- ข้อความ
- ประวัติศาสตร์
Let me thank for being here today.I
Let me thank for being here today.I would like to introduce my self. My name is Wilawan Jaimaroeng.I’m study Industrial fermentation technology.My Adviser is Dr.Aphacha Jindaprasert.Today I’m going to give presentation on the topic of Biogenic amine formation by lactic acid bacteria isolated from dairy's product
First of all,I’d like to talk about biogenic amine.Biogenic amine are organic and nitrogenous compounds with biological activity, mainly formed by the decarboxylation of amino acids. The consumption of foods containing large amounts of these amines can have toxicological affect healt.and The most important biogenic amines in dairy foods are histamine, tyramine, cadaverine and putrescine
Futhermore, Lactic acid bacteria (LAB) play an essential role in the production of fermented dairy products, with Lactococcus lactis and Streptococcus thermophiles being the species most commonly used as primary fermentation starters .Their major function is the rapid production of lactic acid from lactose.
This slide present biosynthesis pathway of biogenic amine.Histamine decarboxylate by histidine decarboxylase.Tyramine decarboxylate by tyrosine.Cadaverine decarboxylate by lysine and arginine is decarboxylated by arginine decarboxylase(ADC) to produce agmatine. Agmatine can be converted to putrescine.and Putrescine can be formed from ornithine by ornithine decarboxylase (ODC)
In this slide they are found that biogenic amine in different dairy product from raw milk have a large amount of biogenic amine as opposed to pasteurized milk
BA in home made natural yogurt and In this research objective of the study were to investigate
biogenic amines formation by S. thermophilus isolated from home-made natural yogurt, and in lysine and histidine decarboxylase broth.
Material and method
Culture media and bacterial extraction
- They are used home made yogurt sample
- and propagation of S.thermophilus cultures used SM17 broth
- then S. thermophilus strains were incubated at 37 oC for 72 h.
- and Take these bacterial cultures (1011cfu/ml) removed and put into the LDB and HDB
- In order to identify the S. thermophilus strains showing the ability to decarboxylate, of the LDB and HDB containing.
- then centrifuged at 3000 g for 10 min and then filtered a filter paper Ø125 mm
- After that, bacterial supernatant were taken for derivatisation in order to be analysed by HPLC.
Analytical method
High Performance Liquid Chromatography (HPLC)
-they are used bacterial supernatant
-Analysis by HPLC method with Reversed phase colume(Pre-column derivatization method) by using gardient elution program.
- Total separation time was less than 20 min. and the injection volume was 10 µL
- Detection was monitored at 254 nm.
- A standard curve for ammonia and each of the twelve amines in the range of 0– - 50 mg/mL was prepared.
this picture show High Performance Liquid Chromatography (HPLC) apparatus
Polymerase Chain Reaction (PCR)
-they are used DNA Extraction of S.thermophilus
- then Make PCR thermal cycler machine conain 3 step 1. Denaturation,2. Annealing ,3. Extension
- after that Amplified PCR products were run on 1.5% electrophoresis gel and analysed under UV light.
this picture show PCR thermal cycler machine and Electrophoresis gel.
In this result of research HPLC show that the number of S. thermophilus isolates produced biogenic amines in histidine decarboxylase (HDB) and lysine decarboxylase broth (LDB).They are found that S. thermophiles isolated produce not only histamine also other amiine and biogenic amine production generally below 100 mg/L
Fig.1 show histamine production by S. thermophilus isolates in histidine decarboxylase broth. Most of the S. thermophilus isolates formed low amounts of histamine (1–50 mg/L) from histidine whilst one isolate was a prolific amine producer, with amine production above 36.33 mg/L.
Fig.2 show Histamine production by S. thermophilus isolates in lysine decarboxylase broth. histamine amounts produced by most isolates ranged from 1.29 to 45.2 mg/L.
Fig. 3. Show PCR amplification with primers designed to amplify histidine decarboxylase (hdca) gene in isolates.and designed for amplification of a 435 bp length part of hdc gene.they are found that
only 13 isolates tested positive for hdcA gene, while PCR bands were not detected for some isolates producing histamine. So histamine production was not controlled by only hdcA gene. Some other gene(s) could take part in histamine production.
BA in artisanal cheese and In this research objective of the study capacity to produce BA can be tested by either chromatographic or molecular methods
Material and method
BA Production capacity
-they used artisanal cheeses sample
-and culture supernatants of the LAB strains grown for 24 h in 10 ml M17 or MRS broth supplemented with 1 mM tyrosine ,1 mM histidine ,1 mM ornithine or 1 mM agmatine
-then centrifugation of the cultures (2000 X g for 15 min) and filtering of the supernatant through a 0.2 µm pore diameter membrane.
-After that Derivatized samples were analyzed by (U)HPLC
Polymerase Chain Reaction (PCR)
-they are used DNA Extraction of LAB
-then Performed in a MyCycler™ thermal cycler using DreamTaq polymerase
-and PCR products were separated in 0.8 % (w/v) agarose gels in 1XTAE buffer and visualized after staining with ethidium bromide using a GelDoc 2000 system
In this result of research from total 137 strains they found that 7 strain produce tyramine ,2 strain produce histamine and 17 strain produce putrecine via AGDI.All strain that positive PCR result for the presence of gene involved in production able to systhesize the corresponding BA, except for two strains of S. thermophilus.
Fig1.show Results of PCR tests for the presence of genes involved in BA production.They are found that Lactobacillus brevis and Lactobacillus curvatus presence both TDC+( tyramine-producing cluster) and AGDI+ (putrescine-producing cluster via the agmatine deiminase pathway) and Lactococcus lactis subsp. Lactis and Lactococcus lactis subsp. Cremoris presence both AGDI+, AGDI-
Table2. show classification of tyramine- and putrescine-producing strains.they are found that Lactobacillus brevis and Lactobacillus curvatus classification as strong tyramine producer strains and Variation in the efficiency of putrescine production was observed among the producing strains of L. lactis; this allowed their classification as ‘strong’ or ‘medium putrescine producer’s
In conclusion capability biogenic amines production of 58 S. thermophilus isolates in yogurt showed that most of the S. thermophilus isolates have an ability to form biogenic amines, especially histamine and tyramine, which are the most toxic amines for human health.And seconds research of lactic acid bacteria 137 strains isolated from different artisanal cheese show that Lactobacillus brevis. and Lactobacillus curvatus. can produce tyramine and putrescine (via the agmatine deiminase pathway).And in this work presence L. lactis; this allowed their classification as ‘strong’ or ‘medium putrescine producers’
So it is important to select suitable strains as starter cultures for dairy product.If not seselect
strain microorganisim can accumulate BA in high concentration and consumption food containing large
amounts of these amines can have toxicological consequences. Although there is no specific legislation
regarding the BA content in dairy products, it is generally assumed that they should not be allowed to
accumulate. thus ,In the future should have available methods for detecting the presence of BA or BA
producing microorganisms in dairy products and the factors affecting BA accumulation are analyzed in order to suggest possible means of reducing their presence, and establish safety limits for their concentration in dairy product including other foods.
First of all,I’d like to talk about biogenic amine.Biogenic amine are organic and nitrogenous compounds with biological activity, mainly formed by the decarboxylation of amino acids. The consumption of foods containing large amounts of these amines can have toxicological affect healt.and The most important biogenic amines in dairy foods are histamine, tyramine, cadaverine and putrescine
Futhermore, Lactic acid bacteria (LAB) play an essential role in the production of fermented dairy products, with Lactococcus lactis and Streptococcus thermophiles being the species most commonly used as primary fermentation starters .Their major function is the rapid production of lactic acid from lactose.
This slide present biosynthesis pathway of biogenic amine.Histamine decarboxylate by histidine decarboxylase.Tyramine decarboxylate by tyrosine.Cadaverine decarboxylate by lysine and arginine is decarboxylated by arginine decarboxylase(ADC) to produce agmatine. Agmatine can be converted to putrescine.and Putrescine can be formed from ornithine by ornithine decarboxylase (ODC)
In this slide they are found that biogenic amine in different dairy product from raw milk have a large amount of biogenic amine as opposed to pasteurized milk
BA in home made natural yogurt and In this research objective of the study were to investigate
biogenic amines formation by S. thermophilus isolated from home-made natural yogurt, and in lysine and histidine decarboxylase broth.
Material and method
Culture media and bacterial extraction
- They are used home made yogurt sample
- and propagation of S.thermophilus cultures used SM17 broth
- then S. thermophilus strains were incubated at 37 oC for 72 h.
