Extraction and Isolation. Air-dried

Extraction and Isolation. Air-dried, powdered leaves (1 kg) were homogenized in H2O/acetone (30:70, v/v, 22 L) at room temperature. The filtered homogenate was concentrated in vacuo to 1.5 L at temperatures not exceeding 40 °C. The concentrated homogenate was applied to a Diaion HP-20 (5 i.d. × 50 cm) column and eluted with H2O, MeOH/H2O (40:60, v/v), MeOH, and acetone, successively, to give the corresponding H2O (116 g), MeOH/H2O (40:60) (52 g),MeOH (12.4 g), and acetone (0.629 g) fractions, respectively. The respective fractions were fractionated by monitoring normal- and reversed-phase HPLC. The MeOH/H2O (40:60, v/v) fraction (52 g) was divided into two equal portions (26 g each). Each portion was separately subjected to a Toyopearl HW-40 (coarse) column (2.2 i.d.× 65 cm) and eluted with EtOH/H2O (50:50 → 70:30, v/v), EtOH/H2O (70:30, v/v)/acetone/H2O (70:30, v/v) (90:10 → 80:20 →70:30 → 50:50, v/v), and acetone/H2O (70:30, v/v), successively, collecting 500 mL fractions. The corresponding fractions from both Toyopearl columns were combined as seven Toyopearl (T1) fractions(T1−7).The T1 fraction 3 (6.12 g), eluted with EtOH/H2O (70:30, v/v)/ acetone/H2O (70:30, v/v) (90:10, v/v), was subjected to the same Toyopearl (coarse) column and eluted with EtOH/H2O (70:30, v/v),
EtOH/H2O (70:30, v/v)/acetone/H2O (70:30, v/v) (90:10), and acetone/H2O (70:30, v/v), successively, collecting 900 drop fractions, to give 700 Toyopearl (T2) fractions. The T2 fractions 158−183 (322 mg), eluted with EtOH/H2O (70:30, v/v), were subjected to an MCIgel
CHP-20P column (1.1 i.d. × 35 cm) with H2O and H2O/MeOH(85:15 → 80:20 → 75:25 → 70:30 and 0:100, v/v). The H2O−MeOH(80:20, v/v) eluate (31 mg) was rechromatographed over an MCI-gel CHP-20P column (1.1 i.d. × 21 cm) with H2O and H2O/MeOH (85:15 → 80:20 and 0:100, v/v). A preparative HPLC purification with solvent I of the late eluate with H2O/MeOH (85:15, v/v) (7 mg) yielded a pure sample of nilotinin M5 (1) (2.1 mg). Rechromatography of the H2O/MeOH (80:20, v/v) eluate (63 mg) over the same MCI-gel CHP-20P column and by the same elution pattern afforded a H2O/MeOH (75:25, v/v) eluate (19.8 mg), which upon preparative HPLC purification with solvent II gave nilotinin D10 (4) (4.5 mg). The T2 fractions 184−210 (297 mg), eluted with EtOH/H2O (70:30,v/v), were subjected to an MCI-gel CHP-20P column (1.1 i.d. × 35cm) with H2O and H2O/MeOH (85:15 → 80:20 → 75:25 → 70:30 and 0:100, v/v). The early eluate with H2O/MeOH (80:20, v/v) (33.7mg) was rechromatographed over an MCI-gel CHP-20P column (1.1i.d. × 21 cm) isocratically with H2O/MeOH (85:15, v/v), followed by preparative HPLC purification of the eluate (21 mg) with solvent II,
affording an additional pure sample (8.2 mg) of nilotinin M5 (1). The late eluate (30 mg) with H2O/MeOH (80:20, v/v) was also rechromatographed over an MCI-gel CHP-20P column (1.1 i.d. ×
21 cm) with H2O and H2O/MeOH (90:10 → 85:15 → 80:20 → 75:25 and 0:100, v/v), and preparative HPLC purification of the H2O/ MeOH (75:25, v/v) eluate (55 mg) with solvent II yielded nilotinin
M7 (3) (9.0 mg). The T2 fractions 211−264 (555 mg), eluted with EtOH/H2O (70:30, v/v), were subjected to an MCI-gel CHP-20P column (1.1 i.d. × 37 cm) with H2O and H2O/MeOH (90:10 →85:15 → 80:20 → 75:25 →70:30 and 0:100, v/v). The late eluate with H2O/MeOH (80:20, v/v) (43 mg) with preparative HPLC purification with solvent II yielded nilotinin M6 (2) (7.2 mg). The T2 fractions 265−318 (535 mg), early eluted with EtOH/H2O (70:30,v/v)/acetone/H2O (70:30, v/v) (90:10, v/v), were subjected to an MCI-gel CHP-20P column (1.1 i.d. × 37 cm) with H2O and H2O/
MeOH (90:10 → 85:15 → 80:20 → 75:25 →70:30 and 0:100, v/v), and the late eluate with H2O/MeOH (75:25, v/v) (59 mg) was rechromatographed over the same column with H2O/MeOH (80:20→ 75:25 → 70:30 and 0:100, v/v). The eluate (42.0 mg) with H2O/MeOH (75:25 and 70:30, v/v) was subjected to preparative HPLC purification with solvent III to yield nilotinin D9 (10) (5.4 mg) and
hirtellin F (6.3 mg), respectively.A part (3.6 g) of the T1 fraction 5 (4.6 g), eluted with EtOH−H2O(70:30, v/v)/acetone/H2O (70:30, v/v) (70:30, v/v), was rechromatographed on a Toyopearl HW-40 (coarse) column (2.2 i.d. × 45 cm) with EtOH/H2O (70:30, v/v)/acetone/H2O (70:30, v/v) (90:10 →80:20 → 70:30, v/v), successively. The eluate (1.4g) with EtOH/H2O (70:30, v/v)/acetone/H2O (70:30, v/v) (80:20) was subjected to an MCI-gel CHP-20P column (1.1 i.d. × 36 cm) with H2O and H2O/ MeOH (95:5 → 90:10 → 85:15 → 80:20 → 75:25 → 70:30 → 60:40 and 0:100, v/v), yielding 600 MCI fractions (MCIfrs, 600 drops each). The MCIfrs 11−60 (159 mg) and the MCIfrs 61−195 (235 mg),eluted with H2O/MeOH (85:15, v/v), were separately rechromatographed over a Sephadex LH-20 column (2.2 i.d. × 21 cm) with EtOH/H2O (70:30, v/v), EtOH/H2O (70:30, v/v)/acetone/H2O (70:30, v/v) (90:10, v/v), and acetone/H2O (70:30, v/v), and the crude tannins (69 mg) in the eluate with EtOH/H2O (70:30, v/v)/acetone/H2O (70:30, v/v) (90:10, v/v) from these Sephadex columns
yielded hirtellin T2 (6) (15.2 mg) upon preparative HPLC purificationwith solvents I and II, respectively. The MCIfrs 196−300 (268 mg),eluted with H2O/MeOH (80:20, v/v), were subjected to an MCI-gel CHP-20P column (1.1 i.d. × 37 cm) with H2O and H2O/MeOH (95:5 → 90:10 → 85:15 → 80:20 → 75:25 → 70:30 → 60:40 and 0:100, v/v), and the early eluate (57 mg) with H2O/MeOH (70:30, v/
