- ข้อความ
- ประวัติศาสตร์
role in defining the colour and in
role in defining the colour and in developing organoleptic features
according to their proteolytic and lipolytic abilities.
Pursuant to the current Commission Regulation (EC) of 15
November 2005 as amended on microbiological criteria for foodstuffs
(EC Regulation No. 2073/2005), the hygiene criteria include
only the examination of the number of coagulase-positive staphylococci.
The acceptable limit of these bacteria in food has been
established as 105 cfu/g. The Regulation does not refer to the
occurrence of other Staphylococcus species in food. Food is often a
reservoir of these bacteria, and their common occurrence results
primarily from resistance to unfavourable environmental conditions
during the production processes, food storage and high
adaptation abilities of those micro-organisms (Chaje˛cka-
Wierzchowska et al., 2014).
The spread of resistance to antimicrobial agents in staphylococci
is largely due to the acquisition of plasmids and/or transposons
(Lozanoa et al., 2012). In staphylococci, the conjugative transfer of
resistance determinants is usually mediated by conjugative plasmids
which spread resistance determinants between species and
genera (Malachowa and DeLeo, 2010). Besides transferring the
resistance determinants, they can mobilize nonconjugative plasmids,
recombine with nonconjugative plasmids to form new plasmids,
or acquire and transfer resistance transposons (Khan et al.,
2000).
The resistance mechanism in methicillin resistance CoNS is
related to the presence of mecA gene. The mecA gene is located on a
mobile genetic element called Staphylococcal Cassette Chromosome
mec (SCCmec). Horizontal, interspecies transfer of this
element could be an important factor in the dissemination of
methicillin-resistant S. aureus (MRSA) (Bloemendaal et al., 2010).
Tetracycline resistance coded by a wide variety of determinants in
different staphylococcal species is also frequently encountered (De
Vries et al., 2009; Lim et al., 2012). The spread of antibiotic resistance
among CoNS (harbouring resistance genes) from ready to eat
food may represent a hazard for human health through transfer of
resistance genes between staphylococcal species, and through
direct transmission of resistant pathogens to humans (Walther and
Perreten, 2007).
The aim of this study was to determine phenotypic antimicrobial
resistance profiles of CoNS isolated from food of animal origin,
with emphasis on antibiotics of clinical relevance, i.e. b-lactams,
cefoxitin and macrolideelincosamideestreptogramins (MLS)
compounds; to assess associations between species and resistance
profiles furthermore detection of resistance gene tet(M), tet(K),
tet(L), erm(A), erm(B), erm(C), mrs(A/B) and mecA.
2. Materials and methods
2.1. Bacterial strains
Staphylococci were isolated from 146 samples obtained from
various retail ready-to-eat products from animal origin (cheeses,
cured meats, sausages, smoked fishes) obtained from several local
markets in Olsztyn, Poland. Food samples (10 g) were homogenized
in 90 ml buffered peptone water (Merck, Germany), incubated
overnight at 37 C and streaked on selective plates containing
Mannitol Salt Phenol-red Agar (Merck, Germany). Mannitol (þ)
colonies were differentiated into coagulase-positive and coagulasenegative
with a test detecting the production of a clumping factor
(Staphylase Test Kit, Oxoid, United Kingdom) and production of
coagulase on the RPF medium (Biomerieux, France) with rabbit
blood plasma and fibrinogen. After the initial phenotypic analysis,
coagulase-negative strains were identified at the genus level by the
Multiplex PCR method according to the protocols of Morot-Bizot
et al. (2004). DNA of the strains was isolated from single colonies.
The isolation kit applied was based on selective binding and elution
of nucleic acid on a mini column e Genomic Mini (A&A Biotechnology,
Poland), with previous stage of cell wall digestion (Lysostaphin
10 mg/ml) (A&A Biotechnology, Poland). Amplification was
carried out in a MJ Mini thermal cycler (BIO-RAD, Poland). The
research used starters synthesised in the Laboratory of DNA
Sequencing and Oligonucleotide Synthesis (Institute of Biochemistry
and Biophysics of the Polish Academy of Sciences in Warsaw,
Poland) e Table 1. Electrophoretic separation: 100 V e 5 min; 70 V
e 60 min (Cleaver Scientific, UK)was carried out on 1.5% agarose gel
(Promega, Poland) with the addition of ethidium bromide 0.5 mg/
10 ml (MP Biomedicals, Poland). Positive controls included reference
strains: S. aureus ATCC 43300, S. xylosus ATCC 29971,
S. saprophyticus ATCC 49453 and S. epidermidis ATCC 49461. Strains
identified by the PCR method only at the genus level were identified
using API STAPH (Biomerieux, France).
