Tomato juice intake suppressed seru

Tomato juice intake suppressed serum concentration of 8-oxodG after extensive physical activity
Mats Harms-Ringdahl, Dag Jenssen and SiamakHaghdoost*
Abstract
Background
DNA is constantly exposed to reactive oxygen species (ROS), spontaneously arising during the normal oxygen metabolism. ROS may result in temporary as well as permanent modifications in various cellular components such as lipids, proteins and DNA, which may have deleterious consequences. Demonstrating that a dietary supplementation of antioxidants can reduce oxidative DNA damage may provide evidence for the value of such supplementation in prevention of cancer and age related diseases.
Findings
The present study was conducted to address whether tomato juice protects against ROS induced by extensive physical exercise in untrained individuals. As a marker of oxidative stress, serum levels of 8-oxodG were monitored using a modified ELISA. An intervention was performed involving 15 untrained healthy subjects who performed a 20 min physical exercise at 80% of maximum pulse using an ergometer bicycle. Blood samples were taken before and one hour after the exercise. The procedure was repeated after 5 weeks with a daily intake of 150 ml tomato juice and followed by a 5 weeks wash-out period and another 5 weeks with a daily intake of tomato juice. The results indicated that a daily intake of tomato juice, equal to 15 mg lycopene per day, for 5 weeks significantly reduced the serum levels of 8-oxodG after an extensive physical exercise.


Conclusion
These data strongly suggest that tomato juice has a potential antioxidant effect and may reduce the elevated level of ROS induced by oxidative stress.
Keywords:
Reactive oxygen species; ROS; Free radicals; Exercise; Lycopene; Tomato juice; Life style; ELISA; hMTH1; 8-oxo-dG
Findings
It has been suggested that dietary antioxidants reduce the level of oxidative DNA damage induced by reactive oxygen species. However, there are limited in vivo studies which support this hypothesis as a number of epidemiological studies showed no such effect following dietary supplementation with carotenoids, vitamin C, or E [1,2]. Urinary concentration of 8-hydroxy-2′-deoxyguanosine (8-oxodG, a base damage formed by reactive oxygen species) has been used as a non-invasive biomarker of oxidative DNA base damage in a number of studies [3,4].
Reactive oxygen species (ROS) have been suggested to play an important role in mutagenesis, carcinogenesis, and aging processes. ROS can react with different cellular components e.g., proteins, lipids and nucleic acids, and give rise to chemical modifications. Under normal conditions cellular antioxidant enzymes and other antioxidants in the cell detoxify elevated levels of ROS and minimize damage to intracellular components. However, under extensive physiological activity ATP consumption will increase followed by increased oxygen consumption and, as a consequence, the production of ROS will increase [5]. Healthy and/or well-trained persons and vegetarians seem to have increased protection against ROS-induced damages [6]. It suggests that regular physical exercise [7] and a diet rich in antioxidant [8] may have a protective effect towards ROS-induced damage, in particular DNA base damage. One of the frequently studied DNA base damages is 8-oxodG. Highly effective repair mechanisms are operating both on DNA (e.g., hOGG1) and the nucleotide pool (hMTH1) to remove 8-oxodG/8-oxodGTP from the cell [9,10]. Previously, we have shown that extracellular 8-oxodG originates from the nucleotide pool and may serve as a sensitive marker of oxidative stress [11]. We have developed an ELISA method that allows the determination of the very low concentrations of 8-oxodG present in human blood serum [11-13].
In the present study we aimed to investigate the protective effect of tomato juice intake towards ROS induced by 20 min of extensive physical exercise. A novel finding in the present intervention study was that the level of 8-oxodG in human blood serum was increased significantly after 20 min acute physical activity possibly caused by an increase of the intracellular ROS level. No increase was observed when individuals had been drinking 150 ml tomato juice per day during a period of 5 weeks suggesting that the intracellular nucleic acids and, in particular, the nucleotide pool were unaffected and well protected from the deleterious effect of ROS. The intervention study support the hypothesis that antioxidants (e.g. lycopene) supplied from tomato juice may protect against oxidative stress induced by extensive physical exercise.
Materials and methods
In this study 15 healthy and untrained donors (Table 1) were asked to drink 150 ml tomato juice per day in 2 periods of 5 weeks each as follows: 5 weeks with tomato juice, 5 weeks without tomato juice and 5 weeks with tomato juice. Blood samples were collected before and after start of each period during the intervention study. At the day for blood collection, the individuals were asked to do 20 min physical exercise with 80% max pulse using an ergometer bicycle. To calculate the individual maximum pulse, the following generally accepted formula was used: 220 - age =maximum pulse. Blood samples were collected before and after exercise. The serum level of 8-oxodG was analyzed as a marker of oxidative stress. Of note, this intervention study was designed according to recommendations which have been published by Loft and co-workers [14]. The study was performed in accordance with the ethical standards and approved by the Swedish Ethical Committee at the Karolinska University Hospital (Dnr 03–621).