v) was purified by preparative HPLC with solvent IV to afford hirtellin T2 (6) (7.55 mg) and nilotinin T1 (5) (16.6 mg). The MCIfrs 301− 471 (496 mg), eluted with H2O/MeOH (75:25, v/v), were subjected to a Sephadex LH-20 column (1.1 i.d. × 37 cm) with EtOH/H2O (70:30, v/v), EtOH−H2O (70:30, v/v)/acetone/H2O (70:30, v/v) (90:10 → 80:20, v/v), and acetone/H2O (70:30, v/v), and the crude tannins (32 mg) in the EtOH/H2O (70:30, v/v) eluate yielded hirtellin C (11) (7 mg) upon preparative HPLC purification with solvent II. The early eluate with EtOH/H2O (70:30, v/v)/acetone/ H2O (70:30, v/v) (90:10, v/v) (88.7 mg) from the Sephadex column was dissolved in MeOH. Tamarixinin B (8) (29 mg) was obtained as an MeOH-insoluble fraction, whereas the MeOH-soluble fraction was purified by preparative HPLC with solvent IV and yielded additional
crops of tamarixinin B (8) (10 mg) and nilotinin T1 (5) (9.3 mg). The MCIfrs 523−572 (72 mg), eluted with H2O/MeOH (60:40, v/v), were rechromatographed over an MCI-gel CHP-20P column (1.1 i.d.× 21 cm) with H2O and H2O/MeOH (70:30 → 60:40 and 0:100, v/v). Preparative HPLC purification of the eluate with H2O/MeOH(60:40, v/v) (17 mg) with solvent V afforded tamarixinin C (9) (5.7
mg).Nilotinin M5 (1): off-white, amorphous powder; [α]26D +23.6 (c 1.0,MeOH); UV (MeOH) λmax (log ε) 218.5 (5.05), 270 (4.7); CD(MeOH) [θ] (nm) [θ] +0.75 × 105 (236), −1.8 × 104 (265), +1.3 ×104 (285); 1H NMR (acetone-d6/D2O, 9:1, 600 MHz) δH 7.21 (1H, d,J = 1.8 Hz, DHDG H-6), 7.06 (1H, s, DHDG H-6′), 6.96 [2H, s,isoDHDG (H-2/H-6)], 6.93 [2H, s, galloyl (H-2/H-6)], 6.89 (1H, s, isoDHDG H-6′), 6.58 (1H, s, HHDP H-3), 6.51 (1H, s, HHDP H-3′),6.46 (1H, d, J = 1.8 Hz, DHDG H-2), and glucose protons (Table 1); 13C NMR assignments, see Tables 2 and 3; FABMS m/z 1297 [M +Na]+ ; HRESIMS m/z 1297.10358 [M + Na]+ (calcd for C55H38O36 Na, 1297.10350).Nilotinin M6 (2): off-white, amorphous powder; [α]18D +20.5 (c 1.0,MeOH); UV (MeOH) λmax (log ε) 218.5 (5.43), 264 (5.04); CD(MeOH) [θ] (nm) +1.5 × 105 (236), −7.6 × 104 (262), +4.8 × 104(286); 1H NMR (acetone-d6/D2O, 9:1) δH 7.06, 6.99 [each 2H, s,isoDHDG (H-2/H-6) × 2], 6.97 [2H, s, galloyl (H-2/H-6)], 6.87,6.84 [each 1H, s, isoDHDG (H-6′) × 2], 6.60 (1H, s, HHDP H-3),6.49 (1H, s, HHDP H-3′), and glucose protons (Table 1); 13C NMR assignments, see Tables 2 and 3; HRESIMS m/z 1297.10145 [M +
Na]+ (calcd for C55H38O36Na, 1297.10351).Nilotinin M7 (3): off-white, amorphous powder; [α]25D +21.4 (c 1.0,MeOH); UV (MeOH) λmax (log ε) 217.5 (5.11), 274 (4.74); CD(MeOH) [θ] (nm) +1.1 × 105 (237), −3.3 × 104 (262), +2.3 × 104(283); 1H NMR (acetone-d6/D2O, 9:1) δH 7.07 [2H, s, galloyl-A (H-2/H-6)], 6.968, [2H, s, isoDHDG (H-2/H-6)], 6.965 [2H, s, galloyl-B(H-2/H-6)], 6.81 (1H, s, isoDHDG H-6′), 6.60 (1H, s, HHDP H-3),6.48 (1H, s, HHDP H-3′), and glucose protons (Table 1); 13C NMR assignments, see Tables 2 and 3; FABMS m/z 1229 [M + Na]+; HRESIMS m/z 1129.09566 [M + Na]+ (calcd for C48H34O31Na, 1129.09763). Nilotinin D10 (4): off-white, amorphous powder; [α] 27D +53.1 (c1.0, MeOH); UV (MeOH) λmax (log ε) 218.5 (5.43), 277 (5.08); CD (MeOH) [θ] (nm) +0.9 × 105 (238), −1.6 × 104 (266), +2.6 × 104 (291); 1H NMR (acetone-d6/D2O, 9:1) δH 7.13, 6.95 [each 1H, d, J =1.8 Hz, (DHDG H-6) × 2], 7.06, 7.02 [each 1H, s, (DHDG H-6′) ×2], 7.03, 6.948, 6.92 [each 2H, s, galloyl (H-2/H-6) × 3], 6.58 (1H, s,HHDP H-3), 6.51 (1H, s, HHDP H-3′), 6.37, 6.31 [each 1H, d, J =1.8 Hz, (DHDG H-2) × 2], and glucose protons (Table 1); 13C NMRassignments, see Tables 2 and 3; FABMS m/z 1763 [M + Na]+;HRESIMS m/z 1763.17637 [M + Na]+ (calcd for C75H56O49 Na,1763.17824).Nilotinin T1 (5): off-white, amorphous powder; [α]
31D −5.8 (c 1.0,MeOH); UV (MeOH) λmax (log ε) 218 (5.63), 274.5 (5.28); CD(MeOH) [θ] (nm) +4.2 × 105 (235), −1.9 × 105 (262), +1.2 × 105(286); 1H NMR (acetone-d6/D2O, 9:1) δH 7.15, 6.99 [each 1H, s,(DHDG H-6′) × 2], 7.04, 6.81 [each 1H, br s, (DHDG H-6) × 2],6.48 and 6.44 [each 1H, br s, (DHDG H-2) × 2], 6.97 (2H, br s,isoDHDG H-2/H-6), 6.76 (1H, br s, isoDHDG H-6′), 7.09, 6.972,
and 6.968 [each 2H, s, galloyl (H-2/H-6) × 3], 6.62, 6.60, and 6.58[each 1H, s, HHDP (H-3′) × 3], 6.53, 6.52, 6.51 [each 1H, s, HHDP(H-3) × 3], and glucose protons (Table 1); 13C NMR assignments,see Tables 2 and 3; HRESIMS m/z 2831.24916 [M + Na]+ (calcd for
C123H84O78Na, 2831.24989).Chemical Conversion of Nilotinin M7 (3) into Remurin

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สกัดและแยก Air-dried ผงใบไม้ (1 กิโลกรัม) ถูก homogenized เป็นกลุ่มใน H2O/อะ ซีโตน (30:70, v/v, 22 L) ที่อุณหภูมิห้อง Homogenate กรองเข้มข้นใน vacuo ไป 1.5 L ที่อุณหภูมิไม่เกิน 40 องศาเซลเซียส Homogenate เข้มข้นใช้เป็น Diaion HP-20 (ประชาชน 5 × 50 ซม.) คอลัมน์ และ eluted กับ H2O ทา นอ/H2O (40:60, v/v), ทานอ อะซิ โตน ติด ๆ กัน ให้ H2O ที่สอดคล้องกัน (116 กรัม), H2O ทานอ (40:60) (52 กรัม), ทานอ (12.4 กรัม), และเศษ ส่วนอะซีโตน (0.629 กรัม) ตามลำดับ ส่วนเกี่ยวข้องถูกแบ่ง โดยการตรวจสอบปกติ และกลับเฟส HPLC ทา นอ/H2O (40:60, v/v) เศษส่วน (52 กรัม) ถูกแบ่งออกเป็นสองส่วนเท่ากัน (26 กรัมละ) แต่ละส่วนถูกแยกต่างหากภายใต้คอลัมน์ (หยาบ) Toyopearl HW-40 (2.2 i.d.