2.2. Phenotypic antibiotic resistance
Resistance to antibiotics was examined according to the guidelines
of the National Reference Centre for Antimicrobial Susceptibility
and internationally recognized standards of the Clinical and
Laboratory Standards Institute (CLSI, 2010). Determinations were
carried out using the diffusion disk method on Müeller-Hinton agar
(Merck, Germany). The following discs (Oxoid, Poland) were used:
erythromycin (E-15 mg), clindamycin (DA-2 mg), gentamicin (CN-
120 mg), cefoxitin (FOX-30 mg), norfloxacin (NOR-10 mg), ciprofloxacin
(CIP-5 mg), tetracycline (TE-30 mg), rifampicin (RD-5 mg),
nitrofurantoin (F-300 mg), linezolid (LZD-30 mg), chloramphenicol
(C-30 mg), trimetoprim (W-5 mg), trimetoprim/sulfamethoxazole
(SXT-25 mg), quinupristin/dalfopristin (QDA-15 mg), tigecycline
(TGC-1 mg). Escherichia coli ATCC 25922 and S. aureus ATCC 29213
were used as reference strains for antibiotic disc control.
Table 1
Oligonucleotides used in PCR reactions.
Species/gene Primer sequence (5'/3') Amplicon
size (bp)
Source
Staphylococcus
spp.
TIACCATTTCAGTACCTTCTGGTAA 370 Morot-Bizot
GGCCGTGTTGAACGTGGTCAAATCA et al., 2004
S. aureus CGTAATGAGATTTCAGTAG
ATAATACAACA
107
AATCTTTGTCGGTACACGA
TATTCTTCACG
S. xylosus AACGCGCAACAGCAATTACG 539
AACGCGCAACGTGATAAAATTAATG
S. epidermidis CAAAAGAGCGTGGAGAAAAGTATCA 124
ATCAAAAAGTTGGCGAACCTTTTCA
S. saprophyticus ACGGGCGTCCACAAAATCAATAGGA 220
TCAAAAAGTTTTCTAAAAAATTTAC
mecA AAAATCGATGGTAAAGGTTGGC 533 Barski
AGTTCTGGCACTACCGGATTTGC et al., 1996
tet(L) TGGTGGAATGATAGCCCATT 229 Rizzotti
CAGGAATGACAGCACGCTAA et al., 2005
tet(M) GTGGACAAAGGTACAACGAG 406
CGGTAAAGTTCGTCACACAC
erm(B) TGGTATTCCAAATGCGTAATG 745
CTGTGGTATGGCGGGTAAGT
tet(K) TTATGGTGGTTGTAGCTAGAAA 348 Gevers
AAAGGGTTAGAAACTCTTGAAA et al., 2003
int (Tn916/
Tn1545)
GCGTGATTGTATCTCACT 1028 Doherty
GACGCTCCTGTTGCTTCT et al., 2000
erm(A) TCTAAAAAGCATGTAAAAGAA 645 Sutcliffe
TGATTATTATTTGATAGCTTC et al., 1996
erm(C) TCAAAACATAATATAGATAAA 642
TAACTGCTAAATTTGTTATAATCG
mrs(A/B) GCAAATGGTGTAGGTAAGACAACT 399
TAAAACAAATGTAGTGTACTA
according to their proteolytic and lipolytic abilities.
Pursuant to the current Commission Regulation (EC) of 15
November 2005 as amended on microbiological criteria for foodstuffs
(EC Regulation No. 2073/2005), the hygiene criteria include
only the examination of the number of coagulase-positive staphylococci.
The acceptable limit of these bacteria in food has been
established as 105 cfu/g. The Regulation does not refer to the
occurrence of other Staphylococcus species in food. Food is often a
reservoir of these bacteria, and their common occurrence results
primarily from resistance to unfavourable environmental conditions
during the production processes, food storage and high
adaptation abilities of those micro-organisms (Chaje˛cka-
Wierzchowska et al., 2014).
The spread of resistance to antimicrobial agents in staphylococci
is largely due to the acquisition of plasmids and/or transposons
(Lozanoa et al., 2012). In staphylococci, the conjugative transfer of
resistance determinants is usually mediated by conjugative plasmids
which spread resistance determinants between species and
genera (Malachowa and DeLeo, 2010). Besides transferring the
resistance determinants, they can mobilize nonconjugative plasmids,
recombine with nonconjugative plasmids to form new plasmids,
or acquire and transfer resistance transposons (Khan et al.,
2000).
The resistance mechanism in methicillin resistance CoNS is
related to the presence of mecA gene. The mecA gene is located on a
mobile genetic element called Staphylococcal Cassette Chromosome
mec (SCCmec). Horizontal, interspecies transfer of this
element could be an important factor in the dissemination of
methicillin-resistant S. aureus (MRSA) (Bloemendaal et al., 2010).
Tetracycline resistance coded by a wide variety of determinants in
different staphylococcal species is also frequently encountered (De
Vries et al., 2009; Lim et al., 2012). The spread of antibiotic resistance
among CoNS (harbouring resistance genes) from ready to eat
food may represent a hazard for human health through transfer of
resistance genes between staphylococcal species, and through
direct transmission of resistant pathogens to humans (Walther and
Perreten, 2007).
The aim of this study was to determine phenotypic antimicrobial
resistance profiles of CoNS isolated from food of animal origin,
with emphasis on antibiotics of clinical relevance, i.e. b-lactams,
cefoxitin and macrolideelincosamideestreptogramins (MLS)
compounds; to assess associations between species and resistance
profiles furthermore detection of resistance gene tet(M), tet(K),
tet(L), erm(A), erm(B), erm(C), mrs(A/B) and mecA.
2. Materials and methods
2.1. Bacterial strains
Staphylococci were isolated from 146 samples obtained from
various retail ready-to-eat products from animal origin (cheeses,
cured meats, sausages, smoked fishes) obtained from several local
markets in Olsztyn, Poland. Food samples (10 g) were homogenized
in 90 ml buffered peptone water (Merck, Germany), incubated
overnight at 37 C and streaked on selective plates containing
Mannitol Salt Phenol-red Agar (Merck, Germany). Mannitol (þ)
colonies were differentiated into coagulase-positive and coagulasenegative
with a test detecting the production of a clumping factor
(Staphylase Test Kit, Oxoid, United Kingdom) and production of
coagulase on the RPF medium (Biomerieux, France) with rabbit
blood plasma and fibrinogen. After the initial phenotypic analysis,
coagulase-negative strains were identified at the genus level by the
Multiplex PCR method according to the protocols of Morot-Bizot
et al. (2004). DNA of the strains was isolated from single colonies.
The isolation kit applied was based on selective binding and elution
of nucleic acid on a mini column e Genomic Mini (A&A Biotechnology,
Poland), with previous stage of cell wall digestion (Lysostaphin
10 mg/ml) (A&A Biotechnology, Poland). Amplification was
carried out in a MJ Mini thermal cycler (BIO-RAD, Poland). The
research used starters synthesised in the Laboratory of DNA
Sequencing and Oligonucleotide Synthesis (Institute of Biochemistry
and Biophysics of the Polish Academy of Sciences in Warsaw,
Poland) e Table 1. Electrophoretic separation: 100 V e 5 min; 70 V
e 60 min (Cleaver Scientific, UK)was carried out on 1.5% agarose gel
(Promega, Poland) with the addition of ethidium bromide 0.5 mg/
10 ml (MP Biomedicals, Poland). Positive controls included reference
strains: S. aureus ATCC 43300, S. xylosus ATCC 29971,
S. saprophyticus ATCC 49453 and S. epidermidis ATCC 49461. Strains
identified by the PCR method only at the genus level were identified
using API STAPH (Biomerieux, France).
2.2. Phenotypic antibiotic resistance
Resistance to antibiotics was examined according to the guidelines
of the National Reference Centre for Antimicrobial Susceptibility
and internationally recognized standards of the Clinical and
Laboratory Standards Institute (CLSI, 2010). Determinations were
carried out using the diffusion disk method on Müeller-Hinton agar
(Merck, Germany). The following discs (Oxoid, Poland) were used:
erythromycin (E-15 mg), clindamycin (DA-2 mg), gentamicin (CN-
120 mg), cefoxitin (FOX-30 mg), norfloxacin (NOR-10 mg), ciprofloxacin
(CIP-5 mg), tetracycline (TE-30 mg), rifampicin (RD-5 mg),
nitrofurantoin (F-300 mg), linezolid (LZD-30 mg), chloramphenicol
(C-30 mg), trimetoprim (W-5 mg), trimetoprim/sulfamethoxazole
(SXT-25 mg), quinupristin/dalfopristin (QDA-15 mg), tigecycline
(TGC-1 mg). Escherichia coli ATCC 25922 and S. aureus ATCC 29213
were used as reference strains for antibiotic disc control.
Table 1
Oligonucleotides used in PCR reactions.
Species/gene Primer sequence (5'/3') Amplicon
size (bp)
Source
Staphylococcus
spp.
TIACCATTTCAGTACCTTCTGGTAA 370 Morot-Bizot
GGCCGTGTTGAACGTGGTCAAATCA et al., 2004
S. aureus CGTAATGAGATTTCAGTAG
ATAATACAACA
107
AATCTTTGTCGGTACACGA
TATTCTTCACG
S. xylosus AACGCGCAACAGCAATTACG 539
AACGCGCAACGTGATAAAATTAATG
S. epidermidis CAAAAGAGCGTGGAGAAAAGTATCA 124
ATCAAAAAGTTGGCGAACCTTTTCA
