3. Methods of polyploidy detection

3. Methods of polyploidy detection and suitable tissue types
3.1. Chromosomal spreads vs. flow cytometry
Shrimp polyploidy studies have historically used chromosomal spreads and nuclear stains to allow measurement of nuclear size and determine ploidy levels (e.g. Xiang et al., 1991). These procedures are, however, time consuming and do not always yield clear results, requiring properly fixed and well prepared samples. In the last 10 years the use of flow cytometry to determine the ploidy level of shrimp has become the most frequently used method reported in the literature (e.g. Zhou et al., 1999, Li et al., 2003b,c; Sellars et al., 2004a, b, 2008a). Flow cytometers perform ploidy analysis by passing thousands of cells per second through a laser beam and capturing the light that emerges from each cell as it passes through. The data gathered can be analysed statistically by flow cytometry software such as ModFit LT
software (Verity Software House, Topsham, Maine, USA) or WinMDI (www.cyto.purdue.edu/flowcyt/software/Winmdi.htm)toreport cellular characteristics such as ploidy level (www.invitrogen.com/ site/us/en/home/support/Tutorials.html).Thisprocedureisex- tremely accurate, fast, adaptable to high-throughput platforms (eg. 96 or 384 well plate format), and can be completed on fresh, fixed or frozen tissue. A range of whole shrimp preparations and tissue types can be used from embryos through to adult muscle tissue and haemocytes. Fig. 2 summarises the sequence of events for polyploidy analysis of shrimp cells using a flow cytometer and propidium iodide stain.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3. วิธีการตรวจหา polyploidy และชนิดของเนื้อเยื่อที่เหมาะสม3.1. แพร่กระจายของโครโมโซมเทียบกับเซลล์ flowกุ้ง polyploidy ศึกษาอดีตใช้แพร่กระจายของโครโมโซมและคราบนิวเคลียร์เพื่อให้สามารถวัดขนาดของนิวเคลียร์ และกำหนดระดับพล็อยดี (เช่นเซียง et al., 1991) ขั้นตอนเหล่านี้ คือ อย่างไรก็ตาม ใช้เวลานาน และไม่เสมอผลลัพธ์ชัดเจน fixed อย่างถูกต้อง และเตรียมตัวอย่าง ในช่วง 10 ปีเป็นการใช้เซลล์ flow เพื่อกำหนดระดับพล็อยดีกุ้งบ่อยที่สุดใช้วิธีรายงานในวรรณคดี (เช่นโจว et al., 1999, Li et al., 2003b, c Sellars et al., 2004a บี 2008a) กระแส cytometers ทำการวิเคราะห์พล็อยดีช่วยพันเซลล์ต่อวินาทีผ่านแสงเลเซอร์ และไฟที่ขึ้นจากแต่ละเซลล์ผ่านการจับ สามารถ analysed รวบรวมข้อมูลทางสถิติ โดย flow เซลล์ซอฟต์แวร์เช่น ModFit LTซอฟต์แวร์ (Verity ซอฟต์แวร์เฮาส์ Topsham เมน สหรัฐอเมริกา) หรือ WinMDI (www.cyto.purdue.edu/ flowcyt/software/Winmdi.htm)toreport โทรศัพท์มือถือลักษณะเช่นพล็อยดีระดับ (www.invitrogen.com/ site/us/en/home/support/Tutorials.html)Thisprocedureisex-tremely ถูกต้อง รวดเร็ว สามารถปรับเปลี่ยนระบบอัตราความเร็วสูง (เช่น 96 หรือ 384 ดีแผ่นรูปแบบ), และสามารถจะแล้วเสร็จในสด fixed หรือเนื้อเยื่อแช่แข็ง สามารถใช้จากโคลนผ่านเตรียมทั้งกุ้งและชนิดของเนื้อเยื่อกล้ามเนื้อสำหรับผู้ใหญ่และ haemocytes Fig. 2 summarises ลำดับของเหตุการณ์สำหรับการวิเคราะห์โดยใช้การ flow cytometer และ propidium ไอโอไดด์คราบเซลล์กุ้ง polyploidy