- and Take these bacterial cultures (1011cfu/ml) removed and put into the LDB and HDB
- In order to identify the S. thermophilus strains showing the ability to decarboxylate, of the LDB and HDB containing.
- then centrifuged at 3000 g for 10 min and then filtered a filter paper Ø125 mm
- After that, bacterial supernatant were taken for derivatisation in order to be analysed by HPLC.
Analytical method
High Performance Liquid Chromatography (HPLC)
-they are used bacterial supernatant
-Analysis by HPLC method with Reversed phase colume(Pre-column derivatization method) by using gardient elution program.
- Total separation time was less than 20 min. and the injection volume was 10 µL
- Detection was monitored at 254 nm.
- A standard curve for ammonia and each of the twelve amines in the range of 0– - 50 mg/mL was prepared.
this picture show High Performance Liquid Chromatography (HPLC) apparatus
Polymerase Chain Reaction (PCR)
-they are used DNA Extraction of S.thermophilus
- then Make PCR thermal cycler machine conain 3 step 1. Denaturation,2. Annealing ,3. Extension
- after that Amplified PCR products were run on 1.5% electrophoresis gel and analysed under UV light.
this picture show PCR thermal cycler machine and Electrophoresis gel.
In this result of research HPLC show that the number of S. thermophilus isolates produced biogenic amines in histidine decarboxylase (HDB) and lysine decarboxylase broth (LDB).They are found that S. thermophiles isolated produce not only histamine also other amiine and biogenic amine production generally below 100 mg/L
Fig.1 show histamine production by S. thermophilus isolates in histidine decarboxylase broth. Most of the S. thermophilus isolates formed low amounts of histamine (1–50 mg/L) from histidine whilst one isolate was a prolific amine producer, with amine production above 36.33 mg/L.
Fig.2 show Histamine production by S. thermophilus isolates in lysine decarboxylase broth. histamine amounts produced by most isolates ranged from 1.29 to 45.2 mg/L.
Fig. 3. Show PCR amplification with primers designed to amplify histidine decarboxylase (hdca) gene in isolates.and designed for amplification of a 435 bp length part of hdc gene.they are found that
only 13 isolates tested positive for hdcA gene, while PCR bands were not detected for some isolates producing histamine. So histamine production was not controlled by only hdcA gene. Some other gene(s) could take part in histamine production.
BA in artisanal cheese and In this research objective of the study capacity to produce BA can be tested by either chromatographic or molecular methods
Material and method
BA Production capacity
-they used artisanal cheeses sample
-and culture supernatants of the LAB strains grown for 24 h in 10 ml M17 or MRS broth supplemented with 1 mM tyrosine ,1 mM histidine ,1 mM ornithine or 1 mM agmatine
-then centrifugation of the cultures (2000 X g for 15 min) and filtering of the supernatant through a 0.2 µm pore diameter membrane.
-After that Derivatized samples were analyzed by (U)HPLC
Polymerase Chain Reaction (PCR)
-they are used DNA Extraction of LAB
-then Performed in a MyCycler™ thermal cycler using DreamTaq polymerase
-and PCR products were separated in 0.8 % (w/v) agarose gels in 1XTAE buffer and visualized after staining with ethidium bromide using a GelDoc 2000 system
In this result of research from total 137 strains they found that 7 strain produce tyramine ,2 strain produce histamine and 17 strain produce putrecine via AGDI.All strain that positive PCR result for the presence of gene involved in production able to systhesize the corresponding BA, except for two strains of S. thermophilus.
Fig1.show Results of PCR tests for the presence of genes involved in BA production.They are found that Lactobacillus brevis and Lactobacillus curvatus presence both TDC+( tyramine-producing cluster) and AGDI+ (putrescine-producing cluster via the agmatine deiminase pathway) and Lactococcus lactis subsp. Lactis and Lactococcus lactis subsp. Cremoris presence both AGDI+, AGDI-
Table2. show classification of tyramine- and putrescine-producing strains.they are found that Lactobacillus brevis and Lactobacillus curvatus classification as strong tyramine producer strains and Variation in the efficiency of putrescine production was observed among the producing strains of L. lactis; this allowed their classification as ‘strong’ or ‘medium putrescine producer’s
In conclusion capability biogenic amines production of 58 S. thermophilus isolates in yogurt showed that most of the S. thermophilus isolates have an ability to form biogenic amines, especially histamine and tyramine, which are the most toxic amines for human health.And seconds research of lactic acid bacteria 137 strains isolated from different artisanal cheese show that Lactobacillus brevis. and Lactobacillus curvatus. can produce tyramine and putrescine (via the agmatine deiminase pathway).And in this work presence L. lactis; this allowed their classification as ‘strong’ or ‘medium putrescine producers’
So it is important to select suitable strains as starter cultures for dairy product.If not seselect
strain microorganisim can accumulate BA in high concentration and consumption food containing large
amounts of these amines can have toxicological consequences. Although there is no specific legislation
regarding the BA content in dairy products, it is generally assumed that they should not be allowed to
accumulate. thus ,In the future should have available methods for detecting the presence of BA or BA
producing microorganisms in dairy products and the factors affecting BA accumulation are analyzed in order to suggest possible means of reducing their presence, and establish safety limits for their concentration in dairy product including other foods.
0/5000
