Materials and methods
Strains used in this study
Both strains used in this study, Streptomyces scabies
strain EF-35 and S. melanosporofaciens strain EF-76
were isolated from common scab lesions on potato
tubers (Faucher et al., 1992). These strains were maintained
on yeast malt extract (YME) medium (4 g L−1
yeast extract, 4 g L−1 glucose, 10 g L−1 malt extract,
15 g L−1 agar) (Pridham et al., 1956-57).
Chitosan utilization
Chitosanase detection medium was prepared according
to Brzezinski et al. (1997) with the following
modifications. The detection medium was prepared by
adding successively to a sterile base medium (1.74 g
of peptone and 3.6 g of agar in 170 ml of distilled
water) 90 mL of chitosan solution, 30 mL of solution
A, 10 mL of 0.25 M K2HPO4 and 1 mL of 5N
KOH. Chitosan solution was prepared by dissolving 1
g of chitosan (Sigma-Aldrich, St-Louis, MO) in 100
mL of 0.1 N HCl. Solution A consisted of 10 g L−1
MgSO4, 10 g L−1 NaCl, 1 g L−1 K2HPO4, 100 mg
L−1 FeSO4, 100 mg L−1 CaCl2, 66 mg L−1 MnCl2
and 7 mg L−1 ZnCl2. Strains were inoculated on the
วัสดุและวิธีการสายพันธุ์ที่ใช้ในการศึกษานี้ทั้งสองสายพันธุ์ที่ใช้ในการศึกษานี้ Streptomyces scabiesสายพันธุ์ EF 35 และ S. melanosporofaciens สายพันธุ์ EF-76ถูกแยกจากโรค scab ทั่วไปบนมันฝรั่งมุด (Faucher et al. 1992) สายพันธุ์เหล่านี้ยังคงไว้ในยีสต์มอลต์สกัด (YME) ปานกลาง (4 g L−1สารสกัดจากยีสต์ 4 กรัมกลูโคส L−1, 10 g L−1 มอลต์สกัดอาหาร 15 g L−1) (Pridham et al. 1956-57)การใช้ประโยชน์ไคโตซานChitosanase การตรวจจับสื่อจัดเตรียมตามการ Brzezinski et al. (1997) กับต่อไปนี้การปรับเปลี่ยน จัดเตรียมสื่อการตรวจสอบโดยอย่างต่อเนื่องลงกลางฐานเป็นหมัน (1.74 กรัมpeptone และ 3.6 กรัมอาหารใน 170 ml ของกลั่นน้ำ 90 มิลลิลิตรของไคโตซาน โซลูชัน 30 มล.A, 0.25 M K2HPO4 10 มล. และ 1 มิลลิลิตรของ 5Nเกาะ วิธีการแก้ไขปัญหาของไคโตซานถูกเตรียมยุบ 1ไคโตซาน (Sigma-Aldrich, St Louis, MO) 100 กรัมmL ของ 0.1 N HCl โซลูชัน A ประกอบด้วย 10 กรัม L−1MgSO4, NaCl L−1 10 กรัม 1 กรัม L−1 K2HPO4, 100 มก.MnCl2 L−1 L−1 FeSO4, 100 มก. L−1 CaCl2, 66 มิลลิกรัมและสายพันธุ์มก. 7 L−1 ZnCl2 ถูก inoculated ในการ
การแปล กรุณารอสักครู่..
วัสดุและวิธีการ
สายพันธุ์ที่ใช้ในการศึกษา
สายพันธุ์ทั้งสองใช้ในการศึกษาครั้งนี้ Streptomyces หิด
ความเครียด EF-35 และ S. melanosporofaciens ความเครียด EF-76
ถูกแยกออกจากแผลตกสะเก็ดทั่วไปเกี่ยวกับมันฝรั่ง
หัว (Faucher et al., 1992) สายพันธุ์เหล่านี้ถูกเก็บรักษาไว้
ในสารสกัดจากยีสต์ข้าวมอลต์ (YME) กลาง (4 กรัม L-1
สารสกัดจากยีสต์ 4 กรัม L-1 กลูโคส 10 กรัมสารสกัดจาก L-1 มอลต์
15 กรัม L-1 agar) (Pridham et al., 1956 -57).
