimalspeciesinmanufacturedmeatproductsisofconsiderableeconomic,religiousand
sanitaryimportance.Inthis study,wedevelopeda multiplex PCR methodto simultaneouslydetectchicken,duck
and gooseDNA inmeatproducts derived frombeef,pork, muttonor quail.ThePCRprimers were designed based
on the sequence of mitochondrial genes of each avian species, and the amplicon sizes were 131, 283 and 387 bp
for chicken, duck and goose, respectively. The method had no cross-reaction with DNA isolated from beef,
mutton,pork or quail,and generatedproducts ata target DNA content aslow as0.05ng, or a target meatcontent
of1%of totalmeatweight.Moreover, screening of 24 commercial meatsamples using thismethod indicatedthat
six, two and one samples were contaminated with chicken, duck, or both, respectively, suggesting its usefulness
for the simultaneous identi
fi
cation of chicken, duck and goose DNA in commercial meat products.
© 2014 Elsevier Ltd. All rights reserved.
1. Introduction
Adulteration of meat products with meat of cheaper or undesirable
species is a common practice worldwide (
Ballin, 2010
). In addition to
posing a health risk to individuals with infectious diseases, metabolic
disorders or allergies (
Woolfe & Primrose, 2004
), meat adulteration
raises many economic and religious concerns (
Ballin, 2010
). For these
reasons, the development of a rapid and reliable method for the identi-
fi
cation of animal species is of increasing global importance.
Many methods have been developed over the past two decades for
the detection of adulteration of meat products (
Ali, Razzak, & Hamid,
2014; Ballin, 2010
; Nicolai Z.
Ballin, Vogensen, & Karlsson, 2009;
Doosti, Dehkordi, & Rahimi, 2014; Lago, Herrero, Madriñán, Vieites,
& Espiñeira, 2011; Sentandreu & Sentandreu, 2014
). Conventional
methods used for identifying the species of origin of raw meat include
sensory analysis, anatomical and histological differences, immune sera
diffusion, chromatography and DNA hybridization (
Armstrong, Leach,
& Wyllie, 1992; Asensio, González, García, & Martin, 2008; Chen &
Hsieh, 2000; Chikuni, Ozutsumi, Koishikawa, & Kato, 1990; Craig,
Ritchie, & Mackie, 1995; Schönherr, 2002
). However, these methods
may be inadequate to discriminate between species which are closely
related, or may not be suitable for routine use in processed meats,