Table 1.Main characteristics of the donors
Analysis of 8-oxodG in blood serum
Just before and one hour after each training session (20 min cycling), blood samples were collected in tubes without anticoagulant. After complete coagulation of the blood samples, the blood serum was isolated. 8-OxodG concentration of blood serum was measured using ELISA as described previously [11,15]. The ELISA kit was provided by Health Biomarkers Sweden AB. Briefly, 1 ml blood serum was purified using a C18 solid phase extraction column (Varian, CA) according to a previously published method [16]. This step is necessary to remove products other than 8-oxodG which could cross-react with the monoclonal antibody used in the kit. A standard curve for 8-oxodG (0.05 - 10 ng/ml) was established for each plate covering the range of 8-oxodG in the samples. One sample in each experiment was mixed with 1 ng 8-oxodG before purification which served as internal standard. Validation of the modified ELISA method was performed by HPLC-EC (r2: 0.87, p 

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เซรั่มเข้มข้น 8-oxodG หลังจากกิจกรรมทางกายภาพอย่างละเอียดระงับบริโภคน้ำมะเขือเทศเสื่อ Harms Ringdahl พื้นที่ Jenssen และ SiamakHaghdoost *บทคัดย่อพื้นหลังดีเอ็นเอตลอดเวลาสัมผัสกับชนิดปฏิกิริยาออกซิเจน (ROS), ธรรมชาติเกิดขึ้นในระหว่างการเผาผลาญออกซิเจนปกติ ROS อาจส่งผลการแก้ไขชั่วคราว เป็นถาวรในส่วนประกอบของเซลล์ต่าง ๆ เช่นโครงการ โปรตีน และ DNA ซึ่งอาจมีผลร้าย เห็นว่า แห้งเสริมอาหารของสารต้านอนุมูลอิสระสามารถลดความเสียหายของดีเอ็นเอ oxidative อาจแสดงหลักฐานสำหรับค่าของดังกล่าวแห้งเสริมในการป้องกันมะเร็ง และอายุโรคที่เกี่ยวข้อง พบปัจจุบันการวิจัยกล่าวว่าน้ำมะเขือเทศป้องกัน ROS เกิดจากกายละเอียดในบุคคลที่ฝึกฝน เป็นเครื่องหมายของความเครียด oxidative เซรั่มระดับ 8 oxodG ได้ตรวจสอบใช้ ELISA แก้ไข การแทรกแซงที่ดำเนินการเกี่ยวข้องกับ 15 ฝึกฝนเพื่อสุขภาพเรื่องที่ดำเนินกาย 20 นาทีที่ 80% ของชีพจรสูงสุดที่ใช้จักรยาน ergometer มี ได้นำตัวอย่างเลือดก่อน และหลังการออกกำลังกาย 1 ชั่วโมง ขั้นตอนการทำซ้ำหลังจาก 5 สัปดาห์กับบริโภคประจำวันของน้ำมะเขือเทศ 150 ml และตามระยะเวลา 5 สัปดาห์ล้างออกและอีก 5 สัปดาห์กับบริโภคประจำวันของน้ำมะเขือเทศ ผลระบุว่า การบริโภคประจำวันของน้ำมะเขือเทศ เท่ากับ lycopene 15 มิลลิกรัมต่อวัน สัปดาห์ที่ 5 ลดระดับซีรั่มของ 8 oxodG หลังจากการออกกำลังกายทางกายภาพอย่างละเอียด บทสรุปข้อมูลเหล่านี้ขอแนะนำว่า น้ำมะเขือเทศมีผลต้านอนุมูลอิสระมีศักยภาพ และอาจลดระดับสูงเกิดจากความเครียด oxidative ROS คำสำคัญ: ปฏิกิริยาออกซิเจนชนิด ROS อนุมูลอิสระ ออกกำลังกาย Lycopene น้ำมะเขือเทศ วิถีชีวิต ELISA hMTH1 กิจ 8 oxoพบจะมีการแนะนำว่า อาหารสารต้านอนุมูลอิสระช่วยลดระดับของความเสียหาย DNA oxidative ที่เกิดจากปฏิกิริยาออกซิเจนชนิด อย่างไรก็ตาม