A venous blood sample (20–30 ml) wa

A venous blood sample (20–30 ml) was collected from each subject,
and the non-enzymatic, high salt procedure was used to extract DNA
from the whole blood (Lahiri & Nurnburger, 1991). The ANKK1/DRD2
markers (rs1800497[Taq1A], rs6277 [C957T], and rs12364283), and the
COMT Val158Met (rs4680) SNP were genotyped using Applied Biosystems
Inc. (AB; LifeTechnologies, Burlington, ON) TaqMan pre-designed assays.
For each reaction, 20 ng genomic DNA were amplified as per
manufacturer's directions scaled to a total volume of 10 μl in an AB
2720 thermal cycler. Post-amplification products were analyzed on the
ABI Prism 7500 Sequence Detection System using the allelic discrimination option, and genotype calls were determined manually by comparing
to six No Template Controls (Grandy, Zhang, & Civello, 1993). The DRD2
rs1799732 [ − 141delC] was genotyped in the same manner using a custom designed TaqMan assay [forward primer: 5′ CAA AAC AAG GGA
TGG CGG AAT C; reverse primer 5′ CCA CCA AAG GAG CTG TAC CT; reporter 1 sequence (VIC): 5′ TAC CCG TTC CAG GCC G; reporter 2 sequence
(FAM): 5′ CTA CCC GTT CAG GCC G].

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตัวอย่างเลือดดำ (20-30 ml) รวบรวมจากแต่ละเรื่องและขั้นตอนเกลือสูง ไม่มีเอนไซม์ในระบบถูกใช้ในการแยกดีเอ็นเอจากเลือดทั้งหมด (Lahiri & Nurnburger, 1991) ANKK1/DRD2เครื่องหมาย (rs1800497 [Taq1A], rs6277 [C957T], และ rs12364283), และCOMT Val158Met SNP (rs4680) ถูกใช้ Biosystems ใช้ genotypedอิงค์ (AB LifeTechnologies เบอร์ลิงตัน ON) assays TaqMan ออกแบบไว้ล่วงหน้าในแต่ละปฏิกิริยา 20 ng genomic DNA ถูกขยายตามปรับให้ปริมาตรรวมของ μl 10 ใน AB มีคำแนะนำของผู้ผลิต2720 ร้อน cycler ผลิตภัณฑ์ขยายหลังถูกวิเคราะห์ในการABI ปริซึม 7500 ลำดับระบบตรวจสอบโดยใช้ตัวเลือกแบ่งแยก allelic และเรียกลักษณะทางพันธุกรรมถูกกำหนดด้วยตนเอง โดยการเปรียบเทียบหกไม่มีแม่แบบตัวควบคุม (แกรนดี้ จาง & Civello, 1993) DRD2rs1799732 [− 141delC] ถูก genotyped ในลักษณะเดียวกันที่ใช้ทดสอบ TaqMan ออกแบบเอง [ส่งต่อรองพื้น: 5′ ซีเอเอโฮ AAC GGA เอเอจีTGG CGG AAT C กลับพื้น 5′ CCA CCA เอเอจีแก๊ก CTG มาตรวัด CT ลำดับโปรแกรมรายงาน 1 (วิคตอเรีย): มาตรวัด CCG ทีทีซีจำกัด CAG GCC G; 5′ โปรแกรมรายงาน 2 ลำดับ(FAM): 5′ CTA GTT ซีซีซี CAG GCC G]

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตัวอย่างเลือดดำ (20-30 มล.) ได้รับการเก็บรวบรวมจากแต่ละเรื่อง
และไม่ใช่เอนไซม์ขั้นตอนเกลือสูงถูกนำมาใช้ในการสกัดดีเอ็นเอ
จากเลือด (หิ & Nurnburger, 1991) ANKK1 / DRD2
เครื่องหมาย (rs1800497 [Taq1A] rs6277 [C957T] และ rs12364283) และ
COMT Val158Met (rs4680) SNP ถูก genotyped ใช้ไบโอซิสเต็มส์
อิงค์ (AB; LifeTechnologies เบอร์ลิงตัน, ON) TaqMan การวิเคราะห์ออกแบบไว้ล่วงหน้า.
สำหรับปฏิกิริยาแต่ละ 20 ng ดีเอ็นเอถูกขยายตาม
ทิศทางของผู้ผลิตปรับให้ปริมาณรวมของ 10 ไมโครลิตรใน AB
Cycler ความร้อน 2720 ผลิตภัณฑ์ Post-ขยายถูกนำมาวิเคราะห์ใน
ABI Prism 7500 ลำดับระบบตรวจจับการใช้ตัวเลือกการเลือกปฏิบัติ allelic และโทรหาสายพันธุ์ได้รับการพิจารณาด้วยตนเองโดยการเปรียบเทียบ
ถึงหกไม่มีการควบคุมแม่แบบ (Grandy จางและ Civello, 1993) DRD2
rs1799732 [- 141delC] ถูก genotyped ในลักษณะเดียวกันโดยใช้การทดสอบ TaqMan ออกแบบเอง [ไพรไปข้างหน้า: 5 'CAA AAC AAG GGA
TGG CGG AAT C; ไพรเมอร์กลับ 5 'CCA CCA AAG GAG CTG TAC CT; นักข่าว 1 ลำดับ (VIC): 5 'TAC CCG TTC CAG GCC G; นักข่าว 2 ลำดับ
(FAM): 5 'CTA CCC GTT CAG GCC G]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ตัวอย่างเลือดจากหลอดเลือดดำ ( 20 – 30 ml ) เก็บรวบรวมข้อมูลจากแต่ละเรื่อง
และไม่ใช่เอนไซม์ ขั้นตอนของเกลือสูง ใช้สกัดดีเอ็นเอจากเลือดรวม
( ลาหิรี& nurnburger , 1991 ) การ ankk1 / drd2
เครื่องหมาย ( rs1800497 [ taq1a ] , rs6277 [ c957t ] และ rs12364283 ) และ
comt val158met ( rs4680 ) SNP เป็น genotyped ใช้ Applied Biosystems
อิงค์ ( AB ; lifetechnologies , Burlington ,) taqman ก่อนออกแบบ ) .
สำหรับแต่ละปฏิกิริยา 20 ของ genomic DNA ที่ถูกขยายต่อ
ผู้ผลิตเส้นทางปรับให้ระดับเสียงทั้งหมด 10 μ L ใน AB
2720 Thermal cycler . โพสต์ในผลิตภัณฑ์การสื่อสารวิเคราะห์
ABI ปริซึม 7500 ลำดับระบบตรวจจับโดยใช้ตัวเลือกการโทรถูกยาฆ่าแมลง และพันธุกรรม ด้วยตนเอง โดยการเปรียบเทียบ
6 ไม่มีแม่แบบการควบคุม ( แกรนดี จาง& civello , 1993 ) การ drd2
rs1799732 [ − 141delc ] คือ genotyped ในลักษณะเดียวกันโดยใช้วิธีออกแบบเอง taqman [ forward primer 5 นั้น caa AAC AAG ก๊ะ
tgg CGG AAT C ; ย้อนกลับ primer 5 ดูแล CCA CCA AAG ( CTG TAC CT ลำดับนักข่าว 1 ( Vic ) : 5 ได้รับแทค ccg TTC และ GCC g ; นักข่าว 2 ลำดับ
( FAM ) : 5 ’ CTA CCC gtt CAG GCC g ]