ing 4.5 mg/Ml dinitrophenyl hydrazi

ing 4.5 mg/Ml dinitrophenyl hydrazine and CuSO4 (0.075 mg/mL).
The data were expressed as lmol ascorbic acid/g tissue.
2.3.9. Cerebral cortex non-protein thiols levels
Cerebral cortex non-protein thiols (NPSH) levels were determined
by the method of Ellman [37]. A 500 ll aliquot of supernatant
was mixed with 10% trichloroacetic acid (1 V/1 V). After
centrifugation, the protein pellet was discarded and free-SH groups
were determined in a clear supernatant. A 100 ll aliquot of supernatant
was added to 850 ll of 1 M potassium phosphate buffer (pH
7.4) and to 50 ll of DTNB (10 mM) 5,5-dithio-bis (2-nitrobenzoic
acid). Absorbance of colorimetric reaction was measured at
412 nm. Total NPSH content was expressed as lmol/g of tissue.
2.3.10. Determination of acetylcholinesterase activity in cerebral
cortex
Acetylcholinesterase (AChE) activity was measured immediately
in homogenates according to the method of Ellman et al.
[40], using acetylthiocholine iodide as a substrate. The reaction
mixture was composed as follows: phosphate buffer (0.1 M; pH
8) and 0.01 M DTNB. The hydrolysis rate of acetylthiocholine iodide
is measured at 412 nm through the release of the thiol compound
which, when reacted with DTNB, produced the colourforming
compound TNB. The reaction was initiated by adding
0.075 M acetylthiocholine iodide. Activities were expressed as
micromole of substrate/min/mg protein.
2.3.11. Butyrylcholinesterase (BuChE) activity in cerebral cortex
Butyrylcholinesterase activity was determined by the method
of Ellman et al. [40] with some modifications. Hydrolysis rate
was measured at acetylthiocholine concentrations of 0.8 mM in
1 mL assay solutions with 100 mM phosphate buffer, pH 7.5, and
1.0 mM DTNB. Fifty microliters of cerebral cortex supernatant
was added to the reaction mixture and preincubated for 3 min.
The hydrolysis was monitored by formation of the thiolate dianion
of DTNB at 412 nm for 2–3 min (intervals of 30 s) at 25 C. All samples
were run in duplicate.
2.4. Histological studies
Some cerebral cortex samples, intended for histological examination
by light microscopy, were immediately fixed in 10% of formalin
and processed in a series of graded ethanol solutions. They
were then embedded in paraffin, serially sectioned at 3 lm and
stained with hematoxylin–eosin. Six slides were prepared from
each cerebral cortex. All sections were evaluated for the degree
of cerebral cortex injury.
2.5. Statistical analysis
The data were analyzed using the statistical package program
Stat view 5 Software for Windows (SAS Institute, Berkley, CA). Statistical
analysis was performed using one-way Analysis of Variance
(ANOVA) followed by Fisher’s Protected Least Significant Difference
(PLSD) test as a post hoc test for comparison between groups.
All values were expressed as means ± SD. Differences were considered
significant if p < 0.05.
3. Results
3.1. Effects of DM on general health
During the experiment, rats in the control group and in the Se or
vitamin E-treated group did not show any sign of toxicity. However,
DM treated rats showed varying degrees of clinical signs
including huddling, depression, conjunctivitis, mild tremor, piloerection,
diarrhea and dyspnea. The observed signs were related
to the cholinergic crisis. No significant clinical manifestations were
observed in the Se + DM, vitamin E + DM, and in the Se + vitamin
E + DM-treated rats.
3.2. Estimation of lipid peroxidation
Our results revealed an increase of lipid peroxidation in the
cerebral cortex of the DM-treated group as evidenced by a 34% increase
of malondialdehyde levels in the cerebral cortex homogenate
extract when compared to controls (Table 2). The
supplementation of Se alleviated lipid peroxidation without reaching
normal values, while vitamin E restored totally malondialdehyde
levels to normal values. The co-administration of Se and
vitamin E significantly improved cerebral cortex malondialdehyde
levels to reach control values.
3.3. Markers of protein oxidative damage in cerebral cortex
Table 2 showed the levels of advanced oxidation protein products
(AOPP) and of protein carbonyls (PCO), markers of protein oxidative
damage in the cerebral cortex tissue of normal and
experimental animals. In DM group a significant increase of PCO
(+64%) and AOPP (+74%) levels in the cerebral cortex tissue of adult
rats was observed when compared to controls. Co-treatment of
rats with Se and/or vitamin E resulted in a marked decrease in
PCO and AOPP levels in cerebral cortex, when compared to those
of DM group.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ing hydrazine dinitrophenyl 4.5 mg/Ml และ CuSO4 (0.075 mg/mL)ข้อมูลที่แสดงเป็นเนื้อเยื่อของกรดแอสคอร์บิ ค/g lmol2.3.9. ระดับโปรตีนไม่ใช่ thiols คอร์เทกซ์ Cerebralมีกำหนดระดับโปรตีนไม่ใช่ thiols (NPSH) คอร์เทกซ์ cerebralโดยวิธีการ Ellman [37] ส่วนลงตัวจะ 500 ของ supernatantถูกผสมกับกรด trichloroacetic 10% (1 V V/1) หลังจากcentrifugation เม็ดโปรตีนถูกละทิ้ง และฟรี-กลุ่ม SHมีกำหนดใน supernatant ชัดเจน ส่วนลงตัวจะ 100 ของ supernatantถูกเพิ่ม 850 จะ 1 M โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH7.4) และ 50 จะ DTNB (10 mM) 5.5-dithio-bis (2-nitrobenzoicกรด) มีที่วัด absorbance ของปฏิกิริยาเทียบเคียง412 nm รวม NPSH เนื้อหาถูกแสดงเป็น lmol/g ของเนื้อเยื่อ2.3.10 กำหนด acetylcholinesterase กิจกรรมในสมองคอร์เทกซ์กิจกรรม acetylcholinesterase (AChE) ถูกวัดทันทีใน homogenates ตามวิธีของ Ellman et al[40], acetylthiocholine ไอโอไดด์โดยใช้กับพื้นผิว ปฏิกิริยาส่วนผสมประกอบด้วยดังนี้: ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (0.1 M; pH8) และ 0.01 M DTNB อัตราไฮโตรไลซ์ acetylthiocholine ไอโอไดด์วัดที่ 412 nm ผ่านของ thiol ผสมซึ่งเมื่อปฏิกิริยาที่เกิดขึ้นกับ DTNB, colourforming ที่ผลิตผสม TNB เริ่มปฏิกิริยา โดยเพิ่มไอโอไดด์ acetylthiocholine 0.075 M กิจกรรมที่แสดงเป็นmicromole ของพื้นผิว/นาที/มิลลิกรัมโปรตีน2.3.11. Butyrylcholinesterase (BuChE) กิจกรรมในคอร์เทกซ์ cerebralButyrylcholinesterase กิจกรรมถูกกำหนด โดยวิธีการของ Ellman et al. [40] ด้วยการปรับเปลี่ยนบางอย่าง ไฮโตรไลซ์อัตรามีที่วัดความเข้มข้น acetylthiocholine 0.8 มม.ในโซลูชั่นวิเคราะห์ 1 mL มีบัฟเฟอร์ฟอสเฟต 100 มม. pH 7.5 และ1.0 มม. DTNB Microliters 50 ของคอร์เทกซ์ของ supernatant cerebralเพิ่มส่วนผสมของปฏิกิริยา และ preincubated สำหรับ 3 นาทีไฮโตรไลซ์ถูกตรวจสอบ โดยการก่อตัวของ thiolate dianionของ DTNB ที่ 412 nm สำหรับ 2-3 นาที (ช่วงเวลา 30 s) ที่ 25 c ตัวอย่างทั้งหมดถูกเรียกใช้สำเนา2.4. สรีรวิทยาศึกษาตัวอย่างคอร์เทกซ์ cerebral วัตถุประสงค์การตรวจสรีรวิทยาโดยแสง microscopy ได้ทันทีคงใน 10% formalinและประมวลผลในชุดโซลูชั่นของเอทานอลที่มีการจัดระดับ พวกเขาแล้วถูกฝังในพาราฟิน serially จัดแบ่งเป็นส่วน ๆ 3 lm และสีกับ hematoxylin – eosin ภาพนิ่งหกถูกเตรียมจากแต่ละคอร์เทกซ์ cerebral ทุกส่วนได้ประเมินระดับของการบาดเจ็บของคอร์เทกซ์ cerebral2.5. สถิติวิเคราะห์ข้อมูลได้วิเคราะห์โดยใช้โปรแกรมแพคเกจทางสถิติStat ดู 5 ซอฟต์แวร์สำหรับ Windows (สถาบัน SAS, Berkley, CA) ทางสถิติทำการวิเคราะห์โดยใช้ผลต่างของการวิเคราะห์แบบทางเดียว(การวิเคราะห์ความแปรปรวน) ตาม ด้วยของ Fisher ได้รับการป้องกันอย่างน้อยรทดสอบ (PLSD) เป็นการทดสอบ post hoc สำหรับการเปรียบเทียบระหว่างกลุ่มค่าทั้งหมดถูกแสดงหมายถึง ± SD. ความแตกต่างได้ถือถ้าสำคัญ p < 0.053. ผลลัพธ์3.1. Effects of DM on general healthDuring the experiment, rats in the control group and in the Se orvitamin E-treated group did not show any sign of toxicity. However,DM treated rats showed varying degrees of clinical signsincluding huddling, depression, conjunctivitis, mild tremor, piloerection,diarrhea and dyspnea. The observed signs were relatedto the cholinergic crisis. No significant clinical manifestations wereobserved in the Se + DM, vitamin E + DM, and in the Se + vitaminE + DM-treated rats.3.2. Estimation of lipid peroxidationOur results revealed an increase of lipid peroxidation in thecerebral cortex of the DM-treated group as evidenced by a 34% increaseof malondialdehyde levels in the cerebral cortex homogenateextract when compared to controls (Table 2). Thesupplementation of Se alleviated lipid peroxidation without reachingnormal values, while vitamin E restored totally malondialdehydelevels to normal values. The co-administration of Se andvitamin E significantly improved cerebral cortex malondialdehydelevels to reach control values.3.3. Markers of protein oxidative damage in cerebral cortexTable 2 showed the levels of advanced oxidation protein products(AOPP) and of protein carbonyls (PCO), markers of protein oxidativedamage in the cerebral cortex tissue of normal andexperimental animals. In DM group a significant increase of PCO(+64%) and AOPP (+74%) levels in the cerebral cortex tissue of adultrats was observed when compared to controls. Co-treatment ofrats with Se and/or vitamin E resulted in a marked decrease inPCO and AOPP levels in cerebral cortex, when compared to thoseof DM group.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ไอเอ็นจี 4.5 mg / ml ไฮดราซีน dinitrophenyl และ CuSO 4 (0.075 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร).
ข้อมูลแสดงว่าวิตามินซี lmol / g เนื้อเยื่อ.
2.3.9 เยื่อหุ้มสมองสมองระดับที่ไม่ใช่โปรตีน thiols
สมองเยื่อหุ้มสมอง thiols ที่ไม่ใช่โปรตีน (NPSH)
