RNA isolation and cDNA synthesis. T

RNA isolation and cDNA synthesis. Total RNA was isolated from 3D7 parasite-infected erythrocytes rich in schizonts by using the RNeasy minikit (Qiagen, Hilden, Germany) and stored at −80°C. Following DNase treatment, cDNA was generated with random hexamers by using an Omniscript reverse transcription kit (Qiagen).
Production of recombinant PF08_0008 proteins and antisera. The nucleotide sequence of the PF08_0008 gene was obtained from the P. falciparum 3D7 genome database (http://plasmodb.org). Full-length and different truncated versions of PF08_0008 proteins were synthesized and used for raising antibodies (see Fig. 1). Briefly, the PF08_0008 fragments encoding constructs designated FL (full-length GAMA,

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

อาร์เอ็นเอ cDNA และแยกสังเคราะห์ อาร์เอ็นเอทั้งหมดถูกแยกต่างหากจาก 3 D 7 ติดเชื้อปรสิต erythrocytes อุดม schizonts โดย minikit RNeasy (Qiagen, Hilden เยอรมนี) และจัดเก็บไว้ที่ −80 องศาเซลเซียส ต่อการรักษา DNase, cDNA สร้างขึ้น ด้วย hexamers แบบสุ่ม โดยใช้ชุดการ transcription กลับ Omniscript (Qiagen) .
ผลิต recombinant โปรตีน PF08_0008 และ antisera ลำดับนิวคลีโอไทด์ของยีน PF08_0008 ได้รับจากฐานข้อมูลจีโนม P. falciparum 3D 7 (http://plasmodb.org) รุ่นตัดปราศจาก และแตกต่างของโปรตีน PF08_0008 ถูกสังเคราะห์ และใช้สำหรับการเพิ่มแอนตี้ (ดู Fig. 1) สั้น ๆ PF08_0008 การกระจายตัวของโครงสร้างเข้ารหัสกำหนด FL (ปราศจากกามา

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

อาร์เอ็นเอและการแยกยีนสังเคราะห์ อาร์เอ็นเอทั้งหมดถูกแยกออกจาก 3D7 เม็ดเลือดแดงที่ติดเชื้อปรสิตที่อุดมไปด้วย schizonts โดยใช้ minikit RNeasy (Qiagen, ฮิลเดน, เยอรมนี) และเก็บไว้ที่ -80 องศาเซลเซียส ต่อไปนี้การรักษา DNase, cDNA ที่ถูกสร้างขึ้นด้วย hexamers สุ่มโดยใช้ชุดการถอดความ Omniscript ย้อนกลับ (Qiagen)
การผลิตของโปรตีนรีคอมบิแน PF08_0008 และฉีด ลำดับเบสของยีน PF08_0008 ที่ได้รับจากฐานข้อมูลจีโนม P. falciparum 3D7 (http://plasmodb.org) เต็มความยาวและรุ่นที่ถูกตัดทอนที่แตกต่างกันของโปรตีน PF08_0008 ถูกสังเคราะห์และใช้สำหรับการสร้างแอนติบอดี้ (ดูรูปที่ 1). สั้น ๆ , เศษ PF08_0008 เข้ารหัสสร้างกำหนดฟลอริดา (เต็มความยาว GAMA,

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การแยกยีนและสังเคราะห์ cDNA . อาร์เอ็นเอทั้งหมดได้จากปรสิตในเม็ดเลือดแดงที่ติดเชื้อ 3d7 รวย schizonts โดยใช้ rneasy minikit ( QIAGEN ฮิลเดน , เยอรมนี ) เก็บที่อุณหภูมิ 80 องศา บริษัท เวสเทิร์น ตรวจหา ADNase ต่อไปนี้การรักษาด้วยยีนถูกสร้างขึ้น hexamers สุ่มโดยใช้ omniscript กลับถอดชุด ( เพิ่ม ) .
การผลิตโปรตีนรีคอมบิแนนท์ และ pf08_0008 แอนติ .จากลำดับนิวคลีโอไทด์ของยีน pf08_0008 ได้จากหน้าปารั 3d7 ฐานข้อมูลจีโนม ( http : / / plasmodb . org ) เต็มความยาวแตกต่างกันและตัดรุ่น pf08_0008 โปรตีนสังเคราะห์และใช้สำหรับการเพิ่มภูมิคุ้มกัน ( ดูรูปที่ 1 ) สั้น ๆ , pf08_0008 ชิ้นส่วนการเข้ารหัสสร้างเขต FL ( กามาแบบเต็มตัว ,