ผมขอขอบคุณสำหรับนี่วันนี้ อยากจะแนะนำตัวเอง ชื่อของฉันคือ Jaimaroeng.I วิลาวัลย์กำลังศึกษาเทคโนโลยีอุตสาหกรรม ที่ปรึกษาของฉันคือ Dr.Aphacha Jindaprasert.Today ที่จะให้นำเสนอในหัวข้อผู้แต่ง Biogenic amine โดยแบคทีเรียกรดแลกติกที่แยกต่างหากจากผลิตภัณฑ์ของนม ประการแรก ฉันอยากจะพูดคุยเกี่ยวกับ biogenic amine Biogenic amine คือ สารประกอบอินทรีย์ และไนโตรจีนัสกับกิจกรรมชีวภาพ ส่วนใหญ่เกิดขึ้น โดย decarboxylation ของกรดอะมิโน การบริโภคอาหารที่ประกอบด้วยจำนวนมากของ amines เหล่านี้ได้ส่งผลกระทบต่อ toxicological healt.and สำคัญสุด biogenic amines ในอาหารโคนมมีฮิสตามีน tyramine, cadaverine และ putrescine Futhermore แบคทีเรียกรดแลกติก (LAB) เล่นมีบทบาทสำคัญในการผลิตของร้านม Lactococcus lactis และอุณหภูมิ thermophiles เป็นชนิดที่ใช้บ่อยที่สุดเป็นหลักหมักอย่า การทำงานหลักเป็นการผลิตอย่างรวดเร็วของกรดจากแล็กโทส ภาพนิ่งนี้นำเสนอการสังเคราะห์ทางเดินของ biogenic amine Decarboxylate ฮิสตามีน โดย histidine decarboxylase Decarboxylate tyramine โดย tyrosine Decarboxylate cadaverine ไลซีนและอาร์จินีนเป็น decarboxylated โดยอาร์จินีน decarboxylase(ADC) ผลิต agmatine สามารถแปลง Agmatine putrescine.and Putrescine สามารถเกิดขึ้นจาก ornithine โดย ornithine decarboxylase (ODC)ในภาพนิ่งนี้จะอยู่ ที่ amine biogenic ในผลิตภัณฑ์ต่าง ๆ จากนมจากน้ำนมดิบมีจำนวนมากของ biogenic amine จำกัดนมพาสเจอร์ไรส์ BA ทำโยเกิร์ตธรรมชาติ และวัตถุประสงค์ของการศึกษาวิจัยนี้มีการ ตรวจสอบผู้แต่ง biogenic amines โดยแยกต่างหาก จากบ้านทำโยเกิร์ตธรรมชาติ และแอล-ไลซีนและ histidine ซุป decarboxylase thermophilus S.วัสดุและวิธีการ สื่อวัฒนธรรมและแยกแบคทีเรีย-มีตัวอย่างใช้ทำโยเกิร์ต- และเผยแพร่วัฒนธรรม S.thermophilus ใช้ซุป SM17- แล้วสายพันธุ์ S. thermophilus ได้ incubated ที่ 37 องศาเซลเซียสสำหรับ 72 h- และเหล่านี้แบคทีเรียวัฒนธรรม (มล 1011cfu) ถูกเอาออก และใส่ลงใน LDB และ HDB-เพื่อเป็นการระบุสายพันธุ์ thermophilus S. ที่แสดงความสามารถในการ decarboxylate, LDB และ HDB ที่ประกอบด้วย-centrifuged แล้ว ที่ 3000 g สำหรับ 10 นาที และจากนั้น กรองมม.กระดาษกรอง Ø125-หลังจากที่ supernatant แบคทีเรียถูกถ่ายสำหรับ derivatisation เพื่อให้ analysed โดย HPLC วิธีวิเคราะห์ ประสิทธิภาพสูงของเหลว Chromatography (HPLC)-จะใช้แบคทีเรีย supernatant -การวิเคราะห์ โดยวิธี HPLC กับย้อนกลับขั้นตอนเคราะห์ (วิธีการ derivatization คอลัมน์ก่อน) โดยใช้โปรแกรม gardient elution-แยกรวมเวลาไม่น้อยกว่า 20 นาที และปริมาณฉีดได้ 10 µL-ตรวจสอบได้ตรวจสอบที่ 254 nm-เส้นโค้งมาตรฐานแอมโมเนียและ amines 12 ในช่วง 0 – - แต่ละถูกเตรียม 50 mg/mL ภาพนี้แสดงเครื่องสูงประสิทธิภาพของเหลว Chromatography (HPLC) ปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส (PCR)-การใช้สกัดดีเอ็นเอของ S.thermophilus -แล้วทำ PCR cycler ร้อนเครื่อง conain 3 ขั้นตอน 1 Denaturation, 2 หลอม 3 ส่วนขยาย-หลังจากนั้น ผลิตภัณฑ์ PCR ขยายถูกบนเจ electrophoresis 1.5% และ analysed ภายใต้แสง UV ภาพนี้แสดงเครื่อง PCR cycler ร้อนและเจ Electrophoresisในนี้ผลวิจัย HPLC แสดงว่า หมายเลขของ S. thermophilus แยกผลิต biogenic amines histidine decarboxylase (HDB) และแอล-ไลซีน decarboxylase ซุป (LDB) พวกเขาพบว่า S. thermophiles แยกต่างหากผลิตฮิสตามีนไม่เพียงแต่ยังผลิตอื่น ๆ amiine และ biogenic amine โดยทั่วไปต่ำกว่า 100 mg/L ภาพแสดงการผลิตฮิสตามีน โดย S. thermophilus แยกใน histidine decarboxylase ซุป ส่วนใหญ่ thermophilus S. ที่แยกแยกจำนวนต่ำรูปแบบฮิสตามีน (1 – 50 mg/L) จาก histidine ขณะหนึ่งถูกผลิตลูก amine ผลิต amine เหนือ 36.33 มิลลิกรัม/L.Fig.2 แสดงผลิตฮิสตามีน โดย S. thermophilus แยกในไลซีน decarboxylase ซุป ยอดฮิสตามีนที่ผลิต โดยแยกส่วนใหญ่อยู่ในช่วงจาก 1.29 ไป 45.2 mg/l Fig. 3 ดูขยาย PCR ด้วยไพรเมอร์ที่ออกแบบมาเพื่อขยาย histidine decarboxylase (hdca) ยีนใน isolates.and มาขยายส่วนความยาวของ bp ที่ 435 ของ hdc gene.they จะพบว่า แยกเฉพาะ 13 ทดสอบบวกสำหรับยีน hdcA ในขณะที่ไม่พบวง PCR สำหรับบางแยกผลิตฮิสตามีน เพื่อ ผลิตฮิสตามีนไม่ถูกควบคุม โดยยีน hdcA เท่านั้น Gene(s) อื่น ๆ สามารถมีส่วนร่วมในการผลิตฮิสตามีน บาชีทุก ๆ และ ในวัตถุประสงค์การวิจัยนี้กำลังศึกษาการผลิตบาสามารถทดสอบ โดยวิธี chromatographic หรือโมเลกุล วัสดุและวิธีการ กำลังการผลิตบา-จะใช้เนยแข็งทุก ๆ อย่าง- และ supernatants วัฒนธรรมของสายพันธุ์แล็บโต 24 h ใน 10 ml ซุป M17 หรือนางเสริมกับ tyrosine มม. 1, histidine มม. 1, ornithine 1 มม. หรือ agmatine 1 มม.- แล้ว centrifugation วัฒนธรรม (2000 X g สำหรับ 15 นาที) และการกรองของ supernatant ผ่านเมมเบรนขนาดรูพรุน 0.2 µm-หลังจากที่ Derivatized ตัวอย่างได้วิเคราะห์ ด้วย HPLC (U) ปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส (PCR) -การใช้สกัดดีเอ็นเอของแล็บ -ดำเนินการแล้ว ใน cycler ร้อน MyCycler ™ใช้ DreamTaq พอลิเมอเรส- และผลิตภัณฑ์ PCR ถูกแบ่งในเจ agarose 0.8% (w/v) ในบัฟเฟอร์ 1XTAE และ visualized หลังย้อมสีโดยใช้ระบบ GelDoc 2000 โบรไมด์ ethidium ในการนี้ผลของการวิจัยจากสายพันธุ์ 137 รวม พวกเขาพบว่า ต้องใช้ 7 ผลิต tyramine ต้องใช้ 2 ผลิตฮิสตามีน และ 17 ต้องใช้ผลิต putrecine ผ่าน AGDI ทุกสายพันธุ์ที่ผล PCR เป็นบวกสำหรับสถานะของยีนที่เกี่ยวข้องในการผลิตสามารถ systhesize BA ที่สอดคล้องกัน เว้นสองสายพันธุ์ของ S. thermophilus ผล PCR Fig1.show ทดสอบสำหรับสถานะของยีนที่เกี่ยวข้องกับการผลิตบา พวกเขาจะพบว่าเทนเซอร์แลคโตบาซิลลัสและแลคโตบาซิลลัส curvatus สถานะทั้งทีดีซี + (คลัสเตอร์ผลิต tyramine) และ AGDI + (putrescine ผลิตคลัสเตอร์ผ่านทางเดิน deiminase agmatine) และ Lactococcus lactis ถั่ว Lactis และ Lactococcus lactis ถั่ว Cremoris แสดงทั้ง AGDI + AGDI - Table2 แสดงประเภทของผลิต tyramine และ putrescine strains.they พบว่าเทนเซอร์แลคโตบาซิลลัส และแลคโตบาซิลลัส curvatus จัดประเภท tyramine แข็งแรงผู้ผลิตสายพันธุ์และการเปลี่ยนแปลงในประสิทธิภาพการผลิต putrescine ถูกตรวจสอบระหว่างสายพันธุ์ producing ของ L. lactis นี้ได้แบ่งประเภทของพวกเขาเป็น 'แรง' หรือ ' putrescine กลางโปรดิวเซอร์ เบียดเบียน ความ biogenic amines ผลิต 58 S. thermophilus แยกในโยเกิร์ตพบว่า ส่วนใหญ่แยก thermophilus S. มีความสามารถในการแบบฟอร์ม biogenic amines โดยเฉพาะอย่างยิ่งฮิสตามีนและ tyramine ซึ่งเป็น amines เป็นพิษมากที่สุดสำหรับสุขภาพของมนุษย์ และวิจัยวินาทีของกรดแลกติกแบคทีเรีย 137 สายพันธุ์แยกต่างหากจากดูชีต่าง ๆ ทุก ๆ เทนเซอร์ที่แลคโตบาซิลลัส และ curvatus แลคโตบาซิลลัส สามารถผลิต tyramine และ putrescine (ผ่านทางเดิน deiminase agmatine) และในการทำงานสถานะ L. lactis อนุญาตให้จัดประเภทเป็นที่ 'แรง' หรือ 'ผู้ผลิต putrescine กลาง' ของพวกเขา ดังนั้น จึงควรเลือกสายพันธุ์ที่เหมาะสมเป็นวัฒนธรรมที่เริ่มต้นสำหรับผลิตภัณฑ์นม ถ้า ไม่ seselectต้องใช้ microorganisim สามารถสะสม BA ความเข้มข้นสูงและบริโภคอาหารที่ประกอบด้วยขนาดใหญ่จำนวน amines เหล่านี้ได้ผล toxicological แม้จะมีกฎหมายเฉพาะไม่เกี่ยวกับเนื้อหา BA ในผลิตภัณฑ์นม มันโดยทั่วไปสันนิษฐานว่า พวกเขาจะไม่อนุญาตให้สะสม ดังนั้น ในอนาคตควรมีวิธีตรวจสอบสถานะของบาบาproducing จุลินทรีย์ในผลิตภัณฑ์นมและปัจจัยมีผลต่อบารวบรวมวิเคราะห์เพื่อแนะนำวิธีสามารถลดสถานะของพวกเขา และสร้างขีดจำกัดของความปลอดภัยสำหรับความเข้มข้นในผลิตภัณฑ์นมรวมทั้งอาหารอื่น ๆ
การแปล กรุณารอสักครู่..