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

พัฒนาสำคัญและ speciไร้สายc multiplex PCR วิธีการsimultaneousdetection ofchicken, duckandgooseDNA ในผลิตภัณฑ์เนื้อสัตว์Hou บ่อ Meng Xianrong⁎หลี่ หยวนจาง กัว Jinyue, Li Shaowen จิ้นฮุยห้องปฏิบัติการสำคัญแห่งชาติจุลชีววิทยาเกษตร วิทยาลัยสัตวแพทยศาสตร์ Huazhong มหาวิทยาลัยเกษตร วู 430070, PR จีนบทคัดย่อข้อมูลบทความบทความประวัติ:ได้รับ 17 2013 ธันวาคมรับแบบฟอร์มที่ปรับปรุง 26 2014 ตุลาคมยอมรับ 12 2014 พฤศจิกายนมีออนไลน์ 22 2014 พฤศจิกายนคำสำคัญ:อาหารแท้Mitochondrial DNAMultiplex PCRสัตว์ปีกพันธุ์ identiไร้สายcationIdentifyingtheoriginofanimalspeciesinmanufacturedmeatproductsisofconsiderableeconomic, religiousandsanitaryimportanceInthis ศึกษา wedevelopeda multiplex PCR methodto simultaneouslydetectchicken เป็ดและ gooseDNA inmeatproducts มา frombeef หมู กระทา muttonorThePCRprimers ถูกออกแบบตามในลำดับของยีน mitochondrial ของแต่ละสายพันธุ์นก และ amplicon ขนาดมี 131, 283 และ 387 bpไก่ เป็ด และ ห่าน ตามลำดับ วิธีมีไม่ cross-reaction กับดีเอ็นเอแยกต่างหากจากเนื้อmutton หมู หรือกระทา generatedproducts และ ata เป้าหมาย DNA เนื้อหา aslow as0.05ng หรือ meatcontent เป้าหมายof1% ของ totalmeatweightนอกจากนี้ การคัดกรองของ meatsamples พาณิชย์ 24 ใช้ thismethod indicatedthatหก สอง และหนึ่งตัวอย่างถูกปนเปื้อน กับไก่ เป็ด ทั้ง ตามลำดับ แนะนำประโยชน์ของสำหรับ identi พร้อมไร้สายcation ไก่ เป็ด และห่านดีเอ็นเอในผลิตภัณฑ์เนื้อสัตว์เพื่อการค้า© 2014 Elsevier จำกัด สงวนลิขสิทธิ์ทั้งหมด1. บทนำAdulteration ผลิตภัณฑ์เนื้อกับเนื้อถูกกว่า หรือไม่พึงปรารถนา(การทั่วโลกปฏิบัติร่วมกันคือBallin, 2010). นอกตั้งความเสี่ยงสุขภาพบุคคลที่มีโรคติดเชื้อ เผาผลาญ(ความผิดปกติหรืออาการแพ้Woolfe และ Primrose, 2004), adulteration เนื้อเพิ่ม(กังวลเศรษฐกิจ และศาสนามากBallin, 2010). สำหรับเหล่านี้เหตุผล การพัฒนาวิธีการที่รวดเร็ว และเชื่อถือได้สำหรับ identi-ไร้สายcation พันธุ์สัตว์จะเพิ่มความสำคัญทั่วโลกได้รับการพัฒนาหลายวิธีกว่าสองทศวรรษที่ผ่านมาสำหรับการตรวจพบ adulteration (ผลิตภัณฑ์เนื้ออาลี Razzak, & กร่าง2014 Ballin, 2010; Nicolai ZBallin, Vogensen, & Karlsson, 2009Doosti, Dehkordi, & Rahimi, 2014 ลาโก้ Herrero, Madriñán, Vieites& Espiñeira, 2011 Sentandreu และ Sentandreu, 2014). ปกติรวมวิธีใช้สำหรับการระบุพันธุ์ของเนื้อวัตถุดิบการวิเคราะห์ทางประสาทสัมผัส ความแตกต่างของกายวิภาค และสรีรวิทยา ภูมิคุ้มกันจะแพร่ chromatography และ DNA hybridization (อาร์มสตรอง ลีช& Wyllie, 1992 Asensio, González, García และ มาร์ติน 2008 เฉินและHsieh, 2000 Chikuni, Ozutsumi, Koishikawa และนายกา โต 1990 เครกRitchie, & รับเชิญ 1995 Schönherr, 2002). อย่างไรก็ตาม วิธีการเหล่านี้อาจไม่เพียงพอให้เหยียดระหว่างสายพันธุ์ที่ใกล้ชิดเกี่ยวข้อง หรืออาจไม่เหมาะสำหรับใช้ประจำในการแปรรูปเนื้อสัตว์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การพัฒนาที่สำคัญและ speci
