Abstract Escherichia coli strain BL

Abstract Escherichia coli strain BL21 is commonly used
as a host strain for protein expression and purification. For
structural analysis, proteins are frequently isotopically
labeled with deuterium (2
H), 13C, or 15N by growing E.
coli cultures in a medium containing the appropriate
isotope. When large quantities of fully deuterated proteins
are required, E. coli is often grown in minimal media with
deuterated succinate or acetate as the carbon source because
these are less expensive. Despite the widespread use of
BL21, we found no data on the effect of different minimal
media and carbon sources on BL21 growth. In this study,
we assessed the growth behavior of E. coli BL21 in
minimal media with different gluconeogenic carbon
sources. Though BL21 grew reasonably well on glycerol
and pyruvate, it had a prolonged lag-phase on succinate
(20 h), acetate (10 h), and fumarate (20 h), attributed to the
physiological adaptation of E. coli cells. Wild-type strain
NCM3722 (K12) grew well on all the substrates. We also
examined the growth of E. coli BL21 in minimal media that
differed in their salt composition but not in their source of
carbon. The commonly used M9 medium did not support
the optimum growth of E. coli BL21 in minimal medium.
The addition of ferrous sulphate to M9 medium (otherwise
lacking it) increased the growth rate of E. coli cultures and
significantly increased their cell density in the stationary
phase.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โดยทั่วไปใช้นามธรรม Escherichia coli ต้องใช้ BL21เป็นต้องใช้โฮสต์นิพจน์โปรตีนและทำให้บริสุทธิ์ สำหรับการวิเคราะห์โครงสร้าง โปรตีนมักจะ isotopicallyป้ายกับดิวเทอเรียม (2H) 13 C หรือ 15N โดยเติบโตอีวัฒนธรรม coli ในสื่อที่ประกอบด้วยที่เหมาะสมไอโซโทป เมื่อปริมาณมากของโปรตีนทั้งหมด deuteratedถูกต้อง E. coli เป็นมักปลูกในสื่อน้อยdeuterated succinate หรือ acetate เป็นแหล่งคาร์บอนเนื่องจากเหล่านี้มีราคาแพงน้อย แม้ มีการใช้อย่างแพร่หลายBL21 เราพบไม่มีข้อมูลเกี่ยวกับผลของการแตกต่างกันน้อยที่สุดแหล่งข้อมูลสื่อและคาร์บอนใน BL21 เจริญเติบโต ในการศึกษานี้เราประเมินลักษณะการทำงานของ E. coli BL21 ในการเจริญเติบโตสื่อ gluconeogenic คาร์บอนแตกต่างกันน้อยที่สุดแหล่งที่มา แม้ BL21 เติบโตด้วยดีในกลีเซอรและ pyruvate มันมีระยะช่วงห่างนาน succinate(20 h), acetate (10 h), และ fumarate (20 h), บันทึกการสรีรวิทยาการปรับตัวของเซลล์ E. coli ต้องใช้ชนิดของป่าNCM3722 (K12) เติบโตบนพื้นผิวทั้งหมดด้วย เรายังตรวจสอบการเจริญเติบโตของ E. coli BL21 สื่อน้อยที่แตกต่าง ในองค์ประกอบของเกลือ แต่ไม่ได้อยู่ ในแหล่งที่มาของคาร์บอน ไม่ได้สนับสนุนสื่อ M9 ใช้ทั่วไปการเติบโตที่เหมาะสมของ E. coli BL21 ในน้อยที่สุดการเพิ่มของซัลเฟตปานกลาง M9 (มิฉะนั้นขาด) เพิ่มอัตราการเติบโตของ E. coli วัฒนธรรม และเพิ่มความหนาแน่นของเซลล์ในการเขียนขั้นตอนการ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บทคัดย่อ Escherichia coli สายพันธุ์ BL21
เป็นที่นิยมใช้เป็นสายพันธุ์เจ้าภาพการแสดงออกของโปรตีนและการทำให้บริสุทธิ์ สำหรับการวิเคราะห์โครงสร้างโปรตีนมัก isotopically กำกับด้วยดิวทีเรียม (2 H), 13C หรือ 15N โดยการปลูกอีวัฒนธรรมcoli ในสื่อที่มีที่เหมาะสมไอโซโทป เมื่อปริมาณมากของโปรตีน deuterated อย่างเต็มที่จะต้องเชื้อE. coli เป็นผู้ใหญ่มักจะอยู่ในสื่อที่น้อยที่สุดกับsuccinate deuterated หรืออะซิเตตเป็นแหล่งคาร์บอนเพราะเหล่านี้ราคาไม่แพง แม้จะมีการใช้อย่างแพร่หลายของBL21 เราพบว่าไม่มีข้อมูลเกี่ยวกับผลกระทบที่แตกต่างกันน้อยที่สุดของสื่อและแหล่งคาร์บอนต่อการเจริญเติบโตBL21 ในการศึกษานี้เราประเมินพฤติกรรมการเจริญเติบโตของอีโคไล BL21 ในสื่อที่แตกต่างกันน้อยที่สุดที่มีคาร์บอนgluconeogenic แหล่งที่มา แม้ว่า BL21 ขยายตัวได้ดีพอสมควรในกลีเซอรอลและไพรูมันมีความล่าช้าเฟสเป็นเวลานานในsuccinate (20 ชั่วโมง) อะซิเตท (10 ชั่วโมง) และ fumarate (20 ชั่วโมง) ประกอบกับการปรับตัวทางสรีรวิทยาของเซลE.coli สายพันธุ์ป่าชนิดNCM3722 (K12) ขยายตัวได้ดีบนพื้นผิวทั้งหมด นอกจากนี้เรายังมีการตรวจสอบการเจริญเติบโตของอีโคไล BL21 ในสื่อที่น้อยที่สุดที่แตกต่างกันในองค์ประกอบของเกลือแต่ไม่ได้อยู่ในแหล่งที่มาของคาร์บอน ที่ใช้กันทั่วไป M9 กลางไม่สนับสนุนการเจริญเติบโตที่เหมาะสมของเชื้อE. coli BL21 ในสื่อน้อยที่สุด. นอกเหนือจากซัลเฟตเหล็กกลาง M9 (มิฉะนั้นขาดมัน) เพิ่มอัตราการเจริญเติบโตของเชื้อ E. coli วัฒนธรรมและเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญความหนาแน่นของเซลล์ของพวกเขาในนิ่งเฟส