The activity of free and immobilize

The activity of free and immobilized laccase was determined
spectrophotometrically at 420 nm with 0.5 mM ABTS as substrate
in 0.1 M sodium citrate buffer (pH 4.0) at 25 C (Bourbonnais and
Paice, 1990). The oxidation of substrate to ABTS+ was measured
for 5 min using a UV–vis spectrophotometer (UV-2250, SHIMADZU
Corporation, Japan), with the molar extinction coefficient of
36  103 M1 cm1. One unit (U) of laccase activity was defined
as the amount of enzyme needed to oxidize 1 lmol of ABTS per
minute. The activity recovery of the immobilized enzyme is calculated
from the following formula:
R ð%Þ ¼ ðAi=AfÞ  100
where R is the activity recovery of the immobilized laccase (%), Ai is
the activity of laccase immobilized on CMMC particles (U), and Af is
the activity of the same amount of free laccase in solution as that
adsorbed on particles (U).
To determine the pH-activity profiles of the free and immobilized
laccase, activities were measured in sodium citrate buffer
(0.1 M, pH 2.0–4.0) and phosphate buffer (0.1 M, pH 5.0–8.0) at
25 C. Effects of temperature on the activities of the free and immobilized
enzymes were conducted over the temperature range of
20–80 C at pH 4.0. Here the activity was expressed as relative
forms (%), with the maximal value of enzyme activity at a certain
pH or temperature set as 100%.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กำหนดกิจกรรมของ laccase ฟรี และเอนไซม์spectrophotometrically ที่ 420 nm ด้วย 0.5 mM รเรียนเป็นพื้นผิวใน 0.1 M โซเดียมซิเตรตบัฟเฟอร์ (pH 4.0) ที่ 25 C (Bourbonnais และPaice, 1990) ออกซิเดชันของพื้นผิวการรเรียน + ถูกวัดใน 5 นาทีโดยใช้เครื่องทดสอบกรดด่างเป็น UV – vis (UV-2250, SHIMADZUบริษัท ญี่ปุ่น), กับสัมประสิทธิ์สบดับของ36 10 3 M 1 ซม. 1 หนึ่งหน่วย (U) ของ laccase กิจกรรมถูกกำหนดเป็นจำนวนของเอนไซม์ที่จำเป็นในการออกซิไดซ์ lmol 1 ของรเรียนต่อนาที คำนวณการกู้คืนกิจกรรมของเอนไซม์เอนไซม์จากสูตรต่อไปนี้:ÐAi %Þ¼ð R = AfÞ 100โดยที่ R คือ การฟื้นตัวของกิจกรรมของ laccase เอนไซม์ (%), ไอคือกิจกรรมของ laccase ตรึงบนอนุภาค CMMC (U), และ Af เป็นการจำนวน laccase ฟรีในโซลูชันเป็นที่เดียวกันadsorbed บนอนุภาค (U)การกำหนดโพรไฟล์ค่า pH-กิจกรรมฟรี และเอนไซม์laccase กิจกรรมที่วัดในโซเดียมซิเตรตบัฟเฟอร์(0.1 M, pH 2.0-4.0) และฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (0.1 M ค่า pH 5.0-8.0) ที่25 C. ผลของอุณหภูมิในกิจกรรมอิสระ และเอนไซม์เอนไซม์ได้ดำเนินการช่วงอุณหภูมิของC 20 – 80 ที่ค่า pH 4.0 ที่นี่กิจกรรมถูกแสดงเป็นญาติแบบฟอร์ม (%), มีค่าสูงสุดของเอนไซม์ที่มีบางpH หรืออุณหภูมิที่ตั้งค่าเป็น 100%

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กิจกรรมของแลคเคสฟรีและตรึงถูกกำหนด
spectrophotometrically ที่ 420 นาโนเมตรกับ 0.5 มิลลิ ABTS เป็นสารตั้งต้น
ใน 0.1 M โซเดียมซิเตรทบัฟเฟอร์ (pH 4.0) ที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียส (บูร์บอนและ
Paice, 1990) ออกซิเดชันของสารตั้งต้นที่จะ ABTS + วัด
เป็นเวลา 5 นาทีโดยใช้สเปก UV-Vis (UV-2250, SHIMADZU
คอร์ปอเรชั่นประเทศญี่ปุ่น) โดยมีค่าสัมประสิทธิ์การสูญเสียฟันกรามของ
36? 10? 3 M? 1 ซม 1 หนึ่งหน่วย (U) ของกิจกรรมแลคเคสถูกกำหนด
เป็นปริมาณของเอนไซม์ที่จำเป็นในการออกซิไดซ์ 1 lmol ของ ABTS ต่อ
นาที การกู้คืนการทำงานของเอนไซม์ตรึงที่มีการคำนวณ
จากสูตรต่อไปนี้:
R% d Þ¼ DAI = AfÞ? 100
ที่ R คือการฟื้นตัวของกิจกรรมของแลคเคสตรึง (%), Ai คือการ
ทำงานของแลคเคสตรึงบนอนุภาค CMMC (U) และ Af เป็น
กิจกรรมของจำนวนเงินเดียวกันของแลคเคสฟรีในการแก้ปัญหาเป็นที่
ดูดซับบนอนุภาค (U ).
ตรวจสอบรายละเอียดกิจกรรมค่า pH ของฟรีและตรึง
แลคเคสกิจกรรมได้วัดในบัฟเฟอร์โซเดียมซิเตรท
(0.1 M, ค่า pH 2.0-4.0) และฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (0.1 M, ค่า pH 5.0-8.0) ที่
25 องศาเซลเซียส ผลของอุณหภูมิที่มีต่อกิจกรรมของฟรีและตรึง
เอนไซม์ได้ดำเนินการในช่วงอุณหภูมิ
20-80 องศาเซลเซียสที่ pH 4.0 นี่คือกิจกรรมที่ได้รับการแสดงเป็นญาติ
รูปแบบ (%) โดยมีมูลค่าสูงสุดของเอนไซม์ที่บาง
ค่า pH หรืออุณหภูมิตั้งค่าให้เป็น 100%

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กิจกรรมของฟรีและตรึง - ตั้งใจ
นี้ที่ 420 nm 0.5 มม. Abbr เป็นสับสเตรท
ใน 0.1 โมลาร์โซเดียมซิเตรตบัฟเฟอร์ pH 4.0 ) ที่ 25  C ( Bourbonnais และ
เพซ , 2533 ) ออกซิเดชันของพื้นผิวที่จะ Abbr วัด
5 นาที ใช้ UV Spectrophotometer ( uv-2250 – Vis ,
Shimadzu Corporation , Japan ) ที่มีฟันกรามการสูญพันธุ์สัมประสิทธิ์
36  10  3 M  1 ซม.  1หนึ่งหน่วย ( U ) ของกิจกรรมที่ถูกกำหนดไว้ -
ตามปริมาณของเอนไซม์ที่จำเป็นในการออกซิไดซ์ 1 lmol ของ Abbr ต่อ
นาที กิจกรรมการนำเอนไซม์ คำนวณได้จากสูตรต่อไปนี้ :

% r ðÞ¼ð AI = AF Þ  100
ที่ r คือกิจกรรมการกู้คืนตรึง - ( % ) , Ai
กิจกรรมของแลคเคสที่ถูกตรึงบนอนุภาค cmmc ( u ) และ AF คือ
กิจกรรมของจำนวนเดียวกันของฟรี - ในโซลูชั่นที่ดูดซับบนอนุภาค ( U )
.
หากิจกรรม Ph โปรไฟล์ของฟรีและตรึง
- กิจกรรมที่วัดในโซเดียมซิเตรตบัฟเฟอร์
( 0.1 M pH 2.0 และ 4.0 ) และ 0.1 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 5.0 – 8.0 )
25  C . อิทธิพลของอุณหภูมิที่มีผลต่อกิจกรรมของฟรี
และตรึงเอนไซม์ศึกษาตลอดช่วงอุณหภูมิของ
20 – 80  C ที่ pH 4.0 ที่นี่กิจกรรมจะแสดงเป็นรูปแบบสัมพัทธ์
( % ) ด้วยมูลค่าสูงสุดของกิจกรรมเอนไซม์ที่บาง
pH หรืออุณหภูมิตั้งเป็น 100 %