× ซม. 65) และ eluted กับ EtOH/H2O (คนละครึ่ง→ 70:30, v/v), EtOH/H2O (70:30, v/v) อะซี โตน/H2O (70:30, v/v) (→ 90:10 → 80:20 →70:30 คนละครึ่ง v/v), และอะซี โตน/H2O (70:30, v/v), ติด ๆ กัน รวบรวมเศษ 500 mL ส่วนที่เกี่ยวข้องจากคอลัมน์ Toyopearl ทั้งสองถูกรวมเป็น fractions(T1−7) Toyopearl (T1) 7 T1 เศษส่วน 3 (6.12 กรัม), eluted กับ EtOH/H2O (70:30, v/v) / อะซี โตน/H2O (70:30, v/v) (90:10, v/v), ภายใต้คอลัมน์เดียวกัน Toyopearl (หยาบ) และ eluted กับ EtOH/H2O (70:30, v/v),EtOH/H2O (70:30, v/v) อะซี โตน/H2O (70:30, v/v) (90:10), อะซิ โตน/H2O (70:30, v/v), และติด ๆ กัน รวบรวมเศษส่วนปล่อย 900, 700 เศษ Toyopearl (T2) ให้ 158−183 เศษส่วน T2 (322 มิลลิกรัม), eluted กับ EtOH/H2O (70:30, v/v) MCIgel ถูกต้องคอลัมน์ CHP - 20P (1.1 ประชาชน× 35 cm) กับ H2O H2O/MeOH(85:15 → 80:20 → 75:25 → 70:30 and 0:100, v/v) H2O−MeOH (80:20, v/v) eluate (31 มิลลิกรัม) มี rechromatographed ผ่านคอลัมน์ที่มี MCI เจ CHP - 20 P (1.1 ประชาชน× 21 cm) กับ H2O H2O/ทา นอ (85:15 → 80:20 และ 0:100, v/v) การฟอก HPLC preparative ด้วยตัวทำละลายฉัน eluate สายกับ H2O/ทา นอ (85:15, v/v) (มก. 7) หาความบริสุทธิ์อย่าง nilotinin M5 (1) (2.1 มิลลิกรัม) Rechromatography ของ H2O/ทา นอ (80:20, v/v) eluate (63 มิลลิกรัม) ผ่านคอลัมน์ MCI เจ CHP - 20 P เดียวกัน และ elution รูปแบบเดียวกันนี่ eluate H2O/ทา นอ (75:25, v/v) (19.8 มิลลิกรัม), ซึ่งเมื่อ preparative HPLC ฟอกด้วยตัวทำละลาย II ให้ nilotinin D10 (4) (4.5 mg) 184−210 เศษส่วน T2 (297 มิลลิกรัม), eluted กับ EtOH/H2O (70:30, v/v) มีคอลัมน์ MCI เจ CHP - 20 P (1.1 ประชาชน× 35 cm) กับ H2O H2O/ทา นอ (85:15 → 80:20 → 75:25 → 70:30 และ 0:100, v/v) ถูกต้อง Eluate ต้นกับ H2O/ทา นอ (80:20, v/v) (33.7 มิลลิกรัม) มี rechromatographed ผ่านคอลัมน์ที่มี MCI เจ CHP - 20 P (1.1i.d ×ซม. 21) isocratically กับ H2O/ทา นอ (85:15, v/v), ตาม ด้วย preparative HPLC ฟอกของ eluate (21 มิลลิกรัม) กับตัวทำละลาย IIaffording บริสุทธิ์ตัวอย่างเพิ่มเติม (8.2 มิลลิกรัม) ของ nilotinin M5 (1) Eluate สาย (30 มิลลิกรัม) กับ H2O/ทา นอ (80:20, v/v) ที่ยัง rechromatographed ผ่านคอลัมน์ที่มี MCI เจ CHP - 20 P (1.1 ประชาชนซื้อ21 ซม) H2O H2O/ทา นอ (90:10 → 85:15 → 80:20 → 75:25 และ 0:100, v/v), และ preparative HPLC ฟอกของ H2O / eluate ทานอ (75:25, v/v) (55 มิลลิกรัม) กับตัวทำละลาย II ผล nilotininM7 (3) (9.0 mg) 211−264 เศษส่วน T2 (555 mg), eluted กับ EtOH/H2O (70:30, v/v) คอลัมน์ที่มี MCI เจ CHP - 20 P ถูกต้อง (1.1 ประชาชน× 37 ซม.) กับ H2O H2O/ทา นอ (90:10 →85:15 → 80:20 → 75:25 →70:30 และ 0:100, v/v) Eluate ปลายกับ H2O/ทา นอ (80:20, v/v) (43 มิลลิกรัม) กับ preparative HPLC ฟอกด้วยตัวทำละลาย II ผล nilotinin M6 (2) (7.2 มิลลิกรัม) T2 เศษ 265−318 (535 มิลลิกรัม), ต้น eluted กับ EtOH/H2O (70:30, v/v) อะซี โตน/H2O (70:30, v/v) (90:10, v/v), คอลัมน์ที่มี MCI เจ CHP - 20 P ถูกต้อง (1.1 ประชาชน× 37 ซม.) กับ H2O H2O /ทานอ (90:10 → 85:15 → 80:20 → 75:25 →70:30 และ 0:100, v/v), และ eluate สายกับ H2O/ทา นอ (75:25, v/v) (59 มิลลิกรัม) มี rechromatographed กว่าคอลัมน์เดียวกันกับ H2O/ทา นอ (80:20→ 75:25 → 70:30 และ 0:100, v/v) Eluate (42.0 มิลลิกรัม) กับ H2O/ทา นอ (75:25 และ 70:30, v/v) ถูกยัดเยียดให้ preparative HPLC ฟอกด้วยตัวทำละลาย III ให้ nilotinin D9 (10) (5.4 มิลลิกรัม) และhirtellin F (6.3 มิลลิกรัม), ตามลำดับ ส่วน (3.6 g) ของเศษส่วน T1 (4.6 g), 5 eluted กับ EtOH−H2O(70:30, v/v)/อะ ซี โตน/H2O (70:30, v/v) (70:30, v/v), ถูก rechromatographed Toyopearl HW-40 คอลัมน์ (หยาบ) (2.2 ประชาชน× 45 ซม.) กับ EtOH/H2O (70:30, v/v) อะซี โตน/H2O (70:30, v/v) (90:10 →80:20 → 70:30, v/v), ติด ๆ กัน Eluate (1.4 กรัม) กับ EtOH/H2O (70:30, v/v) อะซี โตน/H2O (70:30, v/v) (80:20) ถูกยัดเยียดให้คอลัมน์ที่มี MCI เจ CHP - 20 P (1.1 ประชาชนซื้อ 36 ซม) กับ H2O H2O / ทานอ (95:5 → 90:10 → 85:15 → 80:20 → 75:25 → 70:30 → 60:40 และ 0:100, v/v), ผลผลิต 600 เศษ MCI (MCIfrs, 600 หยด) MCIfrs 11−60 (159 มิลลิกรัม) และ MCIfrs 61−195 (235 มิลลิกรัม), eluted กับ H2O/ทา นอ (85:15, v/v) rechromatographed ถูกแยกผ่านคอลัมน์ Sephadex LH 20 (ประชาชน 2.2 × 21 cm) กับ EtOH/H2O (70:30, v/v), EtOH/H2O (70:30, v/v) อะซี โตน/H2O (70:30, v/v) (90:10, v/v), และอะซี โตน/H2O (70:30, v/v), และน้ำมัน tannins (69 mg) ใน eluate กับ H2O EtOH (70:30 , v/v) อะซี โตน/H2O (70:30, v/v) (90:10, v/v) จากคอลัมน์เหล่านี้ Sephadexหา hirtellin T2 (6) (15.2 มิลลิกรัม) เมื่อ purificationwith preparative HPLC หรือสารทำละลายดาว ตามลำดับ MCIfrs 196−300 (268 mg), eluted กับ H2O/ทา นอ (80:20, v/v) คอลัมน์ที่มี MCI เจ CHP - 20 P ถูกต้อง (1.1 ประชาชน× 37 ซม.) H2O H2O/ทา นอ (95:5 → 90:10 → 85:15 → 80:20 → 75:25 → 70:30 → 60:40 และ 0:100, v/v), และ eluate ต้น (57 มิลลิกรัม) กับ H2O/ทา นอ (70:30, v /v) ที่บริสุทธิ์ โดย preparative HPLC กับ IV เป็นตัวทำละลายจะสามารถ hirtellin T2 (6) (7.55 มิลลิกรัม) และ nilotinin T1 (5) (16.6 มิลลิกรัม) MCIfrs 301− 471 (496 มิลลิกรัม), eluted กับ H2O/ทา นอ (75:25, v/v), ถูกต้องคอลัมน์ Sephadex LH 20 (1.1 ประชาชน× 37 ซม.) กับ EtOH/H2O (70:30, v/v), EtOH−H2O (70:30, v/v) อะซี โตน/H2O (70:30, v/v) (90:10 → 80:20, v/v), และอะซี โตน/H2O (70:30, v/v), และน้ำมัน tannins (32 มิลลิกรัม) ในการ EtOH/H2O (70:30 , v/v) eluate ผล hirtellin C (11) (7 mg) เมื่อ preparative HPLC ฟอกกับ II เป็นตัวทำละลาย ในช่วง eluate กับ /acetone/ EtOH/H2O (70:30, v/v) H2O (70:30, v/v) (90:10, v/v) (88.7 mg) จาก Sephadex คอลัมน์ถูกละลายในทานอ B Tamarixinin (8) (29 มิลลิกรัม) กล่าวเป็นเศษส่วนไม่ละลายทานอ ในขณะที่เศษทานอละลายบริสุทธิ์ โดย preparative HPLC กับ IV เป็นตัวทำละลาย และหาเพิ่มเติมพืช tamarixinin B (8) (10 มิลลิกรัม) และ nilotinin T1 (5) (9.3 มิลลิกรัม) MCIfrs 523−572 (72 มิลลิกรัม), eluted กับ H2O/ทา นอ (60:40, v/v) มี rechromatographed ผ่านคอลัมน์ที่มี MCI เจ CHP - 20 P (1.1 i.d.