มีศึกษาในสัตว์ทดลองจำกัดซึ่งสนับสนุนสมมติฐานนี้แสดงให้เห็นว่าไม่ดังกล่าวมีผลต่ออาหารแห้งเสริม กับ carotenoids, vitamin C, E [1, 2] การศึกษาความเป็น เข้มข้น 8-hydroxy-2′-deoxyguanosine (8-oxodG ความเสียหายที่ฐานที่เกิดขึ้นจากปฏิกิริยาออกซิเจนชนิด) ท่อปัสสาวะมีการใช้เป็นไบโอมาร์คเกอร์ไม่รุกรานของ oxidative DNA เสียหายพื้นฐานในการศึกษา [3, 4] มีการแนะนำพันธุ์ปฏิกิริยาออกซิเจน (ROS) จะมีบทบาทสำคัญใน mutagenesis, carcinogenesis และกระบวนการอายุ ROS สามารถตอบสนองกับมือถือส่วนประกอบอื่น ๆ เช่น โปรตีน กรดนิวคลีอิก และโครงการ และก่อให้เกิดการเปลี่ยนแปลงทางเคมี ภายใต้เงื่อนไขปกติเซลล์ต้านอนุมูลอิสระ เอนไซม์และสารต้านอนุมูลอิสระอื่น ๆ ในเซลล์ ROS สูงระดับการดูดสารพิษ และลดความเสียหายส่วน intracellular อย่างไรก็ตาม ภายใต้กิจกรรมสรีรวิทยาอย่างละเอียด ATP ปริมาณการใช้จะเพิ่ม:"ตามปริมาณการใช้ออกซิเจนเพิ่มขึ้นด้วย และ ผล การผลิต ROS จะเพิ่มขึ้น [5] เพื่อสุขภาพ และ/หรือผ่านการฝึกอบรมบุคคลและมังสวิรัติดูเหมือนจะ มีเพิ่มป้องกันเกิด ROS หาย [6] แนะนำว่า ปกติกาย [7] และอาหารที่อุดมไปด้วยสารต้านอนุมูลอิสระ [8] อาจมีผลป้องกันต่อ ROS ทำให้เกิดความเสียหาย เสียหายพื้นฐานเฉพาะดีเอ็นเอ หนึ่งเสียหายฐาน DNA studied บ่อยคือ 8-oxodG กลไกการซ่อมแซมที่มีประสิทธิภาพสูงจะปฏิบัติงานทั้ง ในดีเอ็นเอ (เช่น hOGG1) และกลุ่มนิวคลีโอไทด์ (hMTH1) 8-oxodG/8-oxodGTP จากเซลล์ [9,10] ก่อนหน้านี้ เราได้แสดงที่ 8-oxodG extracellular มีต้นกำเนิดมาจากกลุ่มนิวคลีโอไทด์ และอาจทำหน้าที่เป็นเครื่องหมายสำคัญของความเครียด oxidative [11] เราได้พัฒนาวิธีการ ELISA ที่กำหนดที่ต่ำมากทำให้ความเข้มข้นของ 8 oxodG อยู่ในซีรั่มเลือดมนุษย์ [11-13] ในการศึกษาปัจจุบัน เรามุ่งเน้นการตรวจสอบป้องกันผลของมะเขือเทศบริโภคน้ำไปทาง ROS เกิดจาก 20 นาทีของการออกกำลังกายทางกายภาพอย่างละเอียด นวนิยายในการศึกษาการแทรกแซงอยู่ไม่ว่า ระดับ 8-oxodG ในซีรั่มของเลือดมนุษย์เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญหลังจาก 20 นาทีเฉียบพลันทางกายภาพกิจกรรมอาจเกิดจากการเพิ่มขึ้นของระดับ ROS intracellular เพิ่มไม่ได้สังเกตเมื่อบุคคลมีการดื่มน้ำมะเขือเทศ 150 ml ต่อวันในช่วงสัปดาห์ที่ 5 แนะนำที่กรดนิวคลีอิก intracellular และ โดยเฉพาะ พูนิวคลีโอไทด์มีผลกระทบ และการป้องกันอย่างดีจากผลร้ายของ ROS การศึกษาการแทรกแซงสนับสนุนสมมติฐานที่สารต้านอนุมูลอิสระ (เช่น lycopene) มาจากน้ำมะเขือเทศอาจป้องกัน oxidative ความเครียดที่เกิดจากการออกกำลังกายทางกายภาพอย่างละเอียด วัสดุและวิธีการในการศึกษานี้ 15 สุขภาพ และฝึกฝนผู้บริจาค (ตาราง 1) ก็ขอให้ดื่มน้ำมะเขือเทศ 150 ml ต่อวันใน 2 รอบระยะเวลา 5 สัปดาห์เป็นดังนี้: น้ำ 5 สัปดาห์กับมะเขือเทศ น้ำมะเขือเทศ และ มีน้ำมะเขือเทศ 5 สัปดาห์ 5 สัปดาห์ ตัวอย่างเลือดเก็บรวบรวมก่อน และ หลังจุดเริ่มต้นของรอบระยะเวลาระหว่างการศึกษาการแทรกแซง ในวันเก็บเลือด บุคคลถูกขอให้ทำกาย 20 นาทีชีพจรสูงสุด 80% ที่ใช้จักรยาน ergometer มี การคำนวณชีพจรสูงสุดแต่ละ ต่อไปนี้โดยทั่วไปยอมรับใช้สูตร: 220 - อายุ =ชีพจรสูงสุด มีเก็บตัวอย่างเลือดก่อน และ หลังออกกำลังกาย มีวิเคราะห์ระดับซีรั่มของ 8-oxodG เป็นเครื่องหมายของความเครียด oxidative ตั๋ว การศึกษาการแทรกแซงนี้ถูกออกแบบตามคำแนะนำที่ได้รับการเผยแพร่ โดยลอฟท์และเพื่อนร่วมงาน [14] การศึกษาดำเนินการตามมาตรฐานทางจริยธรรม และได้รับอนุมัติจากคณะกรรมการจริยธรรมสวีเดนที่โรงพยาบาลมหาวิทยาลัย Karolinska (Dnr 03-621) ตาราง 1.ลักษณะหลักของผู้บริจาควิเคราะห์ 8-oxodG ในเลือด serumเพียงก่อน และหลังอบรมแต่ละหนึ่งชั่วโมง (20 นาทีขี่จักรยาน), ตัวอย่างเลือดที่เก็บในหลอดโดย anticoagulant หลังจากแข็งตัวที่สมบูรณ์ตัวอย่างเลือด ซีรั่มเลือดถูกแยก 8-OxodG ความเข้มข้นของซีรั่มเลือดถูกวัดโดยใช้ ELISA อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [11,15] ชุด ELISA ถูกให้ โดยสุขภาพ Biomarkers สวีเดน AB. สั้น ๆ 1 ml ซีรั่มเลือดที่บริสุทธิ์ใช้ C18 ระยะมั่นคงแยกคอลัมน์ (แล้วแต่กำหนด CA) ตามวิธีการเผยแพร่ก่อนหน้านี้ [16] ขั้นตอนนี้จำเป็นต้องเอาออกผลิตภัณฑ์อื่น ๆ oxodG 8 ที่สามารถ cross-react กับแอนติบอดี monoclonal ใช้ในชุด เส้นโค้งมาตรฐานสำหรับ 8 oxodG (0.05 - 10 ng/ml) ก่อตั้งขึ้นในแต่ละแผ่นที่ครอบคลุมช่วงของ 8-oxodG ในตัวอย่าง ตัวอย่างหนึ่งในการทดลองแต่ละถูกผสมกับ 1 ng 8-oxodG ก่อนฟอกซึ่งเป็นมาตรฐานภายใน ทำการตรวจสอบวิธีการ ELISA แก้ไข โดย HPLC-EC (r2: 0.87, p < 0.05) [15] เปรียบเทียบระหว่าง ELISA วิธี HPLC EC แสดงให้เห็นความสัมพันธ์เชิงเส้นที่ช่วงความเข้มข้นที่พบในมนุษย์เลือด serum [15] มีความไม่สัมพันธ์ระหว่าง ELISA และ HPLC EC เมื่อใช้ตัวอย่างที่ไม่ได้กรอง กำหนดเนื้อหา lycopene ในมะเขือเทศน้ำเนื้อหา lycopene ในมะเขือเทศน้ำที่ถูกกำหนดเป็น spectrophotometrically ตามที่อธิบายไว้ในการอ้างอิงโดยปลา et al. [17] ความเข้มข้นของ lycopene ถูกคำนวณโดยใช้ค่าสัมประสิทธิ์สูญพันธุ์สบของ lycopene ในเฮกเซน (17.2 × 104 M-1 ซม.-1) วิธีการทางสถิติT-ทดสอบของนักเรียนใช้ในการทดสอบนัยสำคัญทางสถิติที่ระดับซีรั่มของ 8-oxodG ค่า p ต่ำกว่า 0.05 ถูกถือว่าเป็นสำคัญ ผลลัพธ์ผู้เข้าร่วมได้ขอให้มีการบริโภคประจำวันของน้ำมะเขือเทศ 150 ml (ประกอบด้วย lycopene 0.1 มิลลิกรัมต่อน้ำมล) 35 วันในการแทรกแซงที่ 2 มีระยะเวลาการล้างออกระหว่างรอบ ลักษณะหลักของผู้บริจาคจะนำเสนอในตารางที่ 1 ตัวอย่างเลือดได้รวบรวมวัน 0 (ระยะ A), 35 (จุดสิ้นสุดของระยะ B), วันวัน 70 (จุดสิ้นสุดของรอบระยะเวลา C ไปกวาดออก) และ 105 (จุดสิ้นสุดของรอบระยะเวลา D) เลือดตัวอย่างที่สองที่ถ่ายในแต่ละโอกาส หนึ่งก่อนและสอง 60 นาทีหลังจากออกกำลังกาย 20 นาทีทางกายภาพ ระดับซีรั่มของผู้เข้าร่วมแต่ละถูกเปรียบเทียบกับค่าควบคุมเองเขา/เธอ ดังนั้น ผู้เข้าร่วมแต่ละบริการเป็นควบคุมเขา/เธอเอง ตารางที่ 2 แสดงความเข้มข้นของ 8 oxodG ในซีรั่มครั้งสุ่มตัวอย่างที่แตกต่างกันระหว่างการศึกษาการแทรกแซง ระดับพื้นหลัง (ก่อนออกกำลังกาย) ของ 8 oxodG ได้ไม่แตกต่างอย่างมีนัยสำคัญระหว่างมาตรการ ดังแสดงในตารางที่ 2 กิจกรรมทางกายภาพอย่างละเอียด 