ผมขอขอบคุณสำหรับการเป็นที่นี่ today.I อยากจะแนะนำตัวเองของฉัน ชื่อของฉันคือวิลาวรรณ Jaimaroeng.I'm ศึกษาการหมักอุตสาหกรรม technology.My เป็นที่ปรึกษา Dr.Aphacha Jindaprasert.Today
ผมจะนำเสนอในหัวข้อของการสร้างไบโอจีเอมีนจากแบคทีเรียกรดแลคติกที่แยกได้จากผลิตภัณฑ์นมของครั้งแรกของทั้งหมดที่ฉัน'ต้องการที่จะพูดคุยเกี่ยวกับไบโอจีเอ amine.Biogenic เป็นสารประกอบอินทรีย์และไนโตรเจนที่มีฤทธิ์ทางชีวภาพที่เกิดขึ้นส่วนใหญ่โดย decarboxylation ของกรดอะมิโน การบริโภคอาหารที่มีจำนวนมากของเอมีนเหล่านี้สามารถมีผลต่อทางพิษวิทยา healt.and ไบโอจีเอมีนที่สำคัญที่สุดในอาหารประเภทนมมีกระนี้ tyramine, cadaverine และ putrescine
เอาอีกแล้วแบคทีเรียกรดแลคติก (LAB) มีบทบาทสำคัญในการผลิตของหมัก ผลิตภัณฑ์นมที่มี Lactococcus lactis และ thermophiles Streptococcus เป็นสายพันธุ์ที่ใช้กันมากที่สุดเป็นหลักเริ่มหมัก .Their หน้าที่หลักคือการผลิตอย่างรวดเร็วของกรดแลคติคจากแลคโตส.
นี้สไลด์เดินสังเคราะห์ปัจจุบันของไบโอจี decarboxylate amine.Histamine โดยฮิสติดีน decarboxylase.Tyramine decarboxylate โดย tyrosine.Cadaverine decarboxylate โดยไลซีนและอาร์จินีเป็น decarboxylated โดย decarboxylase อาร์จินี (เอดีซี) ในการผลิต Agmatine Agmatine สามารถแปลงเป็น putrescine.and putrescine สามารถเกิดขึ้นจาก ornithine decarboxylase โดย ornithine (ODC) ในสไลด์นี้พวกเขาจะพบว่าไบโอจีเอมีนในผลิตภัณฑ์นมที่แตกต่างจากน้ำนมดิบมีจำนวนมากของไบโอจีเอเมื่อเทียบกับนมพาสเจอร์ไรส์ปริญญาตรีบ้านทำโยเกิร์ตธรรมชาติและในการวิจัยครั้งนี้มีวัตถุประสงค์ของการศึกษาเพื่อศึกษาเอมีนไบโอจีเอสก่อ thermophilus ที่แยกได้จากที่บ้านทำโยเกิร์ตธรรมชาติและไลซีนและน้ำซุป histidine decarboxylase. วัสดุและวิธีการสื่อวัฒนธรรมและการสกัดแบคทีเรีย- พวกเขาจะใช้ ทำบ้านตัวอย่างโยเกิร์ต- และการแพร่กระจายของวัฒนธรรม S.thermophilus ใช้น้ำซุป SM17 - แล้วสายพันธุ์เอส thermophilus ถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 72 ชม. - ใช้วัฒนธรรมและแบคทีเรียเหล่านี้ (1011cfu / ml) ถอดออกและใส่ลงไปใน LDB และ HDB - เพื่อที่จะระบุสายพันธุ์เอส thermophilus แสดงความสามารถในการ decarboxylate ของ LDB และมี HDB. - ปั่นแล้วที่ 3,000 กรัมเป็นเวลา 10 นาทีแล้วกรองกระดาษกรองØ125มม- หลังจากนั้นก็ใสแบคทีเรียที่ถูกนำสำหรับ derivatisation ใน เพื่อที่จะได้รับการวิเคราะห์โดยวิธี HPLC. วิธีการวิเคราะห์ประสิทธิภาพสูงโครมาโตเหลว (HPLC) -they จะใช้สารละลายแบคทีเรีย-Analysis โดยวิธี HPLC กับขั้นตอนการกลับรายการ colume (วิธี derivatization Pre-คอลัมน์) โดยใช้โปรแกรมชะ gardient. - ระยะเวลาที่แยกรวมได้น้อย กว่า 20 นาที และปริมาณการฉีด 10 ไมโครลิตร- การตรวจสอบคือการตรวจสอบที่ 254 นาโนเมตร. - เส้นโค้งมาตรฐานแอมโมเนียและแต่ละสิบสองเอมีนในช่วง 0-. - 50 มก. / มลถูกจัดทำภาพการแสดงนี้มีประสิทธิภาพสูงโครมาโตเหลว(HPLC ) อุปกรณ์Polymerase ปฏิกิริยาลูกโซ่ (PCR) -they จะใช้ในการสกัดดีเอ็นเอของ S.thermophilus - แล้วให้ความร้อนเครื่อง Cycler PCR conain 3 ขั้นตอนที่ 1 denaturation 2 หลอม 3 ขยาย-. หลังจากนั้นผลิตภัณฑ์ PCR ขยายวิ่งบนเจลอิเล็ก 1.5% และวิเคราะห์ภายใต้แสงยูวีภาพนี้แสดงให้เห็นความร้อนเครื่องCycler PCR และ Electrophoresis เจล. ในผลการวิจัยแสดง HPLC นี้ว่าจำนวนของเอสแยก thermophilus ที่ผลิตไบโอจีเอมีนใน decarboxylase ฮิสติดีน (HDB) และไลซีนน้ำซุป decarboxylase (LDB) พวกเขาจะพบว่า thermophiles เอสที่แยกไม่เพียง แต่ผลิตฮีสตามียัง amiine อื่น ๆ และการผลิตไบโอจีเอมีนโดยทั่วไปต่ำกว่า 100 มิลลิกรัม / ลิตรรูปที่1 แสดงการผลิตโดยเอสฮีสตามี thermophilus แยกใน น้ำซุป histidine decarboxylase ส่วนใหญ่ของเอส thermophilus แยกที่เกิดขึ้นในปริมาณที่ต่ำของฮีสตามี (1-50 มก. / ลิตร) จากฮิสทิดีในขณะที่หนึ่งแยกเป็นผู้ผลิตเออุดมสมบูรณ์ที่มีการผลิตเอเหนือ 36.33 มิลลิกรัม / ลิตร. รูปที่ 2 แสดงการผลิตโดยเอสฮีสตามี thermophilus แยกไลซีนในน้ำซุป decarboxylase จำนวนฮีสตามีสายพันธุ์ที่ผลิตโดยส่วนใหญ่อยู่ในช่วง 1.29-45.2 มิลลิกรัม / ลิตร. รูป 3. แสดงขยาย PCR ด้วยไพรเมอร์ที่ออกแบบมาเพื่อขยาย decarboxylase ฮิสติดีน (hdca) ยีนใน isolates.and ออกแบบมาสำหรับการขยายของส่วนที่มีความยาว 435 bp ของ gene.they HDC จะพบว่าเพียง13 สายพันธุ์ที่ผ่านการทดสอบในเชิงบวกสำหรับยีน hdcA ในขณะที่วงดนตรี PCR เป็น ไม่พบสำหรับการผลิตไอโซเลทบางกระ ดังนั้นการผลิตฮีสตามีไม่ได้ถูกควบคุมโดยยีนเพียง hdcA