× 21 cm) กับ H2O H2O/ทา นอ (70:30 → 60:40 และ 0:100, v/v) Preparative HPLC ฟอกของ eluate กับ H2O/MeOH(60:40, v/v) (17 มิลลิกรัม) กับตัวทำละลาย V นี่ tamarixinin C (9) (5.7mg) Nilotinin M5 (1): ผงสีขาว ไป [ด้วยกองทัพ] 26D (c 1.0 ทานอ); +23.6 Λmax UV (ทานอล (ล็อกε) 218.5 (5.05) 270 (4.7); CD(MeOH) [θ] (nm) [θ] +0.75 × 105 (236), −1.8 × 104 (265), +1.3 × 104 (285); ΔH 1H NMR (อะซีโตน-d6/D2O, 9:1, 600 MHz) 7.21 (1H, d, J = 1.8 เฮิร์ตซ์ DHDG H-6), 7.06 (1H, s, DHDG H-6′), 6.96 [2H, s, isoDHDG (H-2/H-6)], 6.93 [2H, s, galloyl (H-2/H-6)], 6.89 (1H, s, isoDHDG H-6′) 6.58 (1H, s, HHDP H-3), 6.51 (1H, s, HHDP H-3′), 6.46 (1H, d, J = 1.8 เฮิร์ตซ์ DHDG H-2), และกลูโคสโปรตอน (ตาราง 1); กำหนด 13C NMR ดูตารางที่ 2 และ 3 FABMS m/z 1297 [M + นา] +; HRESIMS m/z 1297.10358 [M + นา] + (ปีสำหรับนา C55H38O36, 1297.10350) Nilotinin M6 (2): ผงสีขาว ไป [ด้วยกองทัพ] 18D (c 1.0 ทานอ); +20.5 Λmax UV (ทานอล (ล็อกε) 218.5 (5.43) 264 (5.04); CD(MeOH) [θ] (nm) + 1.5 × 105 (236), −7.6 × 104 (262), +4.8 × 104(286) 1H NMR (อะซีโตน-d6/D2O, 9:1) δH 7.06, 6.99 [ละ 2H, s, isoDHDG (H-2/H-6 × 2], 6.97 [2H, s, galloyl (H-2/H-6)], 6.87,6.84 [ละ 1H, s, isoDHDG (H 6′) × 2], 6.60 (1H, s, HHDP H-3), 6.49 (1H, s, HHDP H-3′), และกลูโคสโปรตอน (ตาราง 1); กำหนด 13C NMR ดูตารางที่ 2 และ 3 HRESIMS m/z 1297.10145 [M +นา] + (ปีสำหรับ C55H38O36Na, 1297.10351) Nilotinin M7 (3): ผงสีขาว ไป [ด้วยกองทัพ] 25D (c 1.0 ทานอ); +21.4 Λmax UV (ทานอล (ล็อกε) 217.5 (5.11) 274 (4.74); CD(MeOH) [θ] (nm) +1.1 × 105 (237), −3.3 × 104 (262), +2.3 × 104(283) 1H NMR (อะซีโตน-d6/D2O, 9:1) δH 7.07 [2H, s, galloyl A (H-2/H-6)], 6.968, [2H, s, isoDHDG (H-2/H-6)], 6.965 [2H, s, galloyl-B(H-2/H-6)], 6.81 (1H, s, isoDHDG H-6′) 6.60 (1H, s, HHDP H-3), 6.48 (1H, s, HHDP H-3′), และกลูโคสโปรตอน (ตาราง 1); กำหนด 13C NMR ดูตารางที่ 2 และ 3 FABMS m/z 1229 [M + นา] +; HRESIMS m/z 1129.09566 [M + นา] + (ปีสำหรับ C48H34O31Na, 1129.09763) Nilotinin D10 (4): ผงสีขาว ไป [ด้วยกองทัพ] 27D +53.1 (c1.0 ทานอ); Λmax UV (ทานอล (ล็อกε) 218.5 (5.43) 277 (5.08); ซี (ทานอล [θ] (nm) (238), 105 × +0.9 × −1.6 104 (266), +2.6 × 104 (291); 1H NMR (อะซีโตน-d6/D2O, 9:1) δH 7.13, 6.95 [ละ 1H, d, J = 1.8 เฮิร์ตซ์, (DHDG H-6) × 2], 7.06, 7.02 [ละ 1H, s ฟิลด์ (DHDG H-6′) 2], 7.03, 6.948, 6.92 [ละ 2H, s, galloyl (H-2/H-6 × 3], 6.58 (1H, s, HHDP H-3), 6.51 (1H, s, HHDP H-3′), 6.37, 6.31 [ละ 1H, d, J = 1.8 เฮิร์ตซ์ ฟิลด์ (DHDG H-2) 2], และกลูโคสโปรตอน (ตาราง 1); 13 C NMRassignments ดูตารางที่ 2 และ 3 FABMS m/z 1763 [M + นา] +; HRESIMS m/z 1763.17637 [M + นา] + (ปีสำหรับนา C75H56O49, 1763.17824) Nilotinin T1 (5): ผงสีขาว ไป [ด้วยกองทัพ]−5.8 31D (c 1.0 ทานอ); Λmax UV (ทานอล (ล็อกε) 218 (5.63) 274.5 (5.28); CD(MeOH) [θ] (nm) +4.2 × 105 (235), −1.9 × 105 (262), +1.2 × 105(286) 1H NMR (อะซีโตน-d6/D2O, 9:1) δH 7.15, 6.99 [ละ 1H, s ฟิลด์ (DHDG H-6′) 2], 7.04, 6.81 [ละ 1H, s ห้อง × (DHDG H-6) 2], 6.48 และ 6.44 [ละ 1H, s ห้อง × (DHDG H-2) 2], 6.97 (2H, br s, isoDHDG H-2/H-6), 6.76 (1H, br s, isoDHDG H-6′), 7.09, 6.9726.968 [ละ 2H, s, galloyl (H-2/H-6 × 3], และ 6.62, 6.60 และ 6.58 [ละ 1 H, s, HHDP (H 3′) × 3], 6.53, 6.52, 6.51 [ละ 1H, s, HHDP(H-3) × 3], และกลูโคสโปรตอน (ตาราง 1); กำหนด 13C NMR ดูตารางที่ 2 และ 3 HRESIMS m/z 2831.24916 [M + นา] + (ปีสำหรับC123H84O78Na, 2831.24989) แปลงทางเคมีของ Nilotinin M7 (3) เป็น Remurin

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การสกัดและการแยก อากาศแห้ง, ผงใบ (1 กิโลกรัม) ถูกปั่นใน H2O / อะซิโตน (30:70, ปริมาตร / ปริมาตร 22 ลิตร) ที่อุณหภูมิห้อง homogenate กรองเข้มข้นในสุญญากาศ 1.5 ลิตรที่อุณหภูมิไม่เกิน 40 องศาเซลเซียส homogenate เข้มข้นถูกนำไปใช้กับ Diaion HP-20 (5 รหัส× 50 ซม.) และคอลัมน์ชะกับ H2O, เมธานอล / H2O (40:60, v / v), เมธานอลและอะซีโตนอย่างต่อเนื่องเพื่อให้สอดคล้อง H2O ( 116 กรัม), เมธานอล / H2O (40:60) (52 กรัม), เมธานอล (12.4 กรัม) และอะซีโตน (0.629 กรัม) เศษส่วนตามลำดับ โดยเศษที่เกี่ยวข้องได้รับการตรวจสอบ fractionated โดยจำหน่ายทั่วไปกลับเฟส HPLC เมธานอล / H2O (40:60, v / v) ส่วน (52 กรัม) แบ่งออกเป็นสองส่วนเท่ากัน (26 กรัม) แต่ละส่วนก็ถูกแยกไป Toyopearl HW-40 (หยาบ) คอลัมน์ (2.2 รหัส× 65 ซม.) และชะด้วย EtOH / H2O (50:50 → 70:30, v / v), EtOH / H2O (70:30, v / v) / อะซิโตน / H2O (70:30, v / v) (90:10 80:20 →→ 70: 30 → 50:50 v / v) และอะซีโตน / H2O (70:30, v / โวลต์) อย่างต่อเนื่องเก็บ 500 มิลลิลิตรเศษส่วน โดยเศษที่สอดคล้องกันจากทั้งคอลัมน์ Toyopearl ถูกรวมกันเป็นเจ็ด Toyopearl (T1) เศษส่วน (T1-7) ส่วนห้อง T1 3 (6.12 กรัม) ชะด้วย EtOH / H2O (70:30, v / v) / อะซิโตน / H2O ( 70:30, v / v) (90:10, v / v) ได้รับภายใต้ Toyopearl เดียวกัน (หยาบ) และคอลัมน์ชะด้วย EtOH / H2O (70:30, v / v),
EtOH / H2O (70: 30 v / v) / อะซิโตน / H2O (70:30, v / v) (90:10) และอะซีโตน / H2O (70:30, v / v) อย่างต่อเนื่องการจัดเก็บภาษีลดลง 900 เศษส่วนเพื่อให้ 700 Toyopearl (T2) เศษส่วน โดยเศษ T2 158-183 (322 มก.) ชะด้วย EtOH / H2O (70:30, v / v) ถูกยัดเยียดไปยัง MCIgel
คอลัมน์ CHP-20P (1.1 รหัส× 35 ซม.) กับ H2O H2O และ / เมธานอล (85 : 15 →→ 80:20 75:25 70:30 →และ 0: 100 v / v) H2O-เมธานอล (80:20, v / v) eluate (31 มก.) ได้รับการ rechromatographed กว่าเเมเจลคอลัมน์ CHP-20P (1.1 รหัส× 21 ซม.) กับ H2O H2O และ / เมธานอล (85:15 80:20 → และ 0: 100 v / v) บริสุทธิ์ HPLC เพื่อเตรียมกับ I ตัวทำละลายของ eluate ปลายกับ H2O / เมธานอล (85:15, v / v) (7 มก.) ให้ผลตัวอย่างบริสุทธิ์ nilotinin M5 (1) (2.1 มก.) Rechromatography ของ H2O / เมธานอล (80:20, v / v) eluate (63 มก.) ในช่วงเดียวกันเเมเจลคอลัมน์ CHP-20P และรูปแบบการชะเดียวกันอึด H2O / เมธานอล (75:25, v / v) eluate (19.8 มก.) ซึ่งเมื่อฟอก HPLC เตรียมด้วยตัวทำละลายที่สองให้ nilotinin D10 (4) (4.5 มก.) โดยเศษ T2 184-210 (297 มก.) ชะด้วย EtOH / H2O (70: 30, v / v) ถูกยัดเยียดให้กับเเมเจลคอลัมน์ CHP-20P (1.1 × 35 ซมรหัส) กับ H2O H2O และ / เมธานอล ( 85:15 80:20 →→→ 75:25 70:30 และ 0: 100 v / v) eluate ต้นกับ H2O / เมธานอล (80:20, v / v) (33.7mg) ถูก rechromatographed กว่าเเมเจลคอลัมน์ CHP-20P (1.1id × 21 ซม.) isocratically กับ H2O / เมธานอล (85:15, v / โวลต์) ตามด้วยการทำให้บริสุทธิ์ HPLC เตรียมของ eluate นี้ (21 มก.)