ระดับได้รับการพิจารณาโดยวิธีEllman เมื่อ [37] aliquot LL 500
ใสผสมกับ10% กรดไตรคลอโร (1 V / 1 V) หลังจากการหมุนเหวี่ยงที่เม็ดโปรตีนทิ้งและกลุ่มSH-ฟรีได้รับการพิจารณาในสารละลายที่ชัดเจน หาร 100 LL ของสารละลายถูกบันทึกอยู่ใน850 LL 1 M โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.4) และ 50 ของ LL DTNB (10 มิลลิเมตร) 5,5-dithio ทวิ (2 nitrobenzoic กรด) การดูดกลืนแสงของการเกิดปฏิกิริยาสีวัดที่412 นาโนเมตร เนื้อหาทั้งหมด NPSH ถูกแสดงเป็น lmol / g ของเนื้อเยื่อ. 2.3.10 การกำหนดกิจกรรมสารในสมองเยื่อหุ้มสมองปรุง(เจ็บ) กิจกรรมวัดทันทีในhomogenates ตามวิธีการของ Ellman และอัล. [40] โดยใช้ไอโอไดด์ acetylthiocholine เป็นสารตั้งต้น ปฏิกิริยาส่วนผสมประกอบด้วยดังนี้ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (0.1 M; pH 8) และ 0.01 M DTNB อัตราการย่อยสลายของไอโอไดด์ acetylthiocholine เป็นวัดที่ 412 นาโนเมตรผ่านการเปิดตัวของสารประกอบ thiol ซึ่งเมื่อทำปฏิกิริยากับ DTNB หยิบ colourforming สารประกอบ TNB ปฏิกิริยาที่ได้ริเริ่มขึ้นโดยการเพิ่ม0.075 M acetylthiocholine ไอโอไดด์ กิจกรรมที่ได้รับแสดงเป็นไมโครโมลของพื้นผิว / นาที / มก. โปรตีน. 2.3.11 Butyrylcholinesterase (Buche) กิจกรรมในเยื่อหุ้มสมองสมองกิจกรรมButyrylcholinesterase ถูกกำหนดโดยวิธีการของEllman et al, [40] มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง อัตราการย่อยสลายวัดที่ระดับความเข้มข้น acetylthiocholine 0.8 มิลลิใน 1 มิลลิลิตรโซลูชั่นการทดสอบด้วย 100 มิลลิฟอสเฟตบัฟเฟอร์ค่า pH 7.5 และ1.0 มิลลิ DTNB ห้าสิบ microliters ของเปลือกสมองใสได้ถูกเพิ่มเข้าไปผสมปฏิกิริยาและpreincubated เป็นเวลา 3 นาที. การย่อยสลายที่ได้รับการตรวจสอบโดยการก่อตัวของ dianion thiolate ของ DTNB ที่ 412 นาโนเมตรสำหรับ 2-3 นาที (ช่วงเวลา 30 วินาที) อยู่ที่ 25 องศาเซลเซียสตัวอย่างทั้งหมดได้รับการทำงานในที่ซ้ำกัน. 2.4 การศึกษาเนื้อเยื่อบางตัวอย่างเปลือกสมองมีไว้สำหรับการตรวจเนื้อเยื่อโดยใช้กล้องจุลทรรศน์แสงได้รับการแก้ไขทันทีใน10% ของฟอร์มาลินและประมวลผลในชุดของการแก้ปัญหาเอทานอลอย่างช้าๆ พวกเขาถูกฝังแล้วในพาราฟินแบ่งเป็นลำดับที่ 3 ไมครอนและย้อมด้วยสีhematoxylin-Eosin หกสไลด์ที่เตรียมจากแต่ละเปลือกสมอง ทุกส่วนได้รับการประเมินสำหรับระดับของการบาดเจ็บเยื่อหุ้มสมองสมอง. 2.5 การวิเคราะห์ทางสถิติวิเคราะห์ข้อมูลโดยใช้โปรแกรมสำเร็จรูปทางสถิติสถิติมุมมอง5 ซอฟต์แวร์สำหรับ Windows (SAS Institute, เบิร์กลีย์, แคลิฟอร์เนีย) สถิติการวิเคราะห์ถูกดำเนินการโดยใช้การวิเคราะห์ทางเดียวความแปรปรวน(ANOVA) ตามด้วยฟิชเชอร์น้อยที่มีการป้องกันความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญ(PLSD) การทดสอบเป็นแบบทดสอบที่โพสต์เฉพาะกิจสำหรับการเปรียบเทียบระหว่างกลุ่ม. ค่าทั้งหมดถูกแสดงเป็นหมายถึง± SD ได้รับการพิจารณาความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญถ้า p <0.05. 