การใช้ไคโตซาน
สื่อการตรวจสอบไคโตซานได้รับการจัดทำขึ้นตาม
ไป Brzezinski et al, (1997) มีดังต่อไปนี้
การปรับเปลี่ยน สื่อการตรวจสอบได้รับการจัดทำขึ้นโดย
การเพิ่มอย่างต่อเนื่องไปยังฐานฆ่าเชื้อกลาง (1.74 กรัม
ของเปปโตนและ 3.6 กรัมวุ้นใน 170 มิลลิลิตรกลั่น
น้ำ) 90 มิลลิลิตรของสารละลายไคโตซาน 30 ml ของการแก้ปัญหา
A, 10 มล 0.25 M K2HPO4 และ 1 มล 5N
KOH วิธีการแก้ปัญหาไคโตซานถูกจัดทำขึ้นโดยการละลาย 1
กรัมของไคโตซาน (Sigma-Aldrich, St-Louis, มิสซูรี) 100
มล 0.1 N HCl วิธีการแก้ปัญหาประกอบด้วย 10 กรัม L-1
MgSO4, 10 กรัม L-1 โซเดียมคลอไรด์ 1 กรัม L-1 K2HPO4 100 mg
L-1 FeSO4, 100 mg L-1 CaCl2 66 mg L-1 MnCl2
และ 7 มิลลิกรัม L- 1 ZnCl2 สายพันธุ์ที่ถูกเชื้อใน
การแปล กรุณารอสักครู่..
วัสดุและวิธีการสายพันธุ์ที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ทั้งสองสายพันธุ์ที่ใช้ในการศึกษานี้ และแสวงหา โรคหิดความเครียดและความเครียด melanosporofaciens ef-76 ef-35 Sที่แยกได้จากแผลตกสะเก็ดบนมันฝรั่งทั่วไปหัว ( faucher et al . , 1992 ) สายพันธุ์เหล่านี้ถูกเก็บรักษาไว้สารสกัดจากยีสต์มอลต์ ( yme ) ขนาดกลาง ( 4 g L − 1สารสกัดจากยีสต์ , 4 g L − 1 = 10 g L − 1 มอลล์สกัด15 g L − 1 ( วุ้น ) pridham et al . , 1956-57 )การใช้ไคโตซานกลางตรวจสอบอักษรต้นแบบที่เตรียมไว้ตามเพื่อ brzezinski et al . ( 1997 ) มีดังต่อไปนี้การปรับเปลี่ยน การตรวจสอบสื่อที่เตรียมไว้โดยการเพิ่มอย่างต่อเนื่องไปยังกลางฐานหมัน ( 1.74 กรัมของเปปโตนและ 3.6 กรัม ขนาด 170 มล. ของน้ำในน้ำ ) 90 มิลลิลิตรของสารละลายไคโตแซน 30 มิลลิลิตรของสารละลาย, 10 ml 0.25 m k2hpo4 1 มิลลิลิตรของ 5Nโค สารละลายไคโตแซนที่เตรียมโดยละลาย 1กรัมของไคโตซาน ( ซิกม่า Aldrich เซนต์หลุยส์ โม ) 100มิลลิลิตรของ 0.1 N HCl . โซลูชันประกอบด้วย 10 g L − 1MgSO4 ใ , 10 กรัม L − 1 เกลือ , 1 G L − 1 k2hpo4 100 มก.L − 1 feso4 100 mg L − 1 CaCl2 66 mg L − 1 mncl2และ 7 mg L − 1 zncl2 . สายพันธุ์ที่ปลูกใน
การแปล กรุณารอสักครู่..