ที่มีตัวทำละลายที่สองเจตนารมณ์ตัวอย่างบริสุทธิ์เพิ่มเติม(8.2 มก.) ของ nilotinin M5 (1) eluate ปลาย (30 มก.) กับ H2O / เมธานอล (80:20, v / v) ถูก rechromatographed ยังมากกว่า MCI เจลคอลัมน์ CHP-20P (1.1 รหัส×
21 ซม.) กับ H2O H2O และ / เมธานอล (90:10 → 85:15 →→ 80:20 75:25 และ 0: 100 v / v) และการทำให้บริสุทธิ์ HPLC เตรียมของ H2O / เมธานอล (75:25, v / v) eluate (55 มก.) ครั้งที่สองที่มีตัวทำละลายให้ผล nilotinin
M7 (3) (9.0 มก.) โดยเศษ T2 211-264 (555 มก.) ชะด้วย EtOH / H2O (70:30, v / v) ถูกยัดเยียดให้กับเเมเจลคอลัมน์ CHP-20P (1.1 รหัส× 37 ซม.) กับ H2O H2O และ / เมธานอล (90:10 → 85: 15 → 80:20 75:25 →→ 70: 30 และ 0: 100 v / v) eluate ปลายกับ H2O / เมธานอล (80:20, v / v) (43 มก.) ที่มีการเตรียมการทำให้บริสุทธิ์ HPLC กับตัวทำละลายที่สองผล nilotinin M6 (2) (7.2 มก.) เศษส่วน T2 265-318 (535 มก.) ชะต้นด้วย EtOH / H2O (70: 30, v / v) / อะซิโตน / H2O (70:30, v / v) (90:10, v / v) เป็น ภายใต้ไปยังเเมเจลคอลัมน์ CHP-20P (1.1 รหัส× 37 ซม.) กับ H2O H2O และ /
เมธานอล (90:10 →→ 85:15 80:20 75:25 →→ 70: 30 และ 0: 100 v / โวลต์) และ eluate ปลายกับ H2O / เมธานอล (75:25, v / v) (59 มก.) ได้รับการ rechromatographed กว่าคอลัมน์เดียวกันกับ H2O / เมธานอล (80: 20 →→ 75:25 70:30 และ 0: 100 , v / v) eluate (42.0 มก.) กับ H2O / เมธานอล (75:25 และ 70:30, v / v) ได้ภายใต้การฟอก HPLC เตรียมด้วยตัวทำละลายที่สามที่จะให้ผลผลิต nilotinin D9 (10) (5.4 มก.) และ
hirtellin F (6.3 มก.) ส่วน respectively.A (3.6 กรัม) ส่วน T1 5 (4.6 กรัม) ชะด้วย EtOH-H2O (70:30, v / v) / อะซิโตน / H2O (70:30, v / v) (70:30 , v / v) ถูก rechromatographed บน Toyopearl HW-40 (หยาบ) คอลัมน์ (2.2 รหัส× 45 ซม.) ด้วย EtOH / H2O (70:30, v / v) / อะซิโตน / H2O (70:30, ปริมาตร / ปริมาตร ) (90:10 → 80: 20 → 70:30, v / v) อย่างต่อเนื่อง eluate (1.4g) ด้วย EtOH / H2O (70:30, v / v) / อะซิโตน / H2O (70:30, v / v) (80:20) ถูกยัดเยียดให้กับเเมเจลคอลัมน์ CHP-20P (1.1 รหัส× 36 ซม.) กับ H2O H2O และ / เมธานอล (95: 5 →→ 90:10 85:15 80:20 →→→ 75:25 70:30 60:40 →และ 0: 100 v / v) ยอม 600 เศษส่วน MCI (MCIfrs 600 ลดลงในแต่ละ) MCIfrs 11-60 (159 มิลลิกรัม) และ MCIfrs 61-195 (235 มก.) ชะกับ H2O / เมธานอล (85:15, v / v) ถูกแยก rechromatographed กว่า Sephadex LH-20 คอลัมน์ (2.2 × 21 รหัส เซนติเมตร) ด้วย EtOH / H2O (70:30, v / v), EtOH / H2O (70:30, v / v) / อะซิโตน / H2O (70:30, v / v) (90:10, v / v) และอะซีโตน / H2O (70:30, v / v) และแทนนินดิบ (69 มก.) ใน eluate ด้วย EtOH / H2O (70:30, v / v) / อะซิโตน / H2O (70:30, v / โวลต์) (90:10, v / v) จากคอลัมน์เหล่านี้ Sephadex
ผล hirtellin T2 (6) (15.2 มก.) เมื่อ HPLC ตัวทำละลาย purificationwith เตรียม I และ II ตามลำดับ MCIfrs 196-300 (268 มก.) ชะกับ H2O / เมธานอล (80:20, v / v) ถูกยัดเยียดให้กับเเมเจลคอลัมน์ CHP-20P (1.1 รหัส× 37 ซม.) กับ H2O H2O และ / เมธานอล ( 95: 5 →→ 85:15 90:10 80:20 →→→ 75:25 70:30 60:40 →และ 0: 100 v / v) และ eluate ต้น (57 มก.) กับ H2O / เมธานอล ( 70:30, v /
V) บริสุทธิ์โดยวิธี HPLC เตรียม IV ที่มีตัวทำละลายที่จะจ่าย hirtellin T2 (6) (7.55 มก.) และ nilotinin T1 (5) (16.6 มก.) MCIfrs 301- 471 (496 มก.) ชะกับ H2O / เมธานอล (75:25, v / v) ถูกยัดเยียดให้ Sephadex LH-20 คอลัมน์ (1.1 รหัส× 37 ซม.) ด้วย EtOH / H2O (70:30, v / v), EtOH-H2O (70:30, v / v) / อะซิโตน / H2O (70:30, v / v) (90:10 → 80:20, v / v) และอะซีโตน / H2O (70 : 30, v / v) และแทนนินดิบ (32 มก.) ใน EtOH / H2O (70:30, v / v) eluate ผล hirtellin C (11) (7 มก.) เมื่อฟอก HPLC เตรียมด้วยตัวทำละลายที่สอง eluate ต้นด้วย EtOH / H2O (70:30, v / v) / อะซิโตน / H2O (70:30, v / v) (90:10, v / v) (88.7 มก.) จากคอลัมน์ Sephadex ถูกละลายในเมธานอล . Tamarixinin B (8) (29 มก.) ที่ได้รับในฐานะที่เป็นส่วนเมธานอลที่ไม่ละลายในขณะที่ส่วนเมธานอลที่ละลายบริสุทธิ์โดยวิธี HPLC เตรียมกับ IV ทำละลายและผลเพิ่มเติมพืช tamarixinin B (8) (10 มก.) และ nilotinin T1 ( 5) (9.3 มก.)