บางยีนอื่น ๆ (s) สามารถมีส่วนร่วมในการผลิตฮีสตามี. ปริญญาตรีในศิลปะชีสและวัตถุประสงค์ในการวิจัยครั้งนี้ของกำลังการผลิตการศึกษาปริญญาตรีในการผลิตสามารถทดสอบโดยวิธีโครมาหรือโมเลกุลของวัสดุและวิธีการบริติชแอร์เวย์กำลังการผลิต-they ใช้ตัวอย่างชีสศิลปะและอื่น supernatants วัฒนธรรมของสายพันธุ์ LAB เติบโตขึ้นเป็นเวลา 24 ชั่วโมงใน 10 มล. M17 หรือน้ำซุป MRS เสริมด้วย 1 มิลลิซายน์, ฮิสติดีนมิลลิ 1, ornithine 1 มิลลิหรือ 1 มิลลิ Agmatine ปั่น -then ของวัฒนธรรม (2000 X กรัมเป็นเวลา 15 นาที) และการกรองของสารละลายผ่านเยื่อรูขุมขนมีขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 0.2 ไมโครเมตร. หลังการว่ากลุ่มตัวอย่าง derivatized วิเคราะห์ (U) HPLC ปฏิกิริยาลูกโซ่ Polymerase (PCR) -they จะใช้ในการสกัดดีเอ็นเอของ LAB ดำเนิน -then ใน MyCycler ™ Cycler ความร้อนโดยใช้ DreamTaq โพลิเมอร์และอื่นผลิตภัณฑ์PCR ถูกแยกออกใน 0.8% (w / v) เจล agarose ในบัฟเฟอร์ 1XTAE และมองเห็นหลังจากการย้อมสีด้วย ethidium bromide ใช้ GelDoc 2000 ในผลการวิจัยจากรวม 137 สายพันธุ์นี้พบว่า 7 สายพันธุ์ที่ผลิต tyramine 2 สายพันธุ์ที่ผลิตฮีสตาและความเครียดผลิต putrecine 17 ผ่านทางสายพันธุ์ AGDI.All ผล PCR ในเชิงบวกสำหรับการปรากฏตัวของยีนที่เกี่ยวข้องกับการผลิตสามารถที่จะ systhesize บริติชแอร์เวย์ที่สอดคล้องกันยกเว้นสองสายพันธุ์ของ S. thermophilus. Fig1.show ผลการทดสอบ PCR สำหรับ การปรากฏตัวของยีนที่เกี่ยวข้องกับ BA production.They จะพบว่า brevis แลคโตบาซิลลัสและแลคโตบาซิลลัสปรากฏตัว curvatus ทั้ง TDC + (กลุ่ม tyramine ผลิต) และ AGDI + (putrescine ผลิตกลุ่มผ่านทางเดิน Agmatine deiminase) และ Lactococcus lactis subsp และ Lactococcus lactis subsp lactis การปรากฏ Cremoris ทั้ง AGDI + AGDI- Table2 แสดงการจำแนกประเภทของ tyramine- และ putrescine ผลิต strains.they จะพบว่า brevis แลคโตบาซิลลัสและแลคโตบาซิลลัสจำแนก curvatus เป็นสายพันธุ์ที่ผลิต tyramine ที่แข็งแกร่งและการเปลี่ยนแปลงในประสิทธิภาพการผลิต putrescine ได้สังเกตในหมู่สายพันธุ์การผลิตแอล lactis; นี้ได้รับอนุญาตให้จัดหมวดหมู่ของพวกเขาเป็น 'ที่แข็งแกร่ง' หรือ 'กลาง putrescine ผู้ผลิตในความสามารถในการสรุปการผลิตไบโอจีเอมีน58 เอส thermophilus แยกในโยเกิร์ตที่แสดงให้เห็นว่าส่วนใหญ่ของ thermophilus เอสไอโซเลทมีความสามารถในรูปแบบไบโอจีเอมีนโดยเฉพาะอย่างยิ่งและฮีสตามี tyramine ซึ่ง เป็นเอมีนที่เป็นพิษมากที่สุดสำหรับการวิจัย health.And วินาทีมนุษย์ของแบคทีเรียกรดแลคติก 137 สายพันธุ์ที่แยกได้จากการแสดงศิลปะชีสแตกต่างกันที่ brevis แลคโตบาซิลลัส และ curvatus แลคโตบาซิลลัส สามารถผลิต tyramine และ putrescine (ผ่านทางเดิน Agmatine deiminase) ที่ .and ในการปรากฏตัวงานนี้แอล lactis; นี้ได้รับอนุญาตให้จัดหมวดหมู่ของพวกเขาเป็น 'ที่แข็งแกร่ง' หรือ 'ผู้ผลิต putrescine กลาง' ดังนั้นจึงเป็นสิ่งสำคัญที่จะเลือกสายพันธุ์ที่เหมาะที่จะเป็นวัฒนธรรมที่เริ่มต้นสำหรับนม product.If ไม่ seselect microorganisim ความเครียดสามารถสะสมปริญญาตรีในความเข้มข้นสูงและการบริโภคอาหารที่มีขนาดใหญ่ปริมาณของเอมีนเหล่านี้สามารถมีผลกระทบทางพิษวิทยา แม้จะไม่มีกฎหมายเฉพาะที่เกี่ยวข้องกับเนื้อหาของบริติชแอร์เวย์ในผลิตภัณฑ์นมมันจะสันนิษฐานกันโดยทั่วไปว่าพวกเขาไม่ควรได้รับอนุญาตให้สะสม ดังนั้นในอนาคตควรจะมีวิธีการที่ใช้ได้สำหรับการตรวจสอบการปรากฏตัวของปริญญาตรีหรือปริญญาตรีการผลิตเชื้อจุลินทรีย์ในผลิตภัณฑ์นมและปัจจัยที่มีผลต่อการสะสมบริติชแอร์เวย์มีการวิเคราะห์เพื่อที่จะแสดงให้เห็นวิธีการที่เป็นไปได้ของการลดสถานะของพวกเขาและสร้างข้อ จำกัด ด้านความปลอดภัยสำหรับความเข้มข้นของพวกเขาในนม รวมทั้งผลิตภัณฑ์อาหารอื่น ๆ
ผมจะนำเสนอในหัวข้อของการสร้างไบโอจีเอมีนจากแบคทีเรียกรดแลคติกที่แยกได้จากผลิตภัณฑ์นมของครั้งแรกของทั้งหมดที่ฉัน'ต้องการที่จะพูดคุยเกี่ยวกับไบโอจีเอ amine.Biogenic เป็นสารประกอบอินทรีย์และไนโตรเจนที่มีฤทธิ์ทางชีวภาพที่เกิดขึ้นส่วนใหญ่โดย decarboxylation ของกรดอะมิโน การบริโภคอาหารที่มีจำนวนมากของเอมีนเหล่านี้สามารถมีผลต่อทางพิษวิทยา healt.and ไบโอจีเอมีนที่สำคัญที่สุดในอาหารประเภทนมมีกระนี้ tyramine, cadaverine และ putrescine
เอาอีกแล้วแบคทีเรียกรดแลคติก (LAB) มีบทบาทสำคัญในการผลิตของหมัก ผลิตภัณฑ์นมที่มี Lactococcus lactis และ thermophiles Streptococcus เป็นสายพันธุ์ที่ใช้กันมากที่สุดเป็นหลักเริ่มหมัก .Their หน้าที่หลักคือการผลิตอย่างรวดเร็วของกรดแลคติคจากแลคโตส.