S. saprophyticus ACGGGCGTCCACAAAATCAATAGGA 220
TCAAAAAGTTTTCTAAAAAATTTAC
mecA AAAATCGATGGTAAAGGTTGGC 533 Barski
AGTTCTGGCACTACCGGATTTGC et al., 1996
tet(L) TGGTGGAATGATAGCCCATT 229 Rizzotti
CAGGAATGACAGCACGCTAA et al., 2005
tet(M) GTGGACAAAGGTACAACGAG 406
CGGTAAAGTTCGTCACACAC
erm(B) TGGTATTCCAAATGCGTAATG 745
CTGTGGTATGGCGGGTAAGT
tet(K) TTATGGTGGTTGTAGCTAGAAA 348 Gevers
AAAGGGTTAGAAACTCTTGAAA et al., 2003
int (Tn916/
Tn1545)
GCGTGATTGTATCTCACT 1028 Doherty
GACGCTCCTGTTGCTTCT et al., 2000
erm(A) TCTAAAAAGCATGTAAAAGAA 645 Sutcliffe
TGATTATTATTTGATAGCTTC et al., 1996
erm(C) TCAAAACATAATATAGATAAA 642
TAACTGCTAAATTTGTTATAATCG
mrs(A/B) GCAAATGGTGTAGGTAAGACAACT 399
TAAAACAAATGTAGTGTACTA
0/5000
role in defining the colour and in developing organoleptic featuresaccording to their proteolytic and lipolytic abilities.Pursuant to the current Commission Regulation (EC) of 15November 2005 as amended on microbiological criteria for foodstuffs(EC Regulation No. 2073/2005), the hygiene criteria includeonly the examination of the number of coagulase-positive staphylococci.The acceptable limit of these bacteria in food has beenestablished as 105 cfu/g. The Regulation does not refer to theoccurrence of other Staphylococcus species in food. Food is often areservoir of these bacteria, and their common occurrence resultsprimarily from resistance to unfavourable environmental conditionsduring the production processes, food storage and highadaptation abilities of those micro-organisms (Chaje˛cka-Wierzchowska et al., 2014).The spread of resistance to antimicrobial agents in staphylococciis largely due to the acquisition of plasmids and/or transposons(Lozanoa et al., 2012). In staphylococci, the conjugative transfer ofresistance determinants is usually mediated by conjugative plasmidswhich spread resistance determinants between species andgenera (Malachowa and DeLeo, 2010). Besides transferring theresistance determinants, they can mobilize nonconjugative plasmids,recombine with nonconjugative plasmids to form new plasmids,or acquire and transfer resistance transposons (Khan et al.,2000).The resistance mechanism in methicillin resistance CoNS isrelated to the presence of mecA gene. The mecA gene is located on amobile genetic element called Staphylococcal Cassette Chromosomemec (SCCmec). Horizontal, interspecies transfer of thiselement could be an important factor in the dissemination ofmethicillin-resistant S. aureus (MRSA) (Bloemendaal et al., 2010).Tetracycline resistance coded by a wide variety of determinants indifferent staphylococcal species is also frequently encountered (DeVries et al., 2009; Lim et al., 2012). The spread of antibiotic resistanceamong CoNS (harbouring resistance genes) from ready to eatfood may represent a hazard for human health through transfer ofresistance genes between staphylococcal species, and throughdirect transmission of resistant pathogens to humans (Walther andPerreten, 2007).The aim of this study was to determine phenotypic antimicrobialresistance profiles of CoNS isolated from food of animal origin,with emphasis on antibiotics of clinical relevance, i.e. b-lactams,cefoxitin and macrolideelincosamideestreptogramins (MLS)compounds; to assess associations between species and resistanceprofiles furthermore detection of resistance gene tet(M), tet(K),tet(L), erm(A), erm(B), erm(C), mrs(A/B) and mecA.2. Materials