MCIfrs 523-572 (72 มก.) ชะกับ H2O / เมธานอล (60:40, v / v) ถูก rechromatographed กว่าเเมเจลคอลัมน์ CHP-20P (1.1 รหัส× 21 ซม.) กับ H2O H2O และ / เมธานอล ( 70:30 → 60:40 และ 0: 100 v / v) การทำให้บริสุทธิ์เตรียม HPLC ของ eluate กับ H2O / เมธานอล (60:40, v / v) (17 มก.) ที่มีตัวทำละลาย V อึด tamarixinin C (9) (5.7
มก.) .Nilotinin M5 (1): สีขาว, ผงป่น; [α] 26D 23.6 (ค 1.0 เมธานอล); รังสียูวี (เมธานอล) λmax (log ε) 218.5 (5.05), 270 (4.7); ซีดี (เมธานอล) [θ] (นาโนเมตร) [θ] 0.75 × 105 (236) -1.8 × 104 (265) 1.3 × 104 (285) 1H NMR (อะซิโตน-d6 / D2O, 9: 1, 600 MHz) δH 7.21 (1H, D, J = 1.8 เฮิรตซ์ DHDG H-6), 7.06 (1H, S, DHDG H-6 ') 6.96 [2H , s, isoDHDG (H-2 / H-6)] 6.93 [2H, S, galloyl (H-2 / H-6)] 6.89 (1H, s, isoDHDG H-6 ') 6.58 (1H, s, HHDP H-3), 6.51 (1H, S, HHDP H-3 ') 6.46 (1H, D, J = 1.8 เฮิรตซ์ DHDG H-2) และโปรตอนกลูโคส (ตารางที่ 1); ที่ได้รับมอบหมาย 13C NMR โปรดดูตารางที่ 2 และ 3; FABMS เมตร / z 1297 [M + นา] +; HRESIMS เมตร / z 1297.10358 [M + นา] + (calcd สำหรับ C55H38O36 นา 1297.10350) .Nilotinin M6 (2): สีขาว, ผงป่น; [α] 18D 20.5 (ค 1.0 เมธานอล); รังสียูวี (เมธานอล) λmax (log ε) 218.5 (5.43), 264 (5.04); ซีดี (เมธานอล) [θ] (นาโนเมตร) 1.5 × 105 (236) -7.6 × 104 (262) 4.8 × 104 (286) 1H NMR (อะซิโตน-d6 / D2O, 9: 1) δH 7.06, 6.99 [แต่ละ 2H, s, isoDHDG (H-2 / H-6) × 2] 6.97 [2H, s, galloyl (H-2 / H -6)] 6.87,6.84 [แต่ละ 1H, s, isoDHDG (H-6) × 2], 6.60 (1H, s, HHDP H-3), 6.49 (1H, s, HHDP H-3 ') และโปรตอนกลูโคส (ตารางที่ 1); ที่ได้รับมอบหมาย 13C NMR โปรดดูตารางที่ 2 และ 3; HRESIMS เมตร / z 1297.10145 [M +
นา] + (calcd สำหรับ C55H38O36Na, 1297.10351) .Nilotinin M7 (3): สีขาว, ผงป่น; [α] 25D 21.4 (ค 1.0 เมธานอล); รังสียูวี (เมธานอล) λmax (log ε) 217.5 (5.11), 274 (4.74); ซีดี (เมธานอล) [θ] (นาโนเมตร) 1.1 × 105 (237) -3.3 × 104 (262) 2.3 × 104 (283) 1H NMR (อะซิโตน-d6 / D2O, 9: 1) δH 7.07 [2H, S, galloyl-A (H-2 / H-6)], 6.968, [2H, S, isoDHDG (H-2 / H-6 )] 6.965 [2H, S, galloyl-B (H-2 / H-6)] 6.81 (1H, s, isoDHDG H-6 ') 6.60 (1H, s, HHDP H-3), 6.48 ( 1H, S, HHDP H-3 ') และโปรตอนกลูโคส (ตารางที่ 1); ที่ได้รับมอบหมาย 13C NMR โปรดดูตารางที่ 2 และ 3; FABMS เมตร / z 1229 [M + นา] +; HRESIMS เมตร / z 1129.09566 [M + นา] + (calcd สำหรับ C48H34O31Na, 1129.09763) Nilotinin D10 (4): สีขาว, ผงป่น; [α] 27D 53.1 (c1.0, เมธานอล); รังสียูวี (เมธานอล) λmax (log ε) 218.5 (5.43), 277 (5.08); ซีดี (เมธานอล) [θ] (นาโนเมตร) 0.9 × 105 (238) -1.6 × 104 (266) 2.6 × 104 (291) 1H NMR (อะซิโตน-d6 / D2O, 9: 1) δH 7.13, 6.95 [แต่ละ 1H, D, J = 1.8 เฮิรตซ์ (DHDG H-6) × 2], 7.06, 7.02 [แต่ละ 1H, s (DHDG H -6) × 2], 7.03, 6.948, 6.92 [แต่ละ 2H, S, galloyl (H-2 / H-6) × 3], 6.58 (1H, s, HHDP H-3), 6.51 (1H, s , HHDP H-3 '), 6.37, 6.31 [แต่ละ 1H, D, J = 1.8 เฮิรตซ์ (DHDG H-2) × 2] และโปรตอนกลูโคส (ตารางที่ 1); 13C NMRassignments โปรดดูตารางที่ 2 และ 3; FABMS เมตร / z 1763 [M + นา] +; HRESIMS เมตร / z 1763.17637 [M + นา] + (calcd สำหรับ C75H56O49 นา 1763.17824) .Nilotinin T1 (5): สีขาว, ผงป่น; [α]
31D -5.8 (ค 1.0 เมธานอล); รังสียูวี (เมธานอล) λmax (log ε) 218 (5.63) 274.5 (5.28); ซีดี (เมธานอล) [θ] (นาโนเมตร) 4.2 × 105 (235) -1.9 × 105 (262) 1.2 × 105 (286) 1H NMR (อะซิโตน-d6 / D2O, 9: 1) δH 7.15, 6.99 [แต่ละ 1H, s (DHDG H-6) × 2], 7.04, 6.81 [แต่ละ 1H, s br (DHDG H-6) × 2], 6.48 และ 6.44 [แต่ละ 1H, s br (DHDG H-2) × 2], 6.97 (2H, s br, isoDHDG H-2 / H-6), 6.76 (1H, s br, isoDHDG H -6), 7.09, 6.972,
และ 6.968 [แต่ละ 2H, s, galloyl (H-2 / H-6) × 3], 6.62, 6.60 และ 6.58 [แต่ละ 1H, s, HHDP (H-3 ') × 3], 6.53, 6.52, 6.51 [แต่ละ 1H, S, HHDP (H-3) × 3] และโปรตอนกลูโคส (ตารางที่ 1); ที่ได้รับมอบหมาย 13C NMR โปรดดูตารางที่ 2 และ 3; HRESIMS เมตร / z 2831.24916 [M + นา] + (calcd สำหรับ
C123H84O78Na, 2831.24989) .Chemical แปลง Nilotinin M7 (3) ลง Remurin

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การสกัดและการแยก . เครื่องอบแห้ง , ใบผง ( 1 กก. ) ถูกบดใน H2O / อะซิโตน ( 30 : 70 , V / V , 22 ลิตร ) ที่อุณหภูมิห้อง กรองแยกคือความเข้มข้นใน vacuo 1.5 ลิตรที่อุณหภูมิไม่เกิน 40 องศา ปริมาณเข้มข้นใช้กับ diaion hp-20 ( 5 ไอดี× 50 ซม. ) และคอลัมน์ตัวอย่างกับ h2o , h2o ( ปริมาณ / 40 : 60 , V / V ) , ปริมาณ , และอะซีโตน อย่างต่อเนื่องให้ H2O ที่สอดคล้องกัน ( 116 กรัม ) , ปริมาณ / H2O ( 40 : 60 ) ( 55 กรัม ) , เมทิลแอลกอฮอล์ ( 12.4 กรัม ) และอะซิโตน ( 0.629 กรัม ) ส่วน ตามลำดับ เศษส่วนนั้นถูกพบโดยการตรวจสอบปกติและ reversed-phase HPLC . ส่วนปริมาณ / H2O ( 40 : 60 , V / V ) เศษส่วน ( 55 กรัม ) แบ่งออกเป็นสองส่วนเท่ากัน ( 26 กรัมแต่ละครั้ง ) แต่ละส่วนต่างต้อง toyopearl hw-40 ( หยาบ ) คอลัมน์ ( 2.2 บัตรประจำตัว× 65 ซม. ) และกลุ่มตัวอย่าง ( 50 / H2O → keyboard - key - name 2.5 V / V ) เอโตะ / H2O ( 70 : 30 , v / v ) / อะซิโตน / H2O ( 70 : 30 , v / v ) ( 80 : 20 กุมภา 50 รูป→ keyboard - key - name → keyboard - key - name → keyboard - key - name , v / v ) และอะซิโตน / H2O ( 70 : 30 , 5 / 5 ) อย่างต่อเนื่อง เก็บ 500 ml เศษส่วน เศษส่วนที่สอดคล้องกันทั้ง toyopearl คอลัมน์รวมเป็นเจ็ด toyopearl ( T1 ) เศษส่วน ( T1 − 7 ) T1 เศษ 3 ( 6.12 กรัม ) , ตัวอย่างกลุ่ม / H2O ( 70 : 30 ,v / v ) / อะซิโตน / H2O ( 70 : 30 , v / v ) ( รูป v / v ) อยู่ภายใต้การ toyopearl เดียวกัน ( หยาบ ) และกลุ่มคอลัมน์ตัวอย่าง / H2O ( 70 : 30 , v / v )