นี้สไลด์เดินสังเคราะห์ปัจจุบันของไบโอจี decarboxylate amine.Histamine โดยฮิสติดีน decarboxylase.Tyramine decarboxylate โดย tyrosine.Cadaverine decarboxylate โดยไลซีนและอาร์จินีเป็น decarboxylated โดย decarboxylase อาร์จินี (เอดีซี) ในการผลิต Agmatine Agmatine สามารถแปลงเป็น putrescine.and putrescine สามารถเกิดขึ้นจาก ornithine decarboxylase โดย ornithine (ODC) ในสไลด์นี้พวกเขาจะพบว่าไบโอจีเอมีนในผลิตภัณฑ์นมที่แตกต่างจากน้ำนมดิบมีจำนวนมากของไบโอจีเอเมื่อเทียบกับนมพาสเจอร์ไรส์ปริญญาตรีบ้านทำโยเกิร์ตธรรมชาติและในการวิจัยครั้งนี้มีวัตถุประสงค์ของการศึกษาเพื่อศึกษาเอมีนไบโอจีเอสก่อ thermophilus ที่แยกได้จากที่บ้านทำโยเกิร์ตธรรมชาติและไลซีนและน้ำซุป histidine decarboxylase. วัสดุและวิธีการสื่อวัฒนธรรมและการสกัดแบคทีเรีย- พวกเขาจะใช้ ทำบ้านตัวอย่างโยเกิร์ต- และการแพร่กระจายของวัฒนธรรม S.thermophilus ใช้น้ำซุป SM17 - แล้วสายพันธุ์เอส thermophilus ถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 72 ชม. - ใช้วัฒนธรรมและแบคทีเรียเหล่านี้ (1011cfu / ml) ถอดออกและใส่ลงไปใน LDB และ HDB - เพื่อที่จะระบุสายพันธุ์เอส thermophilus แสดงความสามารถในการ decarboxylate ของ LDB และมี HDB. - ปั่นแล้วที่ 3,000 กรัมเป็นเวลา 10 นาทีแล้วกรองกระดาษกรองØ125มม- หลังจากนั้นก็ใสแบคทีเรียที่ถูกนำสำหรับ derivatisation ใน เพื่อที่จะได้รับการวิเคราะห์โดยวิธี HPLC. วิธีการวิเคราะห์ประสิทธิภาพสูงโครมาโตเหลว (HPLC) -they จะใช้สารละลายแบคทีเรีย-Analysis โดยวิธี HPLC กับขั้นตอนการกลับรายการ colume (วิธี derivatization Pre-คอลัมน์) โดยใช้โปรแกรมชะ gardient. - ระยะเวลาที่แยกรวมได้น้อย กว่า 20 นาที และปริมาณการฉีด 10 ไมโครลิตร- การตรวจสอบคือการตรวจสอบที่ 254 นาโนเมตร. - เส้นโค้งมาตรฐานแอมโมเนียและแต่ละสิบสองเอมีนในช่วง 0-. - 50 มก. / มลถูกจัดทำภาพการแสดงนี้มีประสิทธิภาพสูงโครมาโตเหลว(HPLC ) อุปกรณ์Polymerase ปฏิกิริยาลูกโซ่ (PCR) -they จะใช้ในการสกัดดีเอ็นเอของ S.thermophilus - แล้วให้ความร้อนเครื่อง Cycler PCR conain 3 ขั้นตอนที่ 1 denaturation 2 หลอม 3 ขยาย-. หลังจากนั้นผลิตภัณฑ์ PCR ขยายวิ่งบนเจลอิเล็ก 1.5% และวิเคราะห์ภายใต้แสงยูวีภาพนี้แสดงให้เห็นความร้อนเครื่องCycler PCR และ Electrophoresis เจล. ในผลการวิจัยแสดง HPLC นี้ว่าจำนวนของเอสแยก thermophilus ที่ผลิตไบโอจีเอมีนใน decarboxylase ฮิสติดีน (HDB) และไลซีนน้ำซุป decarboxylase (LDB) พวกเขาจะพบว่า thermophiles เอสที่แยกไม่เพียง แต่ผลิตฮีสตามียัง amiine อื่น ๆ และการผลิตไบโอจีเอมีนโดยทั่วไปต่ำกว่า 100 มิลลิกรัม / ลิตรรูปที่1 แสดงการผลิตโดยเอสฮีสตามี thermophilus แยกใน น้ำซุป histidine decarboxylase ส่วนใหญ่ของเอส thermophilus แยกที่เกิดขึ้นในปริมาณที่ต่ำของฮีสตามี (1-50 มก. / ลิตร) จากฮิสทิดีในขณะที่หนึ่งแยกเป็นผู้ผลิตเออุดมสมบูรณ์ที่มีการผลิตเอเหนือ 36.33 มิลลิกรัม / ลิตร. รูปที่ 2 แสดงการผลิตโดยเอสฮีสตามี thermophilus แยกไลซีนในน้ำซุป decarboxylase จำนวนฮีสตามีสายพันธุ์ที่ผลิตโดยส่วนใหญ่อยู่ในช่วง 1.29-45.2 มิลลิกรัม / ลิตร. รูป 3. แสดงขยาย PCR ด้วยไพรเมอร์ที่ออกแบบมาเพื่อขยาย decarboxylase ฮิสติดีน (hdca) ยีนใน isolates.and ออกแบบมาสำหรับการขยายของส่วนที่มีความยาว 435 bp ของ gene.they HDC จะพบว่าเพียง13 สายพันธุ์ที่ผ่านการทดสอบในเชิงบวกสำหรับยีน hdcA ในขณะที่วงดนตรี PCR เป็น ไม่พบสำหรับการผลิตไอโซเลทบางกระ ดังนั้นการผลิตฮีสตามีไม่ได้ถูกควบคุมโดยยีนเพียง hdcA บางยีนอื่น ๆ (s) สามารถมีส่วนร่วมในการผลิตฮีสตามี. ปริญญาตรีในศิลปะชีสและวัตถุประสงค์ในการวิจัยครั้งนี้ของกำลังการผลิตการศึกษาปริญญาตรีในการผลิตสามารถทดสอบโดยวิธีโครมาหรือโมเลกุลของวัสดุและวิธีการบริติชแอร์เวย์กำลังการผลิต-they ใช้ตัวอย่างชีสศิลปะและอื่น supernatants วัฒนธรรมของสายพันธุ์ LAB เติบโตขึ้นเป็นเวลา 24 ชั่วโมงใน 10 มล. M17 หรือน้ำซุป MRS เสริมด้วย 1 มิลลิซายน์, ฮิสติดีนมิลลิ 1, ornithine 1 มิลลิหรือ 1 มิลลิ Agmatine ปั่น -then ของวัฒนธรรม (2000 X กรัมเป็นเวลา 15 นาที) และการกรองของสารละลายผ่านเยื่อรูขุมขนมีขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 0.2 ไมโครเมตร. หลังการว่ากลุ่มตัวอย่าง derivatized วิเคราะห์ (U) HPLC ปฏิกิริยาลูกโซ่ Polymerase (PCR) -they จะใช้ในการสกัดดีเอ็นเอของ LAB ดำเนิน -then ใน MyCycler ™ Cycler ความร้อนโดยใช้ DreamTaq โพลิเมอร์และอื่นผลิตภัณฑ์PCR ถูกแยกออกใน 0.8% (w / v) เจล agarose ในบัฟเฟอร์ 1XTAE และมองเห็นหลังจากการย้อมสีด้วย ethidium bromide ใช้ GelDoc 2000 ในผลการวิจัยจากรวม 137 สายพันธุ์นี้พบว่า 7 สายพันธุ์ที่ผลิต tyramine 2 สายพันธุ์ที่ผลิตฮีสตาและความเครียดผลิต putrecine 17 ผ่านทางสายพันธุ์ AGDI.All ผล PCR ในเชิงบวกสำหรับการปรากฏตัวของยีนที่เกี่ยวข้องกับการผลิตสามารถที่จะ systhesize บริติชแอร์เวย์ที่สอดคล้องกันยกเว้นสองสายพันธุ์ของ S. thermophilus. Fig1.show ผลการทดสอบ PCR สำหรับ การปรากฏตัวของยีนที่เกี่ยวข้องกับ BA production.They จะพบว่า brevis แลคโตบาซิลลัสและแลคโตบาซิลลัสปรากฏตัว curvatus ทั้ง TDC + (กลุ่ม tyramine ผลิต) และ AGDI + (putrescine ผลิตกลุ่มผ่านทางเดิน Agmatine deiminase) และ Lactococcus lactis subsp และ Lactococcus lactis subsp lactis การปรากฏ Cremoris ทั้ง AGDI + AGDI- Table2 แสดงการจำแนกประเภทของ tyramine- และ putrescine ผลิต strains.they จะพบว่า brevis แลคโตบาซิลลัสและแลคโตบาซิลลัสจำแนก curvatus เป็นสายพันธุ์ที่ผลิต tyramine ที่แข็งแกร่งและการเปลี่ยนแปลงในประสิทธิภาพการผลิต putrescine ได้สังเกตในหมู่สายพันธุ์การผลิตแอล lactis; นี้ได้รับอนุญาตให้จัดหมวดหมู่ของพวกเขาเป็น 'ที่แข็งแกร่ง' หรือ 'กลาง putrescine ผู้ผลิตในความสามารถในการสรุปการผลิตไบโอจีเอมีน58 เอส thermophilus แยกในโยเกิร์ตที่แสดงให้เห็นว่าส่วนใหญ่ของ thermophilus เอสไอโซเลทมีความสามารถในรูปแบบไบโอจีเอมีนโดยเฉพาะอย่างยิ่งและฮีสตามี tyramine ซึ่ง เป็นเอมีนที่เป็นพิษมากที่สุดสำหรับการวิจัย health.And วินาทีมนุษย์ของแบคทีเรียกรดแลคติก 137 สายพันธุ์ที่แยกได้จากการแสดงศิลปะชีสแตกต่างกันที่ brevis แลคโตบาซิลลัส และ curvatus แลคโตบาซิลลัส สามารถผลิต tyramine และ putrescine (ผ่านทางเดิน Agmatine deiminase) ที่ .and ในการปรากฏตัวงานนี้แอล lactis; นี้ได้รับอนุญาตให้จัดหมวดหมู่ของพวกเขาเป็น 'ที่แข็งแกร่ง' หรือ 'ผู้ผลิต putrescine กลาง' ดังนั้นจึงเป็นสิ่งสำคัญที่จะเลือกสายพันธุ์ที่เหมาะที่จะเป็นวัฒนธรรมที่เริ่มต้นสำหรับนม product.If ไม่ seselect microorganisim ความเครียดสามารถสะสมปริญญาตรีในความเข้มข้นสูงและการบริโภคอาหารที่มีขนาดใหญ่ปริมาณของเอมีนเหล่านี้สามารถมีผลกระทบทางพิษวิทยา แม้จะไม่มีกฎหมายเฉพาะที่เกี่ยวข้องกับเนื้อหาของบริติชแอร์เวย์ในผลิตภัณฑ์นมมันจะสันนิษฐานกันโดยทั่วไปว่าพวกเขาไม่ควรได้รับอนุญาตให้สะสม ดังนั้นในอนาคตควรจะมีวิธีการที่ใช้ได้สำหรับการตรวจสอบการปรากฏตัวของปริญญาตรีหรือปริญญาตรีการผลิตเชื้อจุลินทรีย์ในผลิตภัณฑ์นมและปัจจัยที่มีผลต่อการสะสมบริติชแอร์เวย์มีการวิเคราะห์เพื่อที่จะแสดงให้เห็นวิธีการที่เป็นไปได้ของการลดสถานะของพวกเขาและสร้างข้อ จำกัด ด้านความปลอดภัยสำหรับความเข้มข้นของพวกเขาในนม รวมทั้งผลิตภัณฑ์อาหารอื่น ๆ
การแปล กรุณารอสักครู่..