20 นาทีเพิ่มขึ้นระดับ 8-oxodG ในซีรั่มสูงกว่าระดับพื้น โดยเฉลี่ย 42% (จาก 0.52 ถึง 0.74 ng/ml) ในทางตรงกันข้าม ต่อสัปดาห์ที่ 5 (B) บริโภคน้ำมะเขือเทศ 150 ml (ที่สอดคล้องกับการบริโภคประจำวันของ lycopene 15 มิลลิกรัม) 8-oxodG ระดับที่ยังคงเปลี่ยนแปลงเป็นหลักหลังจากเปรียบเทียบกับก่อนออกกำลังกาย หลังจาก 5 สัปดาห์ไปกวาดออกช่วง (C), ระดับของ 8-oxodG เพิ่มขึ้นอีก (84%) หลังจากออกกำลังกายเฉลี่ยจาก 0.45 ถึง 0.83 ng/ml หลังจากช่วงที่สองของการบริโภคน้ำมะเขือเทศ (D), ระดับของ 8-oxodG หลังออกกำลังกายได้เกือบเหมือนกับก่อนออกกำลังกาย (จาก$ 0.31 ถึง 0.39 ng/ml)ผลสรุป และนำเสนอ ในตารางที่ 2 และเลข 1 และ 2 ตาราง 2 ความเข้มข้นของ 8 oxodG ก่อน และหลัง จาก 20 นาทีกิจกรรมทางกายภาพ (เฉลี่ย± SE) ในเลือด serum หลังจากรอบระยะเวลาที่มี และไม่ มีการบริโภคน้ำมะเขือเทศรูปที่ 1หมายถึง ค่าของการเปลี่ยนแปลงแต่ละ 8 oxodG เซรั่มความเข้มข้น (ค่าก่อนออกกำลังกายหักออกจากค่าหลังออกกำลังกาย) หลังจาก 20 นาทีของการออกกำลังกาย แถบสีขาวแสดงการเปลี่ยนแปลงเมื่อทำการออกกำลังกาย โดยก่อนหน้านี้มะเขือเทศน้ำแห้งเสริม แถบเส้นแสดงค่าหลังจาก 5 สัปดาห์ของแห้งเสริม lycopene สำหรับบาร์ A2 A1 และ B2 B1 n = 15 และสำหรับ n C2 C1 = 11 และง 1 D2 n = 9 รูปที่ 2แสดงหมายความว่า ค่าของแต่ละการเปลี่ยนแปลงของระดับ 8-oxodG หลังจากรอบระยะเวลาโดย (เฉลี่ยของระยะ A และ C; n = 26) และหลัง จากรอบระยะเวลาด้วยมะเขือเทศน้ำบริโภค (ค่าเฉลี่ยของค่า B และ D; n = 24) ก่อน และ หลังออกกำลังกายตามลำดับ แถบแสดงหมายถึง± SE ข้อมูลในรูปที่ 2 มีการเปลี่ยนแปลงเฉลี่ยของ 8 o

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

มะเขือเทศปริมาณน้ำเก็บกดความเข้มข้นของซีรั่ม 8 oxodG หลังจากการออกกำลังกายกว้างขวาง
เสื่อ Harms-Ringdahl, ลูกไม้ Jenssen และ SiamakHaghdoost *
บทคัดย่อ
พื้นหลังของ
ดีเอ็นเอมีความเสี่ยงอย่างต่อเนื่องเพื่อสร้าง reactive oxygen species (ROS) ธรรมชาติที่เกิดขึ้นในระหว่างการเผาผลาญออกซิเจนปกติ ROS อาจส่งผลให้การปรับเปลี่ยนชั่วคราวเช่นเดียวกับถาวรในส่วนประกอบของเซลล์ต่าง ๆ เช่นไขมันโปรตีนและดีเอ็นเอซึ่งอาจมีผลกระทบอันตราย แสดงให้เห็นว่าการเสริมอาหารสารต้านอนุมูลอิสระสามารถลดความเสียหายของดีเอ็นเอออกซิเดชันอาจให้หลักฐานสำหรับค่าของการเสริมดังกล่าวในการป้องกันโรคมะเร็งและโรคที่เกี่ยวข้องกับอายุ.
ผลการวิจัย
การศึกษาครั้งนี้ได้ดำเนินการไปยังที่อยู่ไม่ว่าจะเป็นน้ำมะเขือเทศช่วยป้องกัน ROS ที่เกิดจากการออกกำลังกายอย่างกว้างขวางในทางกายภาพ บุคคลที่ได้รับการฝึกฝน เป็นเครื่องหมายของความเครียด oxidative ระดับซีรั่มของ 8 oxodG ถูกตรวจสอบโดยใช้วิธี ELISA แก้ไข การแทรกแซงการดำเนินการที่เกี่ยวข้องกับ 15 คนสุขภาพดีได้รับการฝึกฝนที่ทำ 20 นาทีการออกกำลังกายที่ 80% ของชีพจรสูงสุดโดยใช้จักรยาน ergometer ตัวอย่างเลือดก่อนที่จะถูกนำและหนึ่งชั่วโมงหลังการออกกำลังกาย ขั้นตอนซ้ำหลังจาก 5 สัปดาห์ที่ผ่านมากับการบริโภคประจำวันของน้ำมะเขือเทศ 150 มล. และตามด้วย 5 สัปดาห์ระยะเวลาล้างออกและอีก 