เอโตะ / H2O ( 70 : 30 , v / v ) / อะซิโตน / H2O ( 70 : 30 , v / v ) ( รูป ) และอะซิโตน / H2O ( 70 : 30 , v / v ) อย่างต่อเนื่องเก็บ 900 ลดเศษส่วนให้ 700 toyopearl ( T2 ) เศษส่วน โดย T2 เศษส่วน 158 − 183 ( 322 มิลลิกรัม ) ตัวอย่างกลุ่ม / H2O ( 70 : 30 , v / v )ได้รับการ mcigel
chp-20p คอลัมน์ ( 1.1 บัตรประจำตัว× 35 ซม. ) และปริมาณ h2o h2o / ( 85:15 → keyboard - key - name 80 → keyboard - key - name 5 → keyboard - key - name 70 : 30 และ 0 v / v ) h2o −เมทิลแอลกอฮอล์ ( 80 , V / V ) สารละลาย ( eluate ) ( 31 มิลลิกรัม ) คือ rechromatographed กว่ามิลลิคูรี เจล chp-20p คอลัมน์ ( 1.1 บัตรประจำตัว× 21 ซม. ) และปริมาณ h2o h2o / ( 85:15 → keyboard - key - name 80 : 20 0 v / v ) เป็นค่าบำบัดน้ำเสีย ด้วยตัวทำละลาย HPLC ของสารละลาย ( eluate ) สาย ( 85:15 h2o / ปริมาณ ,v / v ) ( 7 มก. ) เป็นตัวอย่างบริสุทธิ์ ของ nilotinin M5 ( 1 ) 2.1 มิลลิกรัม ) rechromatography ของ H2O / เมทิลแอลกอฮอล์ ( 80 , V / V ) สารละลาย ( eluate ) ( 63 มิลลิกรัม ) ผ่านคอลัมน์ MCI เจล chp-20p เดียวกันและรูปแบบเดียวกัน ( ช่วย H2O / เมทิลแอลกอฮอล์ ( 5 V / V ) สารละลาย ( eluate ) ( 19.8 มิลลิกรัม ) ซึ่งเมื่อค่าบำบัดน้ำเสียด้วยตัวทำละลาย HPLC 2 ให้ nilotinin D10 ( 4 ) 4.5 มิลลิกรัม ) โดย T2 เศษส่วน 184 − 210 ( มก. 297 ) ตัวอย่างกลุ่ม / H2O ( 70 :30 , V / V ) ได้ภายใต้การ MCI เจล chp-20p คอลัมน์ ( 1.1 บัตรประจำตัว× 35cm ) และปริมาณ h2o h2o / ( 85:15 → keyboard - key - name 80 → keyboard - key - name 5 → keyboard - key - name 70 : 30 และ 0 v / v ) ในสารละลาย ( eluate ) ต้นกับ H2O / เมทิลแอลกอฮอล์ ( 80 , v / v ) ( 33.7mg ) คือ rechromatographed กว่ามิลลิคูรี เจล chp-20p คอลัมน์ ( 1.1i D . × 21 ซม. ) isocratically กับ H2O / เมทิลแอลกอฮอล์ ( 85:15 , v / v ) ตามด้วย HPLC ค่าบำบัดน้ำเสียของสารละลาย ( eluate ) ( 20 มิลลิกรัม ) ด้วยตัวทำละลาย
2ตัวอย่างเพิ่มเติมเพื่อบริสุทธิ์ ( 8.2 มิลลิกรัม ) ของ nilotinin M5 ( 1 ) ในสารละลาย ( eluate ) สาย ( 30 มิลลิกรัม ) ปริมาณ H2O ( 80 / V / V ) ยัง rechromatographed กว่ามิลลิคูรี เจล chp-20p คอลัมน์ ( 1.1 บัตรประจำตัว×
21 ซม. ) และปริมาณ h2o h2o / ( รูป→ keyboard - key - name 85:15 → keyboard - key - name → keyboard - key - name และ 80 : 20 5 0 v / v ) และค่าของ H2O บริสุทธิ์ HPLC เมทิลแอลกอฮอล์ ( 5 / V / V ) สารละลาย ( eluate ) ( 55 มก. ) กับตัวทำละลาย 2 ให้ผล nilotinin
M7 ( 3 ) ( 9.0 มิลลิกรัม )โดย T2 เศษส่วน 211 − 264 ( 555 มิลลิกรัม ) ตัวอย่างกลุ่ม / H2O ( 70 : 30 , V / V ) ได้ภายใต้การ MCI เจล chp-20p คอลัมน์ ( 1.1 บัตรประจำตัว× 37 ซม. ) และปริมาณ h2o h2o / ( รูป→ keyboard - key - name 85:15 → keyboard - key - name 80 → keyboard - key - name 5 → keyboard - key - name 70 : 30 และ 0 v / v ) โดยการลบที่เกี่ยวข้องล่าช้ากับ H2O / เมทิลแอลกอฮอล์ ( 80 , V / V ) ( 43 มิลลิกรัม ) และค่าบำบัดน้ำเสียด้วยตัวทำละลาย 2 ให้ผล nilotinin M6 ( 2 ) 7.2 ( มิลลิกรัม ) โดย T2 เศษส่วน 265 − 318 ( 535 มิลลิกรัม )ตัวอย่างแรกกับเอโตะ / H2O ( 70 : 30 , v / v ) / อะซิโตน / H2O ( 70 : 30 , v / v ) ( รูป V / V ) ได้ภายใต้การ MCI เจล chp-20p คอลัมน์ ( 1.1 บัตรประจำตัว× 37 ซม. ) และปริมาณ h2o h2o /
( รูป→ keyboard - key - name 85:15 → keyboard - key - name 80 5 กุมภา→ keyboard - key - name → keyboard - key - name แล้ว 0 v / v ) และสายการลบที่เกี่ยวข้องกับ H2O / เมทิลแอลกอฮอล์ ( 5 , v / v ) ( 59 มิลลิกรัม ) คือ rechromatographed ผ่านคอลัมน์เดียวกันกับเมทิลแอลกอฮอล์ ( 80 / H2O → keyboard - key - name 5 → keyboard - key - name 70 : 30 และ 0 v / v ) ในสารละลาย ( eluate ) ( 420 มิลลิกรัม ) ปริมาณ h2o / ( 5 และ 70 : 30 , V / V ) ก็ต้องบริสุทธิ์ด้วยตัวทำละลาย HPLC = 3 ให้ผลผลิต nilotinin D9 ( 10 ) ( 5.4 มิลลิกรัม ) และ
hirtellin F ( 6 มก. ) ตามลำดับ ส่วน ( 3.6 กรัม ) T1 เศษ 5 ตัวอย่าง ( 4.6 กรัม ) กลุ่ม− H2O ( 70 : 30 , v / v ) / อะซิโตน / H2O ( 70 : 30 , v / v ) ( 70 : 30 , v / v ) เป็น rechromatographed บน toyopearl hw-40 ( หยาบ ) คอลัมน์ ( 2.2 บัตรประจำตัว× 45 ซม. ) กับเอโตะ / H2O ( 70 : 30 ,v / v ) / อะซิโตน / H2O ( 70 : 30 , v / v ) ( → keyboard - key - name 80 รูป→ keyboard - key - name 70 : 30 , v / v ) อย่างต่อเนื่อง ในสารละลาย ( eluate ) ( 1.4g ) กลุ่ม / H2O ( 70 : 30 , v / v ) / อะซิโตน / H2O ( 70 : 30 , v / v ) ( 80 : 20 ) ภายใต้การ MCI เจล chp-20p คอลัมน์ ( 1.1 บัตรประจำตัว× 36 ซม. ) และปริมาณ h2o h2o / ( 95:5 → keyboard - key - name รูป→ keyboard - key - name 85:15 → keyboard - key - name 80 → keyboard - key - name 5 กุมภา→ keyboard - key - name → keyboard - key - name 60 : 40 0 v / V ) ให้ผลผลิต 600 มิลลิคูรีเศษส่วน ( mcifrs 600 ลดลงแต่ละครั้ง )การ mcifrs 11 − 60 ( 159 มก. ) และ mcifrs 61 − 195 ( 235 มิลลิกรัม ) ปริมาณ ( 85:15 ตัวอย่างกับ H2O / V / V ) ได้ถูกแยก rechromatographed ผ่านคอลัมน์ Sephadex lh-20 ( 2.2 บัตรประจำตัว× 21 ซม. ) กับเอโตะ / H2O ( 70 : 30 , v / v ) , เอโตะ / H2O ( 70 : 30 , v / v ) / อะซิโตน / H2O ( 70 : 30 , v / v ) ( รูป v / v ) และอะซิโตน / H2O ( 70 : 30 , v / v ) และ แทนนินหยาบ ( 69 มิลลิกรัม ) ในสารละลาย ( eluate ) กลุ่ม / H2O ( 70 : 30 , v / v ) / อะซิโตน / H2O ( 70 : 30 , v / v ) ( 90 : 10 ,v / v ) จากคอลัมน์ Sephadex เหล่านี้ hirtellin T2
) ( 6 ) ( 15.2 mg ) เมื่อค่า purificationwith ตัวทำละลาย HPLC 1 และ 2 ตามลำดับ การ mcifrs 196 − 300 ( 268 มิลลิกรัม ) ปริมาณตัวอย่างกับ H2O ( 80 / V / V ) ได้ภายใต้การ MCI เจล chp-20p คอลัมน์ ( 1.1 บัตรประจำตัว× 37 ซม. ) และปริมาณ h2o h2o / ( 95:5 → keyboard - key - name รูป→ keyboard - key - name 85:15 → keyboard - key - name 80 5 กุมภา→ keyboard - key - name → keyboard - key - name → keyboard - key - name 60 : 40 0 v / V )และสารละลาย ( eluate ) ต้น ( 57 มก. ) กับ H2O / เมทิลแอลกอฮอล์ ( 70 : 30 , V /