ขอขอบคุณสำหรับการอยู่ที่นี่ในวันนี้ ผมขอแนะนำตนเองของฉัน ชื่อของฉันคือ วิลาวัณย์ jaimaroeng ผมศึกษาเทคโนโลยีการหมักในอุตสาหกรรม ที่ปรึกษาของผม คือ ดร. aphacha jindaprasert วันนี้ผมจะขอนำเสนอในเรื่องของการลงเอมีนโดยแบคทีเรียกรดแลคติกที่แยกได้จากผลิตภัณฑ์นมของ
ครั้งแรกของทั้งหมด ฉันต้องการที่จะพูดคุยเกี่ยวกับ biogenic amine .ไบโอเจนิกเอมีนอินทรีย์ไนโตรเจนและสารประกอบที่มีฤทธิ์ทางชีวภาพ ส่วนใหญ่เกิดขึ้นจากเงือกของกรดอะมิโน การบริโภคอาหารที่มีจำนวนมากของเอมีนเหล่านี้สามารถผลิตที่สำคัญที่สุดต่อ healt.and เอมีนในนม อาหารที่มีไทรามินมิน และคาดาเวอรีน , putrescine
นอกจากนี้แบคทีเรียกรดแล็กติก ( Lab ) มีบทบาทสำคัญในการผลิตผลิตภัณฑ์นมหมักด้วยเชื้อแลคโตค คัสเทอร์โมไฟล์ lactis และเป็นชนิดที่ใช้กันมากที่สุดเช่นการเริ่มหมักหลัก หน้าที่หลักของพวกเขาคือการผลิตอย่างรวดเร็วของกรดแลกติกจากแล็กโตส .
สไลด์ปัจจุบันวิถีการสังเคราะห์ของ biogenic amine .โดยเมื่อใช้ histamine สฤษฎ์ . ไทรามินสฤษฎ์ โดยซีน . คาดาเวอรีนสฤษฎ์ โดยไลซีน และอาร์จินีนเป็นสารสกัดจากเปลือก โดยอาร์ดีคาร์บอกซิเลส ( ADC ) เพื่อผลิต agmatine . agmatine สามารถแปลงเป็น putrescine.and putrescine สามารถเกิดขึ้นจากออร์นิทีนจากออร์นิทีนดีคาร์บอกซิเลส ( ODC )
สไลด์ในนี้พวกเขาพบว่า biogenic amine ในผลิตภัณฑ์นมที่แตกต่างกันจากน้ำนมดิบมีปริมาณขนาดใหญ่ของ biogenic amine เป็นนอกคอก 150 บานม
ในบ้านทำโยเกิร์ตธรรมชาติ และในงานวิจัยนี้ มีวัตถุประสงค์ของการศึกษาเพื่อศึกษา
เอมีนก่อตัวโดย สีที่ได้จากธรรมชาติสกัดจากโยเกิร์ตธรรมชาติที่บ้าน และไลซีน และฮิสติดีนซุป
ใช้ .วัสดุและวิธีการ
สื่อวัฒนธรรมและแบคทีเรียด้วย
-
- พวกเขาจะใช้ทำบ้านตัวอย่างโยเกิร์ตและการแพร่กระจายของวัฒนธรรม s.thermophilus ใช้ sm17 ซุป
- แล้วสีที่ได้จากธรรมชาติของสายพันธุ์ถูกบ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 72 ชั่วโมง และใช้วัฒนธรรม
- แบคทีเรียเหล่านี้ ( 1011cfu / ml ) ออก และใส่ลงใน ldb HDB
- และ เพื่อที่จะระบุ .เทอร์มอฟิลัส สายพันธุ์ แสดงความสามารถ สฤษฎ์ ของ ldb HDB ที่มีและ .
- แล้วระดับที่ 3 , 000 กรัม เป็นเวลา 10 นาที แล้วกรองเป็นกรองกระดาษ Ø 125 mm
- หลังจากนั้นแบคทีเรียสูง ถ่ายให้ derivatisation เพื่อที่จะวิเคราะห์โดย HPLC
วิธีการวิเคราะห์ประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography ( HPLC )
-
ที่นำพวกเขาจะใช้แบคทีเรีย- การวิเคราะห์โดยวิธี HPLC colume กลับเฟส ( วิธีกับคอลัมน์ก่อน ) โดยการใช้โปรแกรม ( gardient .
- แยกรวมน้อยกว่า 20 นาทีและปริมาณการฉีดคือ 10
- L µสามารถตรวจสอบที่ 254 nm .
- เส้นโค้งมาตรฐานของแอมโมเนียและเอมีนในแต่ละสิบสองช่วง 0 – 50 มก. / มล.
ที่เตรียมไว้ภาพนี้แสดงวิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง ( HPLC ) อุปกรณ์
Polymerase chain reaction ( PCR )
- พวกเขาจะใช้ในการสกัดดีเอ็นเอของ s.thermophilus
- แล้วทำ PCR เครื่องวงจรความร้อน conain 3 ขั้นตอน 1 . ( 2 การอบ , 3 นามสกุล
- หลังจากที่ขยาย PCR ผลิตภัณฑ์ใช้ 1.5% electrophoresis เจลและวิเคราะห์ภายใต้แสง UV .
ภาพนี้แสดงโดยความร้อนรอบเครื่องและเอนไซม์เจล
ในผลแสดงเทคนิคการวิจัยที่จำนวนของเอสเทอร์มอฟิลัสสายพันธุ์ผลิตเอมีนในโตรกดีคาร์บอกซิเลส ( HDB ) และไลซีน ( LDB ) น้ำซุปที่ใช้ พบว่า S . เทอร์โมไฟล์แยกผลิตไม่เพียง แต่ลดการผลิตลงและยัง amiine เอมีนโดยทั่วไปต่ำกว่า 100 มิลลิกรัม / ลิตร
ฟิคการผลิต histamine 1 แสดงโดย สีที่ได้จากธรรมชาติเมื่อใช้เชื้อในน้ำซุป . ที่สุดของเอสเทอร์มอฟิลัสสายพันธุ์ขึ้น ปริมาณฮีสตามีน ( 1 ) 50 มก. / ล. ) จากีนในขณะที่หนึ่งแยกเป็นเอมีน amine อุดมสมบูรณ์ผลิตกับการผลิตข้างต้น 36.33 mg / l
fig.2 แสดง histamine การผลิตโดย สีที่ได้จากธรรมชาติในน้ำซุปแยกซีนใช้ .ลดปริมาณที่ผลิตโดยเชื้อระหว่างการฝึกที่สุด 1.29 มิลลิกรัม / ลิตร
รูปที่ 3 แสดงให้กับไพรเมอร์ที่ออกแบบมาเพื่อขยายและขยายเมื่อดีคาร์บอกซิเลส ( hdca ) ยีนใน isolates.and ที่ออกแบบมาสำหรับการเพิ่มความยาว 435 BP ส่วนหนึ่งของ HDC gene.they พบว่าไอโซเลท
แค่ 13 ทดสอบบวกสำหรับยีน hdca ในขณะที่เชื้อบางสายพันธุ์วงไม่พบการผลิตฮีสตามี .
