CGTase was produced by inoculating

CGTase was produced by inoculating Bacillus sp. C26 in 1 L of Horikoshi II medium and incubating at 37 °C and 200 rpm for 48 h. Cells and insoluble materials were removed by centrifugation at 4000 × g and 4 °C for 15 min. The cell-free supernatant was added with ammonium sulfate (80% saturation) and left at 4 °C overnight to precipitate the enzyme. The precipitated enzyme was dissolved in 50 mM phosphate buffer, pH 7.0 and further purified using dialysis bag with molecular weight cut-off 8000 Dalton. The activity of the partially purified enzyme was determined by phenolphthalein colorimetric method [18]. The protein concentration of the enzyme was determined by Folin Ciocaltue method [19]. This partially purified CGTase was used in the further step. The total activity and specific activity of crude enzyme were 1064 U and 15.59 U/mg, respectively. After partial purification, a 27.9-fold purification was achieved. The specific activity was increased up to 434.2 U/mg.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ผลิต โดย inoculating Bacillus sp. C26 ใน 1 L ของกลาง Horikoshi II และ incubating ที่ 37 ° C และ 200 rpm สำหรับเซลล์ 48 h. CGTase และวัสดุที่ไม่ละลายน้ำถูกเอาออก โดยการหมุนเหวี่ยงที่ 4000 × g และ 4 ° C 15 นาที Supernatant เซลล์ฟรีเพิ่มแอมโมเนียซัลเฟต (ความเข้ม 80%) และเหลือที่ 4 ° C ค้างคืนเพื่อให้ตกตะกอนเอนไซม์นี้ เอนไซม์ precipitated ละลายในบัฟเฟอร์ฟอสเฟต 50 มม. pH 7.0 และเพิ่มบริสุทธิ์ใช้ถุงไต มีน้ำหนักโมเลกุลวิ่ง 8000 ดาลตัน มีกำหนดกิจกรรมของเอนไซม์บริสุทธิ์บางส่วน โดยวิธีเทียบเคียง phenolphthalein [18] ความเข้มข้นของโปรตีนของเอนไซม์ถูกกำหนด โดยวิธีการท่อง Ciocaltue [19] CGTase นี้บริสุทธิ์บางส่วนถูกใช้ในขั้นตอนต่อไป รวมกิจกรรมและกิจกรรมเฉพาะของเอนไซม์ดิบได้คุณ 1064 และ U 15.59/มิลลิกรัม ตามลำดับ หลังจากทำให้บริสุทธิ์บางส่วน การทำให้บริสุทธิ์ 27.9-fold สำเร็จ กิจกรรมเพิ่มขึ้นถึง 434.2 U/mg

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

CGTase ถูกผลิตโดยการฉีดวัคซีนเชื้อ Bacillus SP C26 ใน 1 ลิตรของกลาง Horikoshi ครั้งที่สองและการบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสและ 200 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 48 ชั่วโมง เซลล์และวัสดุที่ไม่ละลายน้ำถูกถอดออกโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 4000 × G และ 4 องศาเซลเซียสนาน 15 นาที ใสปราศจากเซลล์ที่ถูกเพิ่มเข้ามาด้วยแอมโมเนียมซัลเฟต (80% อิ่มตัว) และทิ้งไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสในชั่วข้ามคืนที่จะเกิดการตกตะกอนเอนไซม์ เอนไซม์ตกตะกอนถูกละลายในขนาด 50 มมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ค่า pH 7.0 และบริสุทธิ์เพิ่มเติมได้โดยใช้ถุงฟอกไตมีน้ำหนักโมเลกุลตัด 8000 ดาลตัน กิจกรรมของเอนไซม์บางส่วนถูกกำหนดโดยวิธีการสี phenolphthalein [18] ความเข้มข้นของโปรตีนเอนไซม์ถูกกำหนดโดยวิธี Folin Ciocaltue [19] นี้ CGTase บริสุทธิ์บางส่วนถูกนำมาใช้ในขั้นตอนต่อไป กิจกรรมรวมและกิจกรรมที่เฉพาะเจาะจงของเอนไซม์เป็น 1,064 U และ 15.59 U / mg ตามลำดับ หลังจากการทำให้บริสุทธิ์บางส่วนบริสุทธิ์ 27.9 เท่าก็ประสบความสำเร็จ กิจกรรมที่เฉพาะเจาะจงได้รับการเพิ่มขึ้นถึง 434.2 U / mg

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เอนไซม์ที่ผลิตโดยการฉีดวัคซีนใน Bacillus sp . c26 1 ลิตรเรสในปริมาณปานกลาง และการแช่ 2 ที่ 37 ° C และ 200 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 48 ชั่วโมง เซลล์และวัสดุที่ไม่ละลายออก โดยการปั่นเหวี่ยงที่ 4000 × g และ 4 ° C เป็นเวลา 15 นาที นำเพิ่มการสังเคราะห์ด้วยแอมโมเนียม ซัลเฟต ( 80% ของที่ 4 องศา ) และซ้าย C ค้างคืนตกตะกอนเอนไซม์ การตกตะกอนเอนไซม์ละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.0 และ 50 มิลลิเมตร เพิ่มเติมบริสุทธิ์ใช้ถุงไตกับตัดโมเลกุล 8 , 000 ดาลตัน กิจกรรมของเอนไซม์ฟีนอล์ฟทาลีน บางส่วนถูกตัดสินใจโดยวิธี Colorimetric [ 18 ] ระดับโปรตีนของเอนไซม์ที่ถูกกำหนดโดยวิธี folin ciocaltue [ 19 ] เอนไซม์นี้บริสุทธิ์บางส่วนถูกใช้ในขั้นตอนต่อไป กิจกรรมทั้งหมดและกิจกรรมจำเพาะของเอนไซม์ คือ 1064 u และระยะ U / mg ตามลำดับ หลังจากการทำให้บริสุทธิ์บางส่วน , 27.9-fold ฟอกได้บรรลุแล้ว กิจกรรมที่เฉพาะเจาะจงเพิ่มขึ้นถึง 434.2 U / mg