Transposon mutagenesis
Plasmids were isolated by alkaline lysis followed by ethanol precipitation [21]. In vitro transposon
mutagenesis of βLR16 was carried out with the GPS-1 Genome Priming System (New England
Biolabs, Beverly, MA, USA). Insertion mutants that failed to grow on carbenicillin had
presumed insertions in the active gene and were sequenced using the manufacturer’s primers.
Additional insertion mutants were randomly chosen for sequencing the entire insert. All sequencing
reactions were carried out at the University of Wisconsin-Madison DNA sequencing
facility using Big Dye Terminator (v. 3.1, Applied Biosystems, Foster City, CA, USA). The
Lasergene software package (DNASTAR, Madison, WI, USA) was used to assemble and annotate
the sequence, which accesses the Basic Local Alignment Search Tool (BLAST) [22] through
the National Center for Biotechnology Information (NCBI).
ฉับ transposon
พลาสมิดที่แยกได้จากอัลคาไลน์สลายตามด้วยการเร่งรัดเอทานอล [21] ในหลอดทดลอง transposon
ฉับของβLR16ได้ดำเนินการกับ GPS-1 จีโนมของระบบรองพื้น (นิวอิงแลนด์
Biolabs เบเวอร์ลี่, MA, USA) การกลายพันธุ์แทรกที่ล้มเหลวที่จะเติบโตใน carbenicillin ได้
สันนิษฐานแทรกในยีนที่ใช้งานและมีลำดับขั้นตอนโดยใช้ไพรเมอร์ของผู้ผลิต.
กลายพันธุ์แทรกเพิ่มเติมถูกสุ่มเลือกสำหรับลำดับแทรกทั้งหมด ลำดับทั้งหมด
ปฏิกิริยาได้ดำเนินการที่มหาวิทยาลัยวิสคอนซินแมดิสันลำดับดีเอ็นเอ
สิ่งอำนวยความสะดวกโดยใช้บิ๊กเทอร์มิย้อม (v. 3.1, Applied Biosystems, ฟอสเตอร์ซิตี, แคลิฟอร์เนีย, สหรัฐอเมริกา)
แพคเกจซอฟต์แวร์ Lasergene (DNASTAR เมดิสันวิสคอนซินสหรัฐอเมริกา) ถูกใช้ในการประกอบและใส่คำอธิบายประกอบ
ลำดับซึ่งการเข้าถึงการจัดท้องถิ่นพื้นฐานเครื่องมือค้นหา (ระเบิด) [22] ผ่าน
ศูนย์แห่งชาติสำหรับข้อมูลเทคโนโลยีชีวภาพ (NCBI)
การแปล กรุณารอสักครู่..

? ? ? ? ? การแยกโดยการสลายเป็นด่าง
) ตามด้วยเอทานอลด้วย [ 21 ] ในหลอดทดลอง ? ? ? ? ?
lr16 ได้ดําเนินการของบีตาด้วย gps-1 จีโนมระบบปั๊ม ( อังกฤษ
biolabs , Beverly , MA , USA ) กลายพันธุ์ที่ล้มเหลวที่จะเติบโตในการแทรกตะคริวกล้ามเนื้อมี
สันนิษฐานในยีนใหม่ใช้งานและลำดับการใช้ของผู้ผลิต
รองพื้นมนุษย์กลายพันธุ์แทรกเพิ่มเติมสุ่มเลือกลำดับแทรกทั้งหมด ทั้งหมดลำดับ
ปฏิกิริยาทดลองที่มหาวิทยาลัยวิสคอนซินแมดิสันดีเอ็นเอ
สถานที่ใช้ Terminator ย้อมใหญ่ ( v . 3.1 , Applied Biosystems ฟอสเตอร์ ซิตี้ , แคลิฟอร์เนีย , สหรัฐอเมริกา
lasergene แพคเกจซอฟต์แวร์ ( dnastar เมดิสัน , WI , USA ) ถูกใช้ในการประกอบและคำอธิบาย
ลำดับที่ใช้เครื่องมือค้นหาการปรับพื้นฐานท้องถิ่น ( ระเบิด ) [ 22 ] ผ่าน
ศูนย์ข้อมูลเทคโนโลยีชีวภาพแห่งชาติ ( ncbi )
การแปล กรุณารอสักครู่..