3 ผล3.1 ผลของการ DM ในสุขภาพโดยทั่วไปในช่วงการทดลองหนูในกลุ่มควบคุมและในSe หรือวิตามินอีกลุ่มที่ได้รับไม่ได้แสดงสัญญาณของความเป็นพิษใดๆ แต่DM รับการรักษาหนูแสดงให้เห็นองศาที่แตกต่างของอาการทางคลินิกรวมทั้งเบียด, ซึมเศร้า, โรคตาแดงสั่นอ่อน piloerection, อาการท้องเสียและอาการหายใจลำบาก อาการที่สังเกตที่เกี่ยวข้องกับวิกฤต cholinergic ไม่มีอาการทางคลินิกอย่างมีนัยสำคัญพบใน Se + DM, วิตามินอี + DM และใน Se + วิตามิน E + หนู DM-รับการรักษา. 3.2 การประเมินการเกิด lipid peroxidation ผลของเราแสดงให้เห็นการเพิ่มขึ้นของการเกิด lipid peroxidation ในที่เยื่อหุ้มสมองสมองของกลุ่มDM-ถือว่าเป็นหลักฐานโดยเพิ่มขึ้น 34% ของระดับ Malondialdehyde ใน homogenate เปลือกสมองสารสกัดเมื่อเทียบกับการควบคุม(ตารางที่ 2) เสริม Se บรรเทาการเกิด lipid peroxidation โดยไม่ต้องถึงค่าปกติในขณะที่วิตามินอีบูรณะทั้งหมดMalondialdehyde ระดับค่าปกติ ร่วมบริหารงานของ Se และวิตามินอีที่ดีขึ้นอย่างมีนัยสำคัญMalondialdehyde เปลือกสมองระดับไปถึงการควบคุมค่า. 3.3 เครื่องหมายของโปรตีนความเสียหายออกซิเดชันในเยื่อหุ้มสมองสมองตารางที่ 2 แสดงให้เห็นว่าระดับของผลิตภัณฑ์โปรตีนออกซิเดชั่ขั้นสูง (AOPP) และสำเนาโปรตีน (PCO) เครื่องหมายของโปรตีนออกซิเดชันความเสียหายในเนื้อเยื่อสมองปกติและสัตว์ทดลอง ในกลุ่ม DM เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญของเจ้าพนักงาน(+ 64%) และ AOPP (+ 74%) ระดับในเนื้อเยื่อสมองของผู้ใหญ่หนูพบว่าเมื่อเทียบกับการควบคุม ร่วมรักษาหนูกับ Se และ / หรือวิตามินอีมีผลในการลดลงของการทำเครื่องหมายในเจ้าพนักงานและระดับAOPP ในเปลือกสมองเมื่อเทียบกับของกลุ่มDM

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ไอเอ็นจี 4.5 mg / ml และไฮดราซีนไดไนโตรฟิล CuSO4 ( 0.075 mg / ml ) .
ข้อมูลแสดงเป็น lmol กรดแอสคอร์บิครัมเนื้อเยื่อ .
2.3.9 . ซีรีบรัล คอร์เท็กซ์ปลอดโปรตีน thiols ระดับ
ซีรีบรัลคอร์เท็กซ์ปลอดโปรตีน thiols ( npsh ) ระดับวิเคราะห์
โดยวิธีการของ เอลเมิ่น [ 37 ] 500 จะส่วนลงตัวของน่าน
ผสม 10% กรดไตรคลอโรอะซิติก ( 1 V / V ) หลังจากปั่น
,โปรตีนเม็ดถูกทิ้งและบริการกลุ่ม SH
ถูกกำหนดในนำที่ชัดเจน 100 จะส่วนลงตัวของน่าน
เพิ่มเป็น 850 จะ 1 M โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH
7.4 ) และ 50 จะ dtnb ( 10 มม. ) 5,5-dithio-bis ( 2-nitrobenzoic
กรด ) การดูดกลืนแสงของปฏิกิริยา 7.4 วัดที่
412 นาโนเมตร เนื้อหา npsh ทั้งหมดถูกแสดงเป็น lmol / กรัมเนื้อเยื่อ .
2.3.10 .การกำหนดกิจกรรมในซีรีบรัลคอร์เทกซ์ลาสิกขา

ลาสิกขา ( ปวด ) กิจกรรมในวัดทันที
homogenates ตามวิธีการของเอลเมิ่น et al .
[ 40 ] , การใช้ acetylthiocholine ไอโอไดด์เป็นสับสเตรท ปฏิกิริยา
ส่วนผสมประกอบด้วยดังนี้ ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( 0.1 M ; M
8 ) และ 0.01 M dtnb . อัตราการย่อยสลายของ acetylthiocholine
ไอโอไดด์