2.5. Southern-hybridization analysis on chip
The amplicons were denatured at 95 C for 10 min and placed
into ice block immediately. Hybridizationwas carried out following
PORCINE Gene Chip protocols (Olipro™, MY). The amplicons were
mixed with reagent A on the chips and incubated in hybridization
oven (OliproOven HYB001, MY) at 70 C for 1 h with maximum
vibration. Chips were washed using reagents B, C, D, E and F to hybridize the biotinylated amplicons with specific probes. After
hybridization reaction, the chips were again washed for color
development. Chips were rinsed using reagent G and oven-dried
(OliproOven HYB001, MY) at 70 C for 5 min. Finally, chips were
scanned and positive spots identified using Scanner System (OliproScan,
MY). Positive result for porcine DNA will be indicated by
perfect matched probe-target hybrid which formed blue-purple
color on the chips
2.5 วิเคราะห์ใต้การผสมพันธุ์บนชิป
amplicons ถูกเอทิลแอลกอฮอล์ที่ 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาทีและวาง
ลงในบล็อกน้ำแข็งทันที Hybridizationwas ดำเนินการดังต่อไปนี้
โปรโตคอลสุกรยีนชิป (Olipro ™, MY) amplicons ถูก
ผสมกับตัวทำปฏิกริยากับชิปและบ่มในการผสมพันธุ์
เตาอบ (OliproOven HYB001, MY) ที่ 70 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 ชั่วโมงสูงสุด
สั่นสะเทือน ชิปถูกล้างโดยใช้น้ำยา B, C, D, E และ F เพื่อผสมพันธุ์ amplicons biotinylated กับยานสำรวจที่เฉพาะเจาะจง หลังจาก
ปฏิกิริยาผสมพันธุ์ชิปถูกล้างอีกครั้งสำหรับสี
พัฒนา ชิปถูกล้างโดยใช้น้ำยา G และเตาอบแห้ง
(OliproOven HYB001, MY) ที่ 70 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที สุดท้ายชิปถูก
สแกนและจุดบวกระบุการใช้ระบบสแกนเนอร์ (OliproScan,
ของฉัน) ผลในเชิงบวกสำหรับดีเอ็นเอหมูจะถูกระบุโดย
สมบูรณ์แบบไฮบริดที่ตรงกับการสอบสวนเป้าหมายซึ่งเป็นสีฟ้าสีม่วง
สีบนชิป
การแปล กรุณารอสักครู่..