5 สัปดาห์ที่ผ่านมากับการบริโภคประจำวันของน้ำมะเขือเทศ ผลการศึกษาพบว่าการบริโภคประจำวันของน้ำมะเขือเทศเท่ากับ 15 มก. ไลโคปีนต่อวันเป็นเวลา 5 สัปดาห์ที่ผ่านมาลดลงอย่างมีนัยสำคัญระดับซีรั่มของ 8 oxodG หลังจากที่กว้างขวางการออกกำลังกาย. สรุปข้อมูลเหล่านี้ขอแนะนำน้ำมะเขือเทศที่มีผลต่อการต้านอนุมูลอิสระที่มีศักยภาพ และอาจลดระดับสูงของ ROS ที่เกิดจากความเครียด oxidative. คำสำคัญ: ออกซิเจนสายพันธุ์; ROS; อนุมูลอิสระ; การออกกำลังกาย; ไลโคปีน; น้ำมะเขือเทศ; ไลฟ์สไตล์; วิธี ELISA; hMTH1; 8 Oxo-DG ผลการวิจัยจะได้รับการชี้ให้เห็นว่าสารต้านอนุมูลอิสระในอาหารลดระดับความเสียหายของดีเอ็นเอออกซิเดชันที่เกิดจากออกซิเจน แต่มีข้อ จำกัด ในการศึกษาร่างกายที่สนับสนุนสมมติฐานนี้เป็นตัวเลขจากการศึกษาทางระบาดวิทยาพบว่าไม่มีผลกระทบดังกล่าวดังต่อไปนี้การเสริมอาหารที่มีแคโรทีนวิตามินซีหรือ E [1,2] ความเข้มข้นของปัสสาวะ 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine (8 oxodG, ความเสียหายที่เกิดขึ้นจากฐานออกซิเจนสายพันธุ์) ได้ถูกนำมาใช้เป็น biomarker ไม่รุกรานของความเสียหายฐานดีเอ็นเอออกซิเดชันในจำนวนของการศึกษา [3,4] ออกซิเจน (ROS) ได้รับการแนะนำในการเล่นบทบาทสำคัญในการกลายพันธุ์, การเกิดมะเร็งและกระบวนการ aging ROS สามารถทำปฏิกิริยากับชิ้นส่วนโทรศัพท์มือถือที่แตกต่างกันเช่นโปรตีนไขมันและกรดนิวคลีอิกและก่อให้เกิดการปรับเปลี่ยนสารเคมี ภายใต้สภาวะปกติเอนไซม์สารต้านอนุมูลอิสระและสารต้านอนุมูลอิสระอื่น ๆ ในเซลล์ล้างพิษระดับสูงของ ROS และลดความเสียหายให้กับส่วนประกอบภายในเซลล์ อย่างไรก็ตามภายใต้กิจกรรมทางสรีรวิทยากว้างขวางบริโภคเอทีพีจะเพิ่มขึ้นตามมาด้วยการใช้ออกซิเจนที่เพิ่มขึ้นและเป็นผลให้การผลิตของ ROS จะเพิ่มขึ้น [5] สุขภาพและ / หรือบุคคลที่ผ่านการฝึกอบรมและมังสวิรัติดูเหมือนจะมีการป้องกันที่เพิ่มขึ้นเมื่อเทียบกับความเสียหายที่เกิดขึ้น ROS [6] มันแสดงให้เห็นว่าการออกกำลังกายเป็นประจำ [7] และอาหารที่อุดมด้วยสารต้านอนุมูลอิสระ [8] อาจมีผลกระทบต่อการป้องกันความเสียหายที่เกิดขึ้น ROS โดยเฉพาะอย่างยิ่งความเสียหายฐานดีเอ็นเอ หนึ่งในการศึกษาที่พบบ่อยค่าเสียหายฐานดีเอ็นเอเป็น 8 oxodG ที่มีประสิทธิภาพสูงกลไกการซ่อมแซมมีการดำเนินงานทั้งในดีเอ็นเอ (เช่น hOGG1) และสระว่ายเบส (hMTH1) เพื่อลบ 8 oxodG / 8-oxodGTP จากเซลล์ [9,10] ก่อนหน้านี้เราได้แสดงให้เห็นว่าสาร 8 oxodG มาจากสระว่ายน้ำเบื่อหน่ายและอาจทำหน้าที่เป็นเครื่องหมายที่ไวต่อความเครียดออกซิเดชัน [11] เราได้พัฒนาวิธี ELISA ที่ช่วยให้การตัดสินใจของความเข้มข้นที่ต่ำมากของ 8 oxodG อยู่ในเลือดของมนุษย์ [11-13]. ในการศึกษาปัจจุบันเรามีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาการป้องกันผลกระทบของการบริโภคน้ำมะเขือเทศที่มีต่อ ROS ที่เกิดจาก 20 นาทีของการออกกำลังกายกว้างขวางทางกายภาพ การค้นพบนวนิยายในการศึกษาการแทรกแซงในปัจจุบันคือการที่ระดับของ 8 oxodG ในเลือดของมนุษย์ที่เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญหลังจาก 20 