and methods2.1. Bacterial strainsStaphylococci were isolated from 146 samples obtained fromvarious retail ready-to-eat products from animal origin (cheeses,cured meats, sausages, smoked fishes) obtained from several localmarkets in Olsztyn, Poland. Food samples (10 g) were homogenizedin 90 ml buffered peptone water (Merck, Germany), incubatedovernight at 37 C and streaked on selective plates containingMannitol Salt Phenol-red Agar (Merck, Germany). Mannitol (þ)colonies were differentiated into coagulase-positive and coagulasenegativewith a test detecting the production of a clumping factor(Staphylase Test Kit, Oxoid, United Kingdom) and production ofcoagulase on the RPF medium (Biomerieux, France) with rabbitblood plasma and fibrinogen. After the initial phenotypic analysis,coagulase-negative strains were identified at the genus level by theMultiplex PCR method according to the protocols of Morot-Bizotet al. (2004). DNA of the strains was isolated from single colonies.The isolation kit applied was based on selective binding and elutionof nucleic acid on a mini column e Genomic Mini (A&A Biotechnology,Poland), with previous stage of cell wall digestion (Lysostaphin10 mg/ml) (A&A Biotechnology, Poland). Amplification wascarried out in a MJ Mini thermal cycler (BIO-RAD, Poland). Theresearch used starters synthesised in the Laboratory of DNASequencing and Oligonucleotide Synthesis (Institute of Biochemistryand Biophysics of the Polish Academy of Sciences in Warsaw,Poland) e Table 1. Electrophoretic separation: 100 V e 5 min; 70 Ve 60 min (Cleaver Scientific, UK)was carried out on 1.5% agarose gel(Promega, Poland) with the addition of ethidium bromide 0.5 mg/10 ml (MP Biomedicals, Poland). Positive controls included referencestrains: S. aureus ATCC 43300, S. xylosus ATCC 29971,S. saprophyticus ATCC 49453 and S. epidermidis ATCC 49461. Strainsidentified by the PCR method only at the genus level were identifiedusing API STAPH (Biomerieux, France).2.2. Phenotypic antibiotic resistanceResistance to antibiotics was examined according to the guidelinesof the National Reference Centre for Antimicrobial Susceptibilityand internationally recognized standards of the Clinical andLaboratory Standards Institute (CLSI, 2010). Determinations werecarried out using the diffusion disk method on Müeller-Hinton agar(Merck, Germany). The following discs (Oxoid, Poland) were used:erythromycin (E-15 mg), clindamycin (DA-2 mg), gentamicin (CN-120 mg), cefoxitin (FOX-30 mg), norfloxacin (NOR-10 mg), ciprofloxacin(CIP-5 mg), tetracycline (TE-30 mg), rifampicin (RD-5 mg),nitrofurantoin (F-300 mg), linezolid (LZD-30 mg), chloramphenicol(C-30 mg), trimetoprim (W-5 mg), trimetoprim/sulfamethoxazole(SXT-25 mg), quinupristin/dalfopristin (QDA-15 mg), tigecycline(TGC-1 mg). Escherichia coli ATCC 25922 and S. aureus ATCC 29213were used as reference strains for antibiotic disc control.Table 1Oligonucleotides used in PCR reactions.Species/gene Primer sequence (5'/3') Ampliconsize (bp)SourceStaphylococcusspp.TIACCATTTCAGTACCTTCTGGTAA 370 Morot-BizotGGCCGTGTTGAACGTGGTCAAATCA et al., 2004S. aureus CGTAATGAGATTTCAGTAGATAATACAACA107AATCTTTGTCGGTACACGATATTCTTCACGS. xylosus AACGCGCAACAGCAATTACG 539AACGCGCAACGTGATAAAATTAATGS. epidermidis CAAAAGAGCGTGGAGAAAAGTATCA 124ATCAAAAAGTTGGCGAACCTTTTCAS. saprophyticus ACGGGCGTCCACAAAATCAATAGGA 220TCAAAAAGTTTTCTAAAAAATTTACmecA