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3. วิธีการของการตรวจสอบโพลีพลอยและชนิดของเนื้อเยื่อที่เหมาะสม
3.1 โครโมโซมกระจายเทียบชั้นโอ๊ย cytometry
ศึกษากุ้งโพลีพลอยได้ใช้ในอดีตกระจายของโครโมโซมและคราบนิวเคลียร์เพื่อให้การวัดขนาดนิวเคลียร์และกำหนดระดับ ploidy (เช่น Xiang et al., 1991) วิธีการเหล่านี้จะถูก แต่ใช้เวลานานและไม่เคยให้ผลลัพธ์ที่ชัดเจนต้องถูกไฟตัวอย่างคงที่และเตรียมความพร้อมที่ดี ในช่วง 10 ปีที่ผ่านมาการใช้ชั้นโอ๊ยภูมิคุ้มกันเพื่อตรวจสอบระดับ ploidy ของกุ้งได้กลายเป็นที่ใช้บ่อยที่สุดวิธีการรายงานในวรรณคดี (เช่นโจว, et al, 1999, Li และคณะ, 2003b ค.. Sellars และคณะ , 2004a, B, 2008a) cytometers ไหลทำการวิเคราะห์ ploidy โดยผ่านพันของเซลล์ต่อวินาทีผ่านลำแสงเลเซอร์และจับแสงที่โผล่ออกมาจากแต่ละเซลล์ขณะที่มันผ่าน ข้อมูลที่รวบรวมได้สามารถวิเคราะห์ทางสถิติโดยชั้นโอ๊ยซอฟต์แวร์ภูมิคุ้มกันเช่น LT Modfit
ซอฟแวร์ (Software House ความแม่นยำ, Topsham เมนสหรัฐอเมริกา) หรือ WinMDI (www.cyto.purdue.edu/ ชั้น owcyt / ซอฟแวร์ / Winmdi.htm) toreport ลักษณะเช่นโทรศัพท์มือถือ เป็นระดับ ploidy (www.invitrogen.com/ เว็บไซต์ / เรา / en / home / สนับสนุน / Tutorials.html) .Thisprocedureisex- tremely ถูกต้องรวดเร็วและปรับให้เข้ากับแพลตฟอร์มการส่งผ่านสูง (เช่น. 96 หรือ 384 รูปแบบแผ่นเดียว) และ สามารถจะแล้วเสร็จในสดเนื้อเยื่อคงที่หรือแช่แข็ง Fi ช่วงของการเตรียมการทั้งกุ้งและเนื้อเยื่อชนิดสามารถนำมาใช้จากตัวอ่อนผ่านไปยังเนื้อเยื่อของกล้ามเนื้อผู้ใหญ่และเม็ดเลือด มะเดื่อ 2 สรุปลำดับของเหตุการณ์ที่เกิดขึ้นในการวิเคราะห์โพลีพลอยของเซลล์กุ้งโดยใช้ชั้นโอ๊ย cytometer และคราบไอโอไดด์ propidium

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3 . วิธีการตรวจจับการประเภท
3.1 เนื้อเยื่อที่เหมาะสม โครโมโซมกระจายกับflโอ๊ย (
กุ้งการศึกษาในอดีตที่ใช้กระจายของคราบนิวเคลียร์ให้การวัดขนาดของนิวเคลียร์และการกำหนดระดับ ( เช่นเซียง et al . , 1991 ) ขั้นตอนเหล่านี้ได้ อย่างไรก็ตาม เวลานาน และไม่เสมอให้ผลลัพธ์ที่ชัดเจนและต้องถูกต้องจึง xed พร้อมตัวอย่าง ในช่วง 10 ปีที่ผ่านมาการใช้flโอ๊ย ( เพื่อกำหนดระดับของการเลี้ยงกุ้งได้กลายเป็นวิธีการรายงานในวรรณคดีที่ใช้บ่อยที่สุด ( เช่นโจว et al . , 1999 , Li et al . , 2003b , C ; เซลลาร์ส et al . , 2004a , B , 2008a )cytometers วิเคราะห์การไหลโดยผ่านหลายพันเซลล์ต่อวินาทีผ่านลำแสงเลเซอร์และจับแสงที่โผล่ออกมาจากแต่ละเซลล์ที่ผ่านไปผ่าน ข้อมูลที่ได้สามารถนำมาวิเคราะห์โดยflโอ๊ย ( ซอฟต์แวร์เช่นซอฟต์แวร์มัน
modfit ( หลากหลายซอฟต์แวร์บ้าน topsham , เมน , สหรัฐอเมริกา ) หรือ winmdi ( www.cyto . Purdue . edu / fl owcyt / ซอฟต์แวร์ / winmdi .htm ) toreport มือถือลักษณะ เช่น ระดับการ ( www.invitrogen.com/ เว็บไซต์ / เรา / en / home / สนับสนุน / tutorials . html ) thisprocedureisex - ถูกต้อง tremely อย่างรวดเร็ว การปรับตัวเพื่อช่วยแพลตฟอร์ม ( เช่น 96 หรือบางทีก็รูปแบบจาน ) และสามารถจะแล้วเสร็จในที่สด จึง xed หรือเนื้อเยื่อแช่แข็งช่วงของการเตรียมกุ้งทั้งหมดและสามารถใช้จากเนื้อเยื่อตัวอ่อนผ่านเนื้อเยื่อของกล้ามเนื้อผู้ใหญ่และเม็ดเลือด . รูปที่ 2 summarises ลำดับเหตุการณ์เพื่อการวิเคราะห์การกุ้งเซลล์โดยใช้flโอ๊ยใช้โมโน propidium ไอโอไดด์
และคราบ