นาทีการออกกำลังกายเฉียบพลันอาจเกิดจากการเพิ่มขึ้นของระดับ ROS ภายในเซลล์ ไม่มีการเพิ่มขึ้นก็สังเกตเห็นเมื่อบุคคลได้รับการดื่ม 150 มล. น้ำมะเขือเทศต่อวันในช่วงระยะเวลา 5 สัปดาห์ที่ผ่านมาชี้ให้เห็นว่ากรดนิวคลีอิกในเซลล์และโดยเฉพาะอย่างยิ่งเบื่อหน่ายสระว่ายน้ำได้รับผลกระทบและมีการป้องกันอย่างดีจากผลกระทบที่เป็นอันตรายของ ROS สนับสนุนการศึกษาการแทรกแซงสมมติฐานที่ว่าสารต้านอนุมูลอิสระ (เช่นไลโคปีน) ที่ให้มาจากน้ำมะเขือเทศอาจจะป้องกันความเครียดออกซิเดชันที่เกิดจากการออกกำลังกายอย่างกว้างขวางทางกายภาพ. วัสดุและวิธีการในการศึกษานี้ 15 ผู้บริจาคมีสุขภาพดีและได้รับการฝึกฝน (ตารางที่ 1) ถูกถามในการดื่ม 150 มล. น้ำมะเขือเทศ ต่อวันใน 2 ช่วงเวลาของ 5 สัปดาห์ดังนี้: 5 สัปดาห์ที่ผ่านมากับน้ำมะเขือเทศ 5 สัปดาห์โดยไม่ต้องน้ำมะเขือเทศและ 5 สัปดาห์ด้วยน้ำมะเขือเทศ เก็บตัวอย่างเลือดก่อนและหลังการเริ่มต้นของแต่ละช่วงเวลาในระหว่างการศึกษาการแทรกแซง ในวันที่การเก็บรวบรวมเลือดบุคคลที่ถูกขอให้ทำ 20 นาทีการออกกำลังกายด้วยการเต้นของชีพจร 80% สูงสุดโดยใช้จักรยาน ergometer ในการคำนวณการเต้นของชีพจรสูงสุดแต่ละสูตรต่อไปนี้ได้รับการยอมรับโดยทั่วไปที่ใช้: 220 - อายุ = ชีพจรสูงสุด เก็บตัวอย่างเลือดก่อนและหลังการออกกำลังกาย ระดับซีรั่มของ 8 oxodG มาวิเคราะห์เป็นเครื่องหมายของความเครียดออกซิเดชัน โน้ตแทรกแซงการศึกษานี้ได้รับการออกแบบตามคำแนะนำที่ได้รับการตีพิมพ์โดยลอฟท์และเพื่อนร่วมงาน [14] การศึกษาได้ดำเนินการให้เป็นไปตามมาตรฐานทางจริยธรรมและได้รับการอนุมัติจากคณะกรรมการจริยธรรมสวีเดนที่ Karolinska โรงพยาบาลมหาวิทยาลัย (Dnr 03-621). ลักษณะตาราง 1.Main ของผู้บริจาควิเคราะห์ 8 oxodG ในเลือดก่อนและหนึ่งชั่วโมง หลังจากที่แต่ละเซสชั่นการฝึกอบรม (20 นาทีจักรยาน), ตัวอย่างเลือดถูกเก็บไว้ในหลอดโดยไม่ต้องสารกันเลือดแข็ง หลังจากที่การแข็งตัวสมบูรณ์ของตัวอย่างเลือด, เลือดที่แยกได้ 8 OxodG ความเข้มข้นของเลือดถูกวัดโดยใช้วิธี ELISA ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [11,15] ชุด ELISA ได้รับจากสุขภาพ Biomarkers สวีเดน AB สั้น ๆ , ซีรั่มเลือด 1 มิลลิลิตรบริสุทธิ์โดยใช้คอลัมน์สกัดสารในเฟสของแข็ง C18 (Varian, CA) ตามวิธีการเผยแพร่ก่อนหน้านี้ [16] ขั้นตอนนี้เป็นสิ่งที่จำเป็นที่จะเอาสินค้าอื่น ๆ กว่า 8 oxodG ซึ่งอาจข้ามทำปฏิกิริยากับแอนติบอดีที่ใช้ในชุด โค้งมาตรฐาน 8 oxodG (0.05-10 ng / ml) ก่อตั้งขึ้นสำหรับแต่ละแผ่นครอบคลุมช่วงของ 8 oxodG ในตัวอย่าง หนึ่งตัวอย่างในการทดลองแต่ละผสมกับ 1 จำนวน 8 oxodG ก่อนบริสุทธิ์ซึ่งทำหน้าที่เป็นมาตรฐานภายใน การตรวจสอบของวิธี ELISA แก้ไขได้ดำเนินการโดยวิธี HPLC-EC (r2: 0.87, p <0.05) [15] เปรียบเทียบระหว่างวิธี ELISA และวิธี HPLC-EC แสดงให้เห็นความสัมพันธ์เชิงเส้นในช่วงความเข้มข้นที่พบในเลือดของมนุษย์ [15] ไม่มีความสัมพันธ์ระหว่างวิธี ELISA และ HPLC-EC เมื่อกลุ่มตัวอย่างที่ไม่ได้กรองถูกนำมาใช้. การกำหนดเนื้อหาไลโคปีนในน้ำมะเขือเทศไลโคปีนเนื้อหาในน้ำมะเขือเทศถูกกำหนด spectrophotometrically เป็นหลักตามที่อธิบายไว้ในการอ้างอิงโดยปลาและคณะ [17] ความเข้มข้นของไลโคปีนที่คำนวณโดยใช้ค่าสัมประสิทธิ์การสูญเสียฟันกรามของไลโคปีนในเฮกเซน (17.2 × 104 M-1 ซม-1). วิธีการทางสถิติt-test ของนักเรียนที่ใช้สำหรับการทดสอบอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติสำหรับระดับซีรั่มของ 8 oxodG p-value ต่ำกว่า 0.05 ก็ถือว่าเป็นอย่างมีนัยสำคัญ. ผลผู้เข้าร่วมถูกถามจะมีการบริโภคประจำวันของ 150 มล. น้ำมะเขือเทศ (ที่มีไลโคปีน 0.1 มิลลิกรัมต่อน้ำ ml) เป็นเวลา 35 วันในการแทรกแซง 2 มีระยะเวลาล้างออกระหว่างช่วงเวลาเหล่านี้ . ลักษณะสำคัญของผู้บริจาคถูกแสดงไว้ในตารางที่ 1 การเก็บตัวอย่างเลือดวันที่ 0 (ระยะเวลา), วันที่ 35 (วันสิ้นงวด B), วันที่ 70 (วันสิ้นงวด C; ล้มละลาย) และวันที่ 105 (สิ้นงวด D ) สองตัวอย่างเลือดที่ถูกนำแต่ละครั้งหนึ่งก่อนและครั้งที่สอง 60 นาทีหลังจาก 20 นาทีการออกกำลังกาย ระดับซีรั่มของผู้เข้าร่วมแต่ละคนถูกเมื่อเทียบกับของเขา / มูลค่าการควบคุมของเธอเอง ดังนั้นผู้เข้าร่วมแต่ละคนทำหน้าที่เป็น / การควบคุมของตัวเองของเขา. ตารางที่ 2 แสดงให้เห็นถึงความเข้มข้นของ 8 oxodG ในซีรั่มในเวลาที่แตกต่างกันการสุ่มตัวอย่างในระหว่างการศึกษาการแทรกแซง ระดับพื้นหลัง (ก่อนการออกกำลังกาย) ของ 8 oxodG ไม่ได้เบี่ยงเบนอย่างมีนัยสำคัญในช่วงการแทรกแซง ดังแสดงในตารางที่ 2, 20 นาทีการออกกำลังกายกว้างขวางเพิ่มระดับของ 8 oxodG ในซีรั่มเหนือระดับพื้นหลังโดยเฉลี่ย 42% (จาก 0.52 ถึง 0.74 ng / ml) ในทางตรงกันข้ามต่อไป 5 สัปดาห์ (B) ปริมาณ 150 มล. น้ำมะเขือเทศ (ตรงกับการบริโภคประจำวันที่ 15 มก. ไลโคปีน) ระดับ 8 oxodG ยังคงไม่เปลี่ยนแปลงเป็นหลักหลังจากที่เมื่อเทียบกับก่อนการออกกำลังกาย หลังจากเว้นระยะเวลา 5 สัปดาห์ (C), ระดับของ 8 oxodG เพิ่มขึ้นอีกครั้ง (84%) หลังจากการออกกำลังกายเฉลี่ยจาก 0.45 ถึง 0.83 นาโนกรัม / มิลลิลิตร หลังจากช่วงที่สองของการบริโภคน้ำมะเขือเทศ (D) ระดับ 8 oxodG หลังการออกกำลังกายได้เกือบเหมือนก่อนการออกกำลังกาย (จาก 0.31 ถึง 0.39 ng / ml) ผลได้โดยง่ายและมีรายละเอียดแสดงในตารางที่ 2 และใน รูปที่ 1 และ 2. ตาราง 2.Concentration ของ 8 oxodG ก่อนและหลัง 20 นาทีการออกกำลังกาย (mean ± SE) ในเลือดหลังจากช่วงเวลาที่มีและไม่มีปริมาณน้ำมะเขือเทศรูปที่ 1 ค่า .Mean ของการเปลี่ยนแปลงในแต่ละ 8 oxodG ซีรั่ม ความเข้มข้น (ค่าก่อนการออกกำลังกายจะถูกหักออกจากค่าหลังจากการออกกำลังกาย) หลังจาก 20 นาทีของการออกกำลังกาย แถบสีขาวแสดงการเปลี่ยนแปลงเมื่อการออกกำลังกายที่ได้ดำเนินการโดยไม่ต้องเสริมน้ำมะเขือเทศที่ก่อนหน้านี้ บาร์ประแสดงค่าหลังจากห้าสัปดาห์ของการเสริมไลโคปีน สำหรับบาร์ A2-A1 และ B1 B2-n = 15 และ C2-C1 n = 11 ในขณะที่สำหรับ D2-D1 n = 9. รูปที่ 2 .Shows หมายถึงค่าของการเปลี่ยนแปลงของแต่ละระดับ 8 oxodG หลังจากระยะเวลาโดยไม่ต้อง (ค่าเฉลี่ยของ และระยะเวลา C; n = 26) และหลังจากนั้นช่วงเวลาที่มีปริมาณน้ำมะเขือเทศ (ค่าเฉลี่ยของ B และ D ค่า; n = 24) ก่อนและหลังการออกกำลังกายตามลำดับ บาร์แสดงวิธี± SE. ข้อมูลในรูปที่ 2 คือการเปลี่ยนแปลงเฉลี่ย 8-o