AAAATCGATGGTAAAGGTTGGC 533 BarskiAGTTCTGGCACTACCGGATTTGC et al., 1996tet(L) TGGTGGAATGATAGCCCATT 229 RizzottiCAGGAATGACAGCACGCTAA et al., 2005tet(M) GTGGACAAAGGTACAACGAG 406CGGTAAAGTTCGTCACACACerm(B) TGGTATTCCAAATGCGTAATG 745CTGTGGTATGGCGGGTAAGTtet(K) TTATGGTGGTTGTAGCTAGAAA 348 GeversAAAGGGTTAGAAACTCTTGAAA et al., 2003int (Tn916/Tn1545)GCGTGATTGTATCTCACT 1028 DohertyGACGCTCCTGTTGCTTCT et al., 2000erm(A) TCTAAAAAGCATGTAAAAGAA 645 SutcliffeTGATTATTATTTGATAGCTTC et al., 1996erm(C) TCAAAACATAATATAGATAAA 642TAACTGCTAAATTTGTTATAATCGmrs(A/B) GCAAATGGTGTAGGTAAGACAACT 399TAAAACAAATGTAGTGTACTA
การแปล กรุณารอสักครู่..
บทบาทในการกำหนดสีและคุณสมบัติในการพัฒนาประสาทสัมผัสตามโปรตีนและความสามารถของพวกเขา lipolytic. ตามที่สำนักงานคณะกรรมการกำกับกฎระเบียบในปัจจุบัน (EC) วันที่ 15 เดือนพฤศจิกายนปี 2005 เป็นการแก้ไขเกณฑ์ที่ทางจุลชีววิทยาสำหรับอาหาร(EC กฎกระทรวงฉบับที่ 2073/2005) สุขอนามัย เกณฑ์ที่รวมเพียงการตรวจสอบจำนวนของเชื้อcoagulase บวก. ขีด จำกัด ที่ยอมรับได้ของเชื้อแบคทีเรียเหล่านี้ในอาหารที่ได้รับการก่อตั้งขึ้นเป็น105 cfu / g ระเบียบไม่ได้หมายถึงการเกิดขึ้นของสายพันธุ์เชื้อ Staphylococcus อื่น ๆ ในอาหาร อาหารมักจะเป็นอ่างเก็บน้ำของเชื้อแบคทีเรียเหล่านี้และเกิดขึ้นร่วมกันของพวกเขาส่งผลให้ส่วนใหญ่มาจากความต้านทานต่อสภาพแวดล้อมที่ไม่เอื้ออำนวยในช่วงกระบวนการผลิตการเก็บรักษาอาหารสูงและความสามารถในการปรับตัวของผู้จุลินทรีย์(Chaje˛cka- Wierzchowska et al., 2014) การแพร่กระจายของความต้านทานต่อยาต้านจุลชีพในเชื้อเป็นส่วนใหญ่เนื่องจากการซื้อกิจการของพลาสมิดและ / หรือ transposons (Lozanoa et al., 2012) ในเชื้อ, การถ่ายโอน conjugative ของปัจจัยต้านทานเป็นผู้ไกล่เกลี่ยโดยปกติพลาสมิดconjugative ซึ่งแผ่กระจายปัจจัยต้านทานระหว่างชนิดและจำพวก (Malachowa และ DeLeo 2010) นอกจากนี้การถ่ายโอนปัจจัยต้านทานพวกเขาสามารถระดมพลาสมิด nonconjugative, recombine ที่มีพลาสมิด nonconjugative ในรูปแบบพลาสมิดใหม่หรือได้รับและโอนtransposons ต้านทาน (Khan et al., 2000). กลไกการต้านทานในข้อเสียต้านทาน methicillin จะเกี่ยวข้องกับการปรากฏตัวของMeca ยีน. ยีน Meca ตั้งอยู่บนองค์ประกอบทางพันธุกรรมที่เรียกว่ามือถือจากเชื้อเทปโครโมโซมMEC (SCCmec) แนวนอน, การถ่ายโอน interspecies นี้องค์ประกอบอาจจะเป็นปัจจัยที่สำคัญในการเผยแพร่ของmethicillin ทนเชื้อ S. aureus (MRSA) (Bloemendaal et al., 2010). ต้านทาน Tetracycline เขียนโดยความหลากหลายของปัจจัยในสายพันธุ์ที่แตกต่างกันstaphylococcal ยังเป็นบ่อย พบ (De Vries et al, 2009;.. ลิม et al, 2012) การแพร่กระจายของความต้านทานยาปฏิชีวนะในหมู่ข้อเสีย (เก็บงำยีนต้านทาน) จากพร้อมที่จะกินอาหารที่อาจจะเป็นอันตรายต่อสุขภาพของมนุษย์โดยโอนผ่านของยีนต้านทานระหว่างสายพันธุ์staphylococcal และผ่านการส่งผ่านโดยตรงของโรคที่ดื้อต่อมนุษย์(วอลเธอร์และPerreten 2007) จุดมุ่งหมายของการศึกษาครั้งนี้เพื่อตรวจสอบยาต้านจุลชีพฟีโนไทป์โปรไฟล์ความต้านทานของข้อเสียที่แยกได้จากอาหารที่ได้จากสัตว์ที่มีความสำคัญในการใช้ยาปฏิชีวนะของความเกี่ยวข้องทางคลินิกคือB-lactams, cefoxitin และ macrolideelincosamideestreptogramins (MLS) สาร; เพื่อประเมินความสัมพันธ์ระหว่างชนิดและความต้านทานโปรไฟล์นอกจากนี้การตรวจสอบของยีนต้านทานเทต (M), เทต (K) เทต (L), ERM (A), ERM (B), ERM (C) นาง (A / B) และ Meca. 2 วัสดุและวิธีการ2.1 สายพันธุ์แบคทีเรียเชื้อที่แยกได้จาก 146 ตัวอย่างที่ได้จากการต่างๆค้าปลีกพร้อมที่จะกินผลิตภัณฑ์จากสัตว์(เนยแข็งเนื้อสัตว์หายไส้กรอกปลารมควัน) ที่ได้รับจากประเทศหลายตลาดในOlsztyn, โปแลนด์ ตัวอย่างอาหาร (10 กรัม) กำลังหดหาย90 มล. น้ำเปปโตนบัฟเฟอร์ (เมอร์ค, เยอรมนี) บ่มค้างคืนที่37 องศาเซลเซียสและลายบนจานที่มีการคัดเลือกแมนนิทอลซอลฟีนอลสีแดงวุ้น(เมอร์ค, เยอรมนี) แมนนิทอล (TH) อาณานิคมแตกต่างออกเป็น coagulase บวกและ coagulasenegative กับการทดสอบการตรวจสอบการผลิตเป็นปัจจัย clumping (Staphylase ชุดทดสอบ Oxoid สหราชอาณาจักร) และการผลิตของcoagulase ในสื่อ RPF (Biomerieux ฝรั่งเศส) กับกระต่ายเลือดและ fibrinogen หลังจากที่เริ่มต้นการวิเคราะห์ฟีโนไทป์, สายพันธุ์ coagulase ลบถูกระบุว่าอยู่ในระดับที่พืชและสัตว์โดยวิธีPCR Multiplex ตามโปรโตคอลของ Morot-Bizot et al, (2004) ดีเอ็นเอของสายพันธุ์ที่แยกได้จากโคโลนีที่เดียว. ชุดแยกนำไปใช้ก็ขึ้นอยู่กับผูกพันและชะเลือกของกรดนิวคลีอิกในคอลัมน์มินิอีจีโนมมินิ (A & A เทคโนโลยีชีวภาพโปแลนด์) มีขั้นตอนก่อนหน้าของการย่อยผนังเซลล์ (Lysostaphin 10 มิลลิกรัม / มล.) (A & A เทคโนโลยีชีวภาพโปแลนด์) ขยายได้รับการดำเนินการในการระบายความร้อน Cycler MJ มินิ (BIO-RAD โปแลนด์) วิจัยใช้การเริ่มสังเคราะห์ในห้องปฏิบัติการดีเอ็นเอลำดับและ Oligonucleotide สังเคราะห์ (สถาบันชีวเคมีและชีวฟิสิกส์ของโปแลนด์Academy of Sciences ในวอร์ซอ, โปแลนด์) จตารางที่ 1 การแยก Electrophoretic: 100 V อี 5 นาที; 70 วีอี60 นาที (ตวิทยาศาสตร์สหราชอาณาจักร) ได้รับการดำเนินการเกี่ยวกับ 1.5% agarose เจล(Promega, โปแลนด์) ด้วยนอกเหนือจากโบรไมด์ ethidium 0.5 มก. / 10 มล. (MP Biomedicals โปแลนด์) การควบคุมเชิงบวกรวมถึงการอ้างอิงสายพันธุ์: aureus ATCC เอส 43300 เอส xylosus ATCC 29971, เอส saprophyticus ATCC 49453 และ S. epidermidis ATCC 49461. สายพันธุ์ระบุโดยวิธีPCR เพียงในระดับสกุลที่ถูกระบุโดยใช้API Staph (Biomerieux ฝรั่งเศส). 2.2 ต้านทานยาปฏิชีวนะฟีโนไทป์ต้านทานต่อยาปฏิชีวนะที่ถูกตรวจสอบตามแนวทางของศูนย์แห่งชาติเพื่อการอ้างอิงไวต่อยาต้านจุลชีพและมาตรฐานการยอมรับในระดับสากลของคลินิกและมาตรฐานห้องปฏิบัติการสถาบัน(CLSI 2010) หาความถูกดำเนินการโดยใช้วิธีการแพร่กระจายดิสก์บน Mueller-Hinton agar (เมอร์ค, เยอรมนี) แผ่นดังต่อไปนี้ (Oxoid โปแลนด์) ถูกนำมาใช้: erythromycin (E-15 mg), clindamycin (DA-2 มิลลิกรัม) gentamicin (CN- 120 มก.) cefoxitin (FOX-30 mg), norfloxacin (NOR-10 mg) เสริมแรง(CIP-5 มก.) tetracycline (TE-30 mg), rifampicin (RD-5 มิลลิกรัม) nitrofurantoin (F-300 มก.) linezolid (LZD-30 mg), chloramphenicol (C-30 mg) trimetoprim (W-5 มิลลิกรัม) trimetoprim / sulfamethoxazole (SXT-25 mg) quinupristin / dalfopristin (QDA-15 mg) tigecycline (TGC-1 มก.) อีโค ATCC 25922 และ S. aureus ATCC 29213 ถูกนำมาใช้เป็นสายพันธุ์อ้างอิงสำหรับการควบคุมแผ่นยาปฏิชีวนะ. ตารางที่ 1 oligonucleotides ใช้ในปฏิกิริยา PCR. สายพันธุ์ / ยีนลำดับไพรเมอร์ (5/3 ') Amplicon ขนาด (bp) แหล่งที่มาของเชื้อ Staphylococcus spp. TIACCATTTCAGTACCTTCTGGTAA 370 Morot-Bizot GGCCGTGTTGAACGTGGTCAAATCA et al., 2004 เอส aureus CGTAATGAGATTTCAGTAG ATAATACAACA 107 AATCTTTGTCGGTACACGA TATTCTTCACG เอส xylosus AACGCGCAACAGCAATTACG 539 AACGCGCAACGTGATAAAATTAATG เอส epidermidis CAAAAGAGCGTGGAGAAAAGTATCA 124 ATCAAAAAGTTGGCGAACCTTTTCA เอส saprophyticus ACGGGCGTCCACAAAATCAATAGGA 220 TCAAAAAGTTTTCTAAAAAATTTAC Meca AAAATCGATGGTAAAGGTTGGC 533 Barski AGTTCTGGCACTACCGGATTTGC et al., 1996 เทต (L) TGGTGGAATGATAGCCCATT 229 Rizzotti CAGGAATGACAGCACGCTAA et al., 2005 เทต (M) GTGGACAAAGGTACAACGAG 406 CGGTAAAGTTCGTCACACAC ERM (B) TGGTATTCCAAATGCGTAATG 745 CTGTGGTATGGCGGGTAAGT เทต (K) TTATGGTGGTTGTAGCTAGAAA 348 Gevers AAAGGGTTAGAAACTCTTGAAA et al., 2003 int (Tn916 / Tn1545) GCGTGATTGTATCTCACT 1028 โดเฮอร์ตี้GACGCTCCTGTTGCTTCT et al., 2000 ERM (A) TCTAAAAAGCATGTAAAAGAA 645 Sutcliffe TGATTATTATTTGATAGCTTC et al., 1996 ERM (C) TCAAAACATAATATAGATAAA 642 TAACTGCTAAATTTGTTATAATCG นาง (A / B) GCAAATGGTGTAGGTAAGACAACT 399 TAAAACAAATGTAGTGTACTA
การแปล กรุณารอสักครู่..
