50 mM KCl, 5 mM MgCl
, 0.5% CHAPS, 10 mM dithiothreitol (DTT), 1 mM PMSF, 2 μg/ml leupeptin and 2 μl/ml aprotinin, pH 7.4. The homogenates were then incubated for 15 min on ice and centrifuged at 10,000 g for 10 min at 4 ฐC. A 170 μl sample of the supernatant was then incubated with 340 μM of the caspase-3 substrate Ac-DEVD-p-nitroanilide (Sigma-Aldrich Canada Ltd., Oakville, ON, Canada) and assayed for caspase 3 activity as previously described [38].
50 มิลลิ KCl, 5 มิลลิ MgCl
50 mM KCl, 5 มม. MgCl
, CHAPS 0.5%, dithiothreitol 10 มม. (DTT), PMSF 1 มม. 2 μg ml leupeptin และ aprotinin 2 μl/ml ค่า pH 7.4 การ Homogenates ถูก incubated สำหรับ 15 นาทีบนน้ำแข็งแล้ว และ centrifuged ที่ g 10000 ใน 10 นาทีที่ 4 ฐC ตัวอย่าง μl 170 ของ supernatant จะมี incubated กับ μM 340 ของ caspase-3 พื้นผิว Ac-DEVD-p-nitroanilide (Aldrich ซิกแคนาดา จำกัด Oakville, ON แล้ว แคนาดา) และ assayed สำหรับกิจกรรม caspase 3 อธิบายไว้ก่อนหน้านี้เป็น พรม [38] .
มิลลิ 50 KCl, 5 มิลลิ MgCl
การแปล กรุณารอสักครู่..

50 มิลลิ KCl, 5 มิลลิ MgCl
0.5% CHAPS, 10 มิลลิ dithiothreitol (DTT) 1 มิลลิ PMSF 2 ไมโครกรัม / leupeptin มลและ 2 ไมโครลิตร / ml Aprotinin ค่า pH 7.4 homogenates ถูกบ่มแล้ว 15 นาทีบนน้ำแข็งและหมุนเหวี่ยงที่ 10,000 กรัมเป็นเวลา 10 นาทีที่ 4 ฐ C. ตัวอย่าง 170 ไมโครลิตรของสารละลายถูกบ่มแล้วด้วย 340 ไมโครโมลาร์ของ caspase-3 พื้นผิว Ac-Devd-P-nitroanilide (Sigma-Aldrich แคนาดา จำกัด , โอก ON, แคนาดา) และ assayed สำหรับเซ่ 3 กิจกรรมที่กำหนดไว้ก่อนหน้านี้ [ 38]
50 มิลลิ KCl, 5 มิลลิ MgCl
การแปล กรุณารอสักครู่..