Fi
วิธี PCR คทวีคูณสำหรับ
ofchicken simultaneousdetection, duckandgooseDNA ในผลิตภัณฑ์เนื้อสัตว์
Hou บ่อเม้ง Xianrong
⁎
เหวย Liyuan, Guo Jinyue ลี่ Shaowen, จินฮุย
แห่งชาติ Lab สำคัญของการเกษตรจุลชีววิทยาวิทยาลัยสัตวแพทยศาสตร์ Huazhong มหาวิทยาลัยเกษตร, 430070 อู่ฮั่น, PR China
นามธรรม
ข้อมูลบทความ
ประวัติศาสตร์บทความ
ที่ได้รับ 17 ธันวาคม 2013
ที่ได้รับในรูปแบบปรับปรุง 26 ตุลาคม 2014
ได้รับการยอมรับ 12 พฤศจิกายน 2014
พร้อมให้บริการออนไลน์ 22 พฤศจิกายน 2014
คำสำคัญ:
ความถูกต้องอาหาร
ยลดีเอ็นเอ
Multiplex PCR
สัตว์ปีก
ขยายพันธุ์ การศึกษา wedevelopeda Multiplex PCR methodto simultaneouslydetectchicken เป็ดและ inmeatproducts gooseDNA มา frombeef หมู muttonor quail.ThePCRprimers ได้รับการออกแบบขึ้นอยู่กับลำดับของยีนยลของสายพันธุ์นกแต่ละและขนาด amplicon เป็น 131, 283 และ 387 bp สำหรับไก่เป็ด และห่านตามลำดับ วิธีการก็ไม่มีข้ามทำปฏิกิริยากับดีเอ็นเอที่แยกได้จากเนื้อวัวเนื้อแกะเนื้อหมูหรือนกกระทาและ generatedproducts ATA เป้าหมายเนื้อหาดีเอ็นเอ aslow as0.05ng หรือ meatcontent เป้าหมายของ 1% ของ totalmeatweight.Moreover คัดกรองของ meatsamples เชิงพาณิชย์ 24 ใช้ thismethod indicatedthat หก สองและเป็นหนึ่งในตัวอย่างที่ถูกปนเปื้อนด้วยไก่เป็ดหรือทั้งสองตามลำดับแสดงให้เห็นประโยชน์ของมันสำหรับการระบุพร้อมกันไฟไอออนบวกของไก่เป็ดและห่านดีเอ็นเอในผลิตภัณฑ์เนื้อสัตว์เชิงพาณิชย์. © 2014 เอลส์ จำกัด สงวนลิขสิทธิ์. 1 บทนำเจือปนผลิตภัณฑ์จากเนื้อสัตว์ที่มีราคาถูกกว่าเนื้อสัตว์ที่ไม่พึงประสงค์หรือสปีชีส์เป็นหลักปฏิบัติทั่วไปทั่วโลก ( Ballin 2010 ) นอกจากนี้ในการวางตัวความเสี่ยงด้านสุขภาพให้กับประชาชนที่มีโรคติดเชื้อ, การเผาผลาญอาหารผิดปกติหรือโรคภูมิแพ้ ( Woolfe และพริมโรส, 2004 ), การปลอมปนเนื้อสัตว์เพิ่มความกังวลทางเศรษฐกิจและหลายศาสนา ( Ballin 2010 ) สำหรับเหล่านี้เหตุผลในการพัฒนาวิธีการที่รวดเร็วและเชื่อถือได้สำหรับการระบุถึงFi ไอออนบวกของสัตว์ชนิดคือการเพิ่มความสำคัญระดับโลก. วิธีการหลายคนได้รับการพัฒนาที่ผ่านมาสองทศวรรษที่ผ่านมาสำหรับการตรวจสอบการปลอมปนของผลิตภัณฑ์จากเนื้อสัตว์ ( อาลี Razzak, และฮามิด2014; Ballin, 2010 ; Nicolai Z. Ballin, Vogensen และคาล์, 2009; Doosti, Dehkordi และ Rahimi, 2014; Lago, Herrero, Madriñán, Vieites, & Espiñeira, 2011; Sentandreu & Sentandreu, 2014 ) ธรรมดาวิธีการที่ใช้สำหรับการระบุสายพันธุ์ของต้นกำเนิดของเนื้อดิบรวมถึงการวิเคราะห์ทางประสาทสัมผัสความแตกต่างทางกายวิภาคและการตรวจชิ้นเนื้อซีรั่มภูมิคุ้มกันแพร่โคและดีเอ็นเอ ( อาร์มสตรองกรอง& Wyllie, 1992; Asensio อนซาเลซการ์เซียและมาร์ติน, 2008; เฉินและHsieh, 2000; Chikuni, Ozutsumi, Koishikawa และ Kato, 1990; เครกริตชี่และแม็กกี้, 1995; Schönherr 2002 ) แต่วิธีการเหล่านี้อาจจะไม่เพียงพอที่จะแยกแยะระหว่างสายพันธุ์ที่มีความใกล้ชิดที่เกี่ยวข้องหรืออาจจะไม่เหมาะสำหรับการใช้งานประจำในเนื้อสัตว์แปรรูป,