ครั้งแรกของทั้งหมด ฉันต้องการที่จะพูดคุยเกี่ยวกับ biogenic amine .ไบโอเจนิกเอมีนอินทรีย์ไนโตรเจนและสารประกอบที่มีฤทธิ์ทางชีวภาพ ส่วนใหญ่เกิดขึ้นจากเงือกของกรดอะมิโน การบริโภคอาหารที่มีจำนวนมากของเอมีนเหล่านี้สามารถผลิตที่สำคัญที่สุดต่อ healt.and เอมีนในนม อาหารที่มีไทรามินมิน และคาดาเวอรีน , putrescine
นอกจากนี้แบคทีเรียกรดแล็กติก ( Lab ) มีบทบาทสำคัญในการผลิตผลิตภัณฑ์นมหมักด้วยเชื้อแลคโตค คัสเทอร์โมไฟล์ lactis และเป็นชนิดที่ใช้กันมากที่สุดเช่นการเริ่มหมักหลัก หน้าที่หลักของพวกเขาคือการผลิตอย่างรวดเร็วของกรดแลกติกจากแล็กโตส .
สไลด์ปัจจุบันวิถีการสังเคราะห์ของ biogenic amine .โดยเมื่อใช้ histamine สฤษฎ์ . ไทรามินสฤษฎ์ โดยซีน . คาดาเวอรีนสฤษฎ์ โดยไลซีน และอาร์จินีนเป็นสารสกัดจากเปลือก โดยอาร์ดีคาร์บอกซิเลส ( ADC ) เพื่อผลิต agmatine . agmatine สามารถแปลงเป็น putrescine.and putrescine สามารถเกิดขึ้นจากออร์นิทีนจากออร์นิทีนดีคาร์บอกซิเลส ( ODC )
สไลด์ในนี้พวกเขาพบว่า biogenic amine ในผลิตภัณฑ์นมที่แตกต่างกันจากน้ำนมดิบมีปริมาณขนาดใหญ่ของ biogenic amine เป็นนอกคอก 150 บานม
ในบ้านทำโยเกิร์ตธรรมชาติ และในงานวิจัยนี้ มีวัตถุประสงค์ของการศึกษาเพื่อศึกษา
เอมีนก่อตัวโดย สีที่ได้จากธรรมชาติสกัดจากโยเกิร์ตธรรมชาติที่บ้าน และไลซีน และฮิสติดีนซุป
ใช้ .วัสดุและวิธีการ
สื่อวัฒนธรรมและแบคทีเรียด้วย
-
- พวกเขาจะใช้ทำบ้านตัวอย่างโยเกิร์ตและการแพร่กระจายของวัฒนธรรม s.thermophilus ใช้ sm17 ซุป
- แล้วสีที่ได้จากธรรมชาติของสายพันธุ์ถูกบ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 72 ชั่วโมง และใช้วัฒนธรรม
- แบคทีเรียเหล่านี้ ( 1011cfu / ml ) ออก และใส่ลงใน ldb HDB
- และ เพื่อที่จะระบุ .เทอร์มอฟิลัส สายพันธุ์ แสดงความสามารถ สฤษฎ์ ของ ldb HDB ที่มีและ .
- แล้วระดับที่ 3 , 000 กรัม เป็นเวลา 10 นาที แล้วกรองเป็นกรองกระดาษ Ø 125 mm
- หลังจากนั้นแบคทีเรียสูง ถ่ายให้ derivatisation เพื่อที่จะวิเคราะห์โดย HPLC
วิธีการวิเคราะห์ประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography ( HPLC )
-
ที่นำพวกเขาจะใช้แบคทีเรีย- การวิเคราะห์โดยวิธี HPLC colume กลับเฟส ( วิธีกับคอลัมน์ก่อน ) โดยการใช้โปรแกรม ( gardient .
- แยกรวมน้อยกว่า 20 นาทีและปริมาณการฉีดคือ 10
- L µสามารถตรวจสอบที่ 254 nm .
- เส้นโค้งมาตรฐานของแอมโมเนียและเอมีนในแต่ละสิบสองช่วง 0 – 50 มก. / มล.
ที่เตรียมไว้ภาพนี้แสดงวิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง ( HPLC ) อุปกรณ์
Polymerase chain reaction ( PCR )
- พวกเขาจะใช้ในการสกัดดีเอ็นเอของ s.thermophilus
- แล้วทำ PCR เครื่องวงจรความร้อน conain 3 ขั้นตอน 1 . ( 2 การอบ , 3 นามสกุล
- หลังจากที่ขยาย PCR ผลิตภัณฑ์ใช้ 1.5% electrophoresis เจลและวิเคราะห์ภายใต้แสง UV .
ภาพนี้แสดงโดยความร้อนรอบเครื่องและเอนไซม์เจล
ในผลแสดงเทคนิคการวิจัยที่จำนวนของเอสเทอร์มอฟิลัสสายพันธุ์ผลิตเอมีนในโตรกดีคาร์บอกซิเลส ( HDB ) และไลซีน ( LDB ) น้ำซุปที่ใช้ พบว่า S . เทอร์โมไฟล์แยกผลิตไม่เพียง แต่ลดการผลิตลงและยัง amiine เอมีนโดยทั่วไปต่ำกว่า 100 มิลลิกรัม / ลิตร
ฟิคการผลิต histamine 1 แสดงโดย สีที่ได้จากธรรมชาติเมื่อใช้เชื้อในน้ำซุป . ที่สุดของเอสเทอร์มอฟิลัสสายพันธุ์ขึ้น ปริมาณฮีสตามีน ( 1 ) 50 มก. / ล. ) จากีนในขณะที่หนึ่งแยกเป็นเอมีน amine อุดมสมบูรณ์ผลิตกับการผลิตข้างต้น 36.33 mg / l
fig.2 แสดง histamine การผลิตโดย สีที่ได้จากธรรมชาติในน้ำซุปแยกซีนใช้ .ลดปริมาณที่ผลิตโดยเชื้อระหว่างการฝึกที่สุด 1.29 มิลลิกรัม / ลิตร
รูปที่ 3 แสดงให้กับไพรเมอร์ที่ออกแบบมาเพื่อขยายและขยายเมื่อดีคาร์บอกซิเลส ( hdca ) ยีนใน isolates.and ที่ออกแบบมาสำหรับการเพิ่มความยาว 435 BP ส่วนหนึ่งของ HDC gene.they พบว่าไอโซเลท
แค่ 13 ทดสอบบวกสำหรับยีน hdca ในขณะที่เชื้อบางสายพันธุ์วงไม่พบการผลิตฮีสตามี .
การแปล กรุณารอสักครู่..
ภาษาอื่น ๆ
การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.
- Home Team Total Goals
- If you take the eggs out of the nest, wh
- บทเรียนนี้สอนเรื่อง WH question ซึ่งมี 6
- (i.e., for determining presence or absen
- งานนายก็คำนวณพวกนี้ตลอกเลยน่ะหรอ
- ขนาด 2 m. × 1 m. × 0.08 m
- โครงการสำรวจความพึงพอใจของนักท่องเที่ยวช
- ฉันดีใจมากที่ได้มาเรียนที่นี่
- โครงการสำรวจความพึงพอใจของนักท่องเที่ยวช
- roger
- Conserve
- I'M A BABY
- Conserve
- Effect of decapitation and nutrient appl
- indicating that it is still waiting for
- สู้มั้ย
- Center
- วัน
- human evolution
- I'm doing a bachelor of architecture cou
- เขตภูมิภาคประเภทเกษตรกรรม ได้แก่ พื้นที่
- Effect of decapitation and nutrient appl
- family structure
- I'm doing a bachelor of architecture cou