บทบาทในการกำหนดสี และในการพัฒนาคุณลักษณะทางประสาทสัมผัส
ตามความสามารถและความสามารถในกับพวกเขา ตาม ระเบียบที่คณะกรรมการปัจจุบัน
( EC ) 15 พฤศจิกายน 2005 แก้ไขเพิ่มเติมในเกณฑ์ทางจุลชีววิทยาสำหรับของกิน
( ระเบียบ EC หมายเลข 2073 / 2005 ) , สุขอนามัยหลักเกณฑ์รวม
เพียงการตรวจสอบหมายเลขของโคกูเลส
กลุ่มบวกการยอมรับขีด จำกัด ของแบคทีเรียเหล่านี้ในอาหารที่ได้รับ
ก่อตั้งขึ้นเป็น 105 CFU / กรัม ระเบียบไม่ได้อ้างถึง
เกิดแบคทีเรียชนิดอื่น ๆ ในอาหาร อาหารมัก
แหล่งสะสมของแบคทีเรียเหล่านี้ และผลที่เกิดขึ้นทั่วไปของพวกเขา
หลักจากความต้านทานปรับสภาพสิ่งแวดล้อม
ในระหว่างกระบวนการผลิต การเก็บรักษาอาหารและสูง
ความสามารถในการปรับตัวของจุลินทรีย์เหล่านั้น ( chaje ˛ cka -
wierzchowska et al . , 2010 ) .
แพร่กระจายของความต้านทานต่อยาต้านจุลชีพในกลุ่ม
เป็นส่วนใหญ่เนื่องจากการเข้าซื้อกิจการของพลาสมิดและ / หรือ transposons
( lozanoa et al . , 2012 ) ในความแตกต่างของปัจจัยการโอน conjugative
ต้านทานมักจะโดย conjugative พลาส
โดยซึ่งกระจายปัจจัยต้านทานระหว่างชนิดและสกุล (
malachowa และเดลีโอ้ , 2010 ) นอกจากนี้การถ่ายโอน
ต้านทานปัจจัย พวกเขาสามารถระดม nonconjugative เพื่อ
แขกกับ nonconjugative พลาสมิดในรูปแบบพลาสมิดใหม่
หรือได้รับโอน transposons และความต้านทาน ( ข่าน et al . ,
2 )
ต่อต้านกลไกต้านทานเมทิซิลลิน
ข้อเสียคือ
ตามความสามารถและความสามารถในกับพวกเขา ตาม ระเบียบที่คณะกรรมการปัจจุบัน
( EC ) 15 พฤศจิกายน 2005 แก้ไขเพิ่มเติมในเกณฑ์ทางจุลชีววิทยาสำหรับของกิน
( ระเบียบ EC หมายเลข 2073 / 2005 ) , สุขอนามัยหลักเกณฑ์รวม
เพียงการตรวจสอบหมายเลขของโคกูเลส
กลุ่มบวกการยอมรับขีด จำกัด ของแบคทีเรียเหล่านี้ในอาหารที่ได้รับ
ก่อตั้งขึ้นเป็น 105 CFU / กรัม ระเบียบไม่ได้อ้างถึง
เกิดแบคทีเรียชนิดอื่น ๆ ในอาหาร อาหารมัก
แหล่งสะสมของแบคทีเรียเหล่านี้ และผลที่เกิดขึ้นทั่วไปของพวกเขา
หลักจากความต้านทานปรับสภาพสิ่งแวดล้อม
ในระหว่างกระบวนการผลิต การเก็บรักษาอาหารและสูง
ความสามารถในการปรับตัวของจุลินทรีย์เหล่านั้น ( chaje ˛ cka -
wierzchowska et al . , 2010 ) .
แพร่กระจายของความต้านทานต่อยาต้านจุลชีพในกลุ่ม
เป็นส่วนใหญ่เนื่องจากการเข้าซื้อกิจการของพลาสมิดและ / หรือ transposons
( lozanoa et al . , 2012 ) ในความแตกต่างของปัจจัยการโอน conjugative
ต้านทานมักจะโดย conjugative พลาส
โดยซึ่งกระจายปัจจัยต้านทานระหว่างชนิดและสกุล (
malachowa และเดลีโอ้ , 2010 ) นอกจากนี้การถ่ายโอน
ต้านทานปัจจัย พวกเขาสามารถระดม nonconjugative เพื่อ
แขกกับ nonconjugative พลาสมิดในรูปแบบพลาสมิดใหม่
หรือได้รับโอน transposons และความต้านทาน ( ข่าน et al . ,
2 )
ต่อต้านกลไกต้านทานเมทิซิลลิน
ข้อเสียคือ
การแปล กรุณารอสักครู่..
ภาษาอื่น ๆ
การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.
- In this time LSG has transferred the cus
- ถ้าวันข้างหน้าปัญหายังคงอยู่
- อุตสาหกรรมชิ้นส่วนพลิกเกมแก้แรงงานขาด อุ
- ตรวจสุขภาพประจำปี
- suboptimal
- ล้างผัก
- Advances in ultrasonic testing of austen
- Yik Yak is a Chat App That Lets You Shar
- You see, this young engineer Attilus bui
- จี๊ด
- อุตสาหกรรมชิ้นส่วนพลิกเกมแก้แรงงานขาด อุ
- จี๊ด
- for selecting to display all upper leve
- Advantages
- The study on the subject of communicatio
- Miss friend
- แต่อีกเหตุผลหนึ่ง จีนอาจไม่ต้องการมีพันธ
- Good job diana
- เพิ่มวงเงินในประกันภัยให้เหมาะสมกับภาวะป
- In this time LSG has transferred the cus
- แต่อีกเหตุผลหนึ่ง จีนอาจไม่ต้องการมีพันธ
- หนวด
- You decide to conduct
- In an important case decided in 1819