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การพัฒนาความอ่อนไหวและกา

C วิธี multiplex PCR Fi
simultaneousdetection ofchicken duckandgoosedna , ในผลิตภัณฑ์เนื้อสัตว์
โฮโบ เมิง⁎ XianRong

, จางกั๋วลี่ shaowen Liyuan , จุดหมายปลายทาง , คีย์ , ห้องปฏิบัติการแห่งชาติจินฮี
จุลชีววิทยาทางการเกษตร คณะสัตวแพทย์ มหาวิทยาลัยเกษตร Huazhong 430070 , หวู่ฮั่น ประชาสัมพันธ์ประเทศจีน

บทความ บทคัดย่อข้อมูลประวัติศาสตร์ :

บทความได้รับ 17 ธันวาคม 2013
รับแก้ไขแบบฟอร์ม 26 ตุลาคม 2014
รับ 12 พฤศจิกายน 2014
ออนไลน์ 22 พฤศจิกายน 2014
คำสำคัญ :

ของแท้อาหารดีเอ็นเอ multiplex PCR




identi สัตว์ปีกชนิดประจุไฟ identifyingtheoriginofanimalspeciesinmanufacturedmeatproductsisofconsiderableeconomic religiousand
,
sanitaryimportance.inthis ศึกษาwedevelopeda multiplex PCR methodto simultaneouslydetectchicken , เป็ด
goosedna inmeatproducts และได้มา frombeef หมู muttonor quail.thepcrprimers ถูกออกแบบจากลำดับของยีนไมโตคอนเดรีย
ในแต่ละชนิดของนก และขนาดและจำนวน 131 , และ 387 BP
สำหรับไก่ เป็ด และห่าน ตามลำดับ วิธีการที่ไม่มีปฏิกิริยาข้ามกับดีเอ็นเอที่แยกได้จากเนื้อ
เนื้อแกะหมู หรือ นกกระทา และ generatedproducts ATA ดีเอ็นเอเป้าหมายเนื้อหา aslow as0.05ng หรือเป้าหมาย meatcontent
1 % ของ totalmeatweight นอกจากนี้ การใช้วิธีนี้ พบว่า 24 meatsamples พาณิชย์
6 , 2 และ 1 ตัวอย่างที่มีการปนเปื้อนของไก่ เป็ด หรือทั้งสองตามลำดับ ชี้ให้เห็นประโยชน์ของพร้อมกัน


identi Fi การ ของไก่เป็ดและห่านดีเอ็นเอในผลิตภัณฑ์เนื้อสัตว์พาณิชย์ .
สงวนลิขสิทธิ์ 2014 ทั่วโลก จำกัด .
1 บทนำ
การผลิตภัณฑ์เนื้อกับเนื้อของที่ถูกกว่าหรือไม่พึงประสงค์
ชนิดเป็นแนวทางปฏิบัติโดยทั่วไป ทั่วโลก ( ballin )
,
) นอกจาก
วางตัวความเสี่ยงสุขภาพบุคคลที่มีการติดเชื้อโรค , ความผิดปกติของการเผาผลาญอาหารหรือภูมิแพ้ (

&วุล์ฟ

พริมโรส , 2004 ) การปลอมปนเนื้อสัตว์เพิ่มความกังวลทางเศรษฐกิจ และทางศาสนามากมาย ( ballin )
,
) สำหรับเหตุผลเหล่านี้
, การพัฒนาอย่างรวดเร็วและเชื่อถือได้วิธีการที่ identi -

fi ในสัตว์ชนิดที่เพิ่มขึ้นทั่วโลกของเป็นสิ่งสำคัญ .
หลายวิธีได้ถูกพัฒนาขึ้นในช่วงสองทศวรรษที่ผ่านมาสำหรับ
ตรวจหาการผลิตภัณฑ์เนื้อสัตว์ (
razzak ฮามิด , อาลี &
2014 ; ballin , , 2553
; นิโคไล Z .
vogensen ballin , ,&คาร์ลสัน , 2009 ;
doosti dehkordi & , , rahimi 2014 ; Lago herrero MADRID , , ñá N , vieites
& espi Eira , 15 , 2011 ; sentandreu & sentandreu 2014
) วิธีการปกติ
ที่ใช้สำหรับการระบุชนิดของแหล่งที่มาของอาหารดิบรวมถึง
การวิเคราะห์ทางประสาทสัมผัสด้านลักษณะทางกายวิภาคและผลของภูมิคุ้มกัน เซร่า
แพร่ chromatography และ DNA hybridization (

&อาร์มสตรอง กรอง เอสซึนซีโอ วิลลี , 1992 ; ,gonz . kgm lez , กาโอ การ์ซีอา& , มาร์ติน , 2008 ; เฉิน&
Hsieh , 2000 ; ชิคูนิโค ชิกาว่า ozutsumi , , , &คาโต้ , 1990 ; Craig
ริตชี & Mackie , 1995 ; Sch ö nherr 2002
) อย่างไรก็ตาม วิธีการเหล่านี้อาจจะไม่เพียงพอที่จะแยกแยะระหว่าง

ที่เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดชนิดใด หรืออาจจะไม่เหมาะกับการใช้ประจำวันในเนื้อสัตว์แปรรูป