V ) บริสุทธิ์โดยเตรียม HPLC ด้วยตัวทำละลาย 4 จ่าย hirtellin T2 ( 6 ) ( 7.55 มิลลิกรัม ) และ nilotinin T1 ( 5 ) ( 16.6 มิลลิกรัม ) การ mcifrs 301 − 471 ( 204 mg ) ตัวอย่างกับ H2O / เมทิลแอลกอฮอล์ ( 5 V / V ) คือ ต้องสามารถ lh-20 คอลัมน์ ( 1.1 บัตรประจำตัว× 37 ซม. ) กับเอโตะ / H2O ( 70 : 30 , v / v ) พบ− H2O ( 70 : 30 , v / v ) / อะซิโตน / H2O ( 70 : 30 , v / v ) ( → keyboard - key - name 80 รูป ,v / v ) และอะซิโตน / H2O ( 70 : 30 , v / v ) และ แทนนินหยาบ ( 32 มก. ) ในกลุ่ม / H2O ( 70 : 30 , v / v ) สารละลาย ( eluate ) ให้ผล hirtellin C ( 11 ) ( 7 มก. ) เมื่อผลิตด้วยตัวทำละลาย HPLC ด 2 ในสารละลาย ( eluate ) ต้นกับเอโตะ / H2O ( 70 : 30 , v / v ) / อะซิโตน / H2O ( 70 : 30 , v / v ) ( รูป v / v ) ( 88.7 มก. ) จากคอลัมน์ Sephadex ละลายปริมาณ . tamarixinin B ( 8 ) ( 29 มก. ) ได้เป็นปริมาณที่ไม่เศษส่วน ,ในขณะที่ปริมาณ soluble ส่วนบริสุทธิ์โดยเตรียม HPLC ด้วยตัวทำละลาย 4 และผลของพืชเพิ่มเติม
tamarixinin B ( 8 ) ( 10 มิลลิกรัม ) และ nilotinin T1 ( 5 ) ( 10 mg ) การ mcifrs 523 − 572 ( 72 มิลลิกรัม ) ตัวอย่างที่มีปริมาณ h2o / ( 60 : 40 , v / v ) , rechromatographed กว่ามิลลิคูรี เจล chp-20p คอลัมน์ ( 1.1 บัตรประจำตัว× 21 ซม. ) และปริมาณ ( 70 : 30 / H2O H2O → keyboard - key - name 60 : 40 0 v / v )และค่าบำบัดน้ำเสียของการลบที่เกี่ยวข้องกับ H2O / เมทิลแอลกอฮอล์ ( 60 : 40 , v / v ) ( 17 มิลลิกรัม ) ด้วยตัวทำละลาย 5 เจ้าตัว tamarixinin C ( 9 ) ( 5.7
มิลลิกรัม ) nilotinin M5 ( 1 ) : ปิดสีขาว สัณฐานผง ; [ ] 26d 23.6 ( C α 1.0 ปริมาณรังสียูวี ( เมทิลแอลกอฮอล์ ) ) λแม็กซ์ ( log ε ) 218.5 ( 5.05 ) 270 ( 4.7 ) ; ซีดี ( เมทิลแอลกอฮอล์ ) [ θ ] ( nm ) [ θ ] 0.75 × 105 ( 236 ) − 1.8 × 104 ( 265 ) 1.3 × 104 ( 285 ) ; 1H NMR ( acetone-d6 / d2o 9 : 1 , 600 MHz ) δ H 7.21 ( 1 h , D , J = 1.8 Hzdhdg H-6 ) 7.06 ( 1 h , S , dhdg H-6 , MBC ) ไก [ 2h , S , isodhdg ( คน / H-6 ) ] , 6.93 [ 2h , S , galloyl ( คน / H-6 ) ] , 90 ( 1 h , S , isodhdg H-6 , MBC ) 6.58 ( 1 h , S , hhdp h-3 ) 6.51 ( 1 h , S , hhdp h-3 School ) 6.46 ( 1 h , D , J = 1.8 Hz dhdg ส่วน ) และประกอบด้วยกลูโคส ( ตารางที่ 1 ) ; 13C NMR งาน เห็นตารางที่ 2 และ 3 M / Z ; fabms 871 [ M na ] ; hresims M / Z 1297.10358 [ M ] ( นา Calcd สำหรับ c55h38o36 นา 1297.10350 )nilotinin M6 ( 2 ) : ปิดสีขาว สัณฐานผง ; [ ] 18d α 20.5 ( C 1.0 , เมทิลแอลกอฮอล์ ) ; UV ( เมทิลแอลกอฮอล์ ) λแม็กซ์ ( log ε ) 218.5 ( 5.43 ) 264 ( 5.04 ) ; ซีดี ( เมทิลแอลกอฮอล์ ) [ θ ] ( nm ) 1.5 × 105 ( 236 ) , 7.6 −× 104 ( 262 ) , 4.8 × 104 ( 286 ) ; 1H NMR ( acetone-d6 / d2o 09 : 01 , δ H ) 7.06 , 6.99 [ แต่ละ 2H , S , isodhdg ( คน / H-6 ) × 2 ] หัวเรื่อง [ 2h , S , galloyl ( คน / H-6 ) ] , 6.87, 6.84 [ แต่ละ 1 h , S , isodhdg ( H-6 School ) × 2 ] 6.60 ( 1 h , S , hhdp h-3 ) 6.49 ( 1 h , S ,hhdp h-3 School ) และโปรตอนกลูโคส ( ตารางที่ 1 ) ; 13C NMR งาน เห็นตารางที่ 2 และ 3 hresims M / Z 1297.10145 [ M
na ] ( Calcd สำหรับ c55h38o36na 1297.10351 , ) nilotinin M7 ( 3 ) : ปิดสีขาว สัณฐานผง ; [ ] α 25D 21.4 ( C 1.0 , เมทิลแอลกอฮอล์ ) ; UV ( เมทิลแอลกอฮอล์ ) λแม็กซ์ ( log ε ) 217.5 ( 5.11 ) 274 ( 4.74 ) ; ซีดี ( เมทิลแอลกอฮอล์ ) [ θ ] ( nm ) 1.1 × 105 ( 237 ) , − 3 × 104 ( 262 ) 2.3 × 104 ( 283 ) ; 1H NMR ( acetone-d6 / d2o 09 : 01 , δ H ) ทำ [ 2h , S ,galloyl-a ( คน / 6.968 H-6 ) ] , [ 2h , S , isodhdg ( คน / H-6 ) ] , 6.965 [ 2h , S , galloyl-b ( คน / H-6 ) ] , 6.81 ( 1 h , S , isodhdg H-6 School ) , 6.60 ( 1 h , S , hhdp h-3 ) 6.48 ( 1 h , S , hhdp h-3 School ) และโปรตอนกลูโคส ( ตารางที่ 1 ) ; 13C NMR งาน เห็นตารางที่ 2 และ 3 M / Z ; fabms 1229 [ M na ] ; hresims M / Z 1129.09566 นา [ M ] ( Calcd สำหรับ c48h34o31na 1129.09763 , ) nilotinin D10 ( 4 ) : ปิดสีขาว สัณฐานผง[ α ] 27d 53.1 ( c1.0 ปริมาณ UV , ) ; ( เมทิลแอลกอฮอล์ ) λแม็กซ์ ( log ε ) 218.5 ( 5.43 ) 277 ( 5.08 ) ; ซีดี ( เมทิลแอลกอฮอล์ ) [ θ ] ( nm ) 0.9 × 105 ( 238 ) − 6 × 104 ( 266 ) 2.6 × 104 ( 1 , 291 ) NMR ( acetone-d6 / d2o 09 : 01 , H ) δ 7.13 , 6.95 [ แต่ละ 1 h , D , J = 1.8 Hz ( dhdg H-6 ) × 2 ) 7.06 7.02 [ แต่ละ 1 h , S ( dhdg H-6 School ) × 2 ] , 7.03 6.948 6.92 , , [ แต่ละคน galloyl ( ของมือสอง / H-6 ) × 3 ) 6.58 ( 1 h , S , hhdp h-3 ) 6.51 ( 1 h , S , hhdp h-3 School ) , 6.37 , 631 [ แต่ละ 1 h , D , J = 1.8 Hz ( dhdg คน ) × 2 ] และโปรตอนกลูโคส ( ตารางที่ 1 ) ; 13C nmrassignments เห็นตารางที่ 2 และ 3 M / Z ; fabms 1763 [ M na ] ; hresims M / Z 1763.17637 [ M ] ( Calcd สำหรับ c75h56o49 นา นา 1763.17824 ) . nilotinin T1 ( 5 ) : ปิดสีขาว สัณฐานผง ; [ α ]
31C − 5.8 ( C 1.0 , เมทิลแอลกอฮอล์ ) ; UV ( เมทิลแอลกอฮอล์ ) λแม็กซ์ ( log ε ) 218 ( ศ ) , 274.5 ( 5.28 ) ; ซีดี ( เมทิลแอลกอฮอล์ ) [ θ ] ( nm ) 4.2 × 105 ( 235 ) − 1 × 105 ( 262 ) , 12 × 105 ( 286 ) ; 1H NMR ( acetone-d6 / d2o 09 : 01 , δ H ) 7.15 6.99 [ 1 , แต่ละ , S ( dhdg H-6 School ) × 2 ) 7.04 6.81 [ 1 h , แต่ละ , BR , ( dhdg H-6 ) × 2 ] , และ [ 6.48 6.44 แต่ละ 1 , BR , ( dhdg คน ) × 2 ] , 6.97 ( 2H br / s , isodhdg ส่วน H-6 ) , 6.76 ( 1 BR , isodhdg H-6 , MBC ) 7.09 6.972
, และแต่ละ 6.968 [ 2h , S , galloyl ( คน / H-6 ) × 3 ] 6.62 , 6.60 และ 6.58 [ แต่ละคน 1 H , S , hhdp ( h-3 School ) × 3 ] 6.53 6.52 ทั้ง , , [ แต่ละ 1 h , S ,