Materials and methods
Extracts of washed, uncooked, fresh fruits and vegetables
were prepared by homogenising 5 g (fresh wet weight of the
edible part, with or without skin and seeds, as would
normally be eaten) in 100 ml distilled water for 30 s.
Homogenates were filtered, and the total antioxidant
capacity and AA (reduced form only) concentrations were
measured in triplicate immediately afterwards using an
assay known as FRASC (Benzie & Strain, 1997). Water
extracts of vegetables had a near neutral pH, therefore
extracts in acetate buffer (pH 3:
6) were also made, as AA is
unstable at neutral pH. We compared FRAP and AA values
of neutral pH and acid extracts to determine if there was a
significant, rapid loss of antioxidants in uncooked
vegetables following cellular disruption. Extracts of fruits
were acidic, and only water extracts of these were made.
Seventeen varieties of fruits and seventeen different types of
vegetables were tested. For each fruit and vegetable at least
three samples, purchased from local shops, were tested,
each in triplicate. Results presented are the total antioxidant
content as the FRAP value (asmmol/kg wet weight), the AA
content (as mmol/kg wet weight, and as mg/kg wet
weight), and the % total antioxidant capacity of the
extract contributed by AA.
The FRASC assay was performed as described in detail
elsewhere (Benzie & Strain, 1997, 1999). In brief,
reductants (‘antioxidants’) in the sample reduce a ferric–
tripyridyltriazine complex, present in stoichiometric excess,
to the blue coloured ferrous form. The change of absorbance
at 593 nm over 4 min is proportional to the combined (total)
FRAP value of the antioxidants in the sample. In the
FRASC assay, AA is selectively destroyed by the addition
of ascorbate oxidase to one of a pair of sample aliquots. In
this case the absorbance change of a sample to which
ascorbate oxidase was added is subtracted from the
absorbance of a matching aliquot to which water, rather
than ascorbate oxidase was added; the difference is due
specifically to AA (reduced form only). Change in
absorbance (0–1 min for AA and 0–4 min for FRAP) is
converted to mmol/l by comparison with a standard of
known AA concentration or FRAP value. Aqueous solutions
of ferrous ions (iron(II) sulfate (FeSO4.7H2
O)) and ascorbic
acid (L(1)-AA, extra pure crystals) both from Merck
(Darmstadt, Germany) are used as calibrators. The FRAP
assay has a limit of detection of 2mmol/l, and precision is
excellent: within- and between-run CV are ,0:
5 and 1:
0 %
respectively at between 500 and 2000mmol/l antioxidant–
reducing power, n.8 in each case. For AA, within- and
between-run CV of FRASC are ,5 % at 25, 50, 100, and
440mmol/l.
All reagents and solutions were prepared in Milli-Q
water, which was made from a Millipore ultrapure water
system (Millipore Corp., Bedford, MA, USA). FRASC
reagents were as follows: 300 mmol/l acetate buffer, pH 3:
6,
prepared by dissolving 3:
1 g sodium acetate trihydrate in
distilled water, with 16 ml glacial acetic acid (BDH
Laboratory Supplies, Poole, UK) added and made up to 1
litre with distilled water; 10 mM-2,4,6 tripyridyl-S-triazine
(Fluka Chemicals, Buchs, Switzerland) solution in
40 mM-HCl (BDH Laboratory Supplies); 20 mM-FeCl3
.6-
H2
O (BDH Laboratory Supplies) solution in distilled water.
Working FRASC reagent was prepared as needed by mixing
10 ml acetate buffer with 1 ml 2,4,6 tripyridyl-S-triazine
solution and 1 ml FeCl3.6H2
O solution. A 4 IU ascorbic
oxidase/ml solution (Sigma Chemical Co., St, Louis, MO,
USA) was prepared in distilled water, divided into portions
and stored at 2708C until needed.
For FRASC analysis, 100ml of each freshly prepared
food extract was mixed with 40ml ascorbic oxidase
solution; a matching (paired) 100ml aliquot of each extract
was mixed with 40ml water; paired extracts were
immediately loaded on the analyser (Cobas Fara centrifugal
analyser; Roche Diagnostics Ltd, Basel, Switzerland). The
0–1 min change in A593 nm readings of the paired extracts
(tested in parallel) were retrieved and used to calculate the
AA concentration. The 0–4 min changes in A593 nm of the
extracts treated with water only (no ascorbic oxidase) were
retrieved and used to calculate the FRAP values. The FRAP
value in mmol/l was calculated by simple comparison of
0–4 min change in absorbance at 593 nm of the test sample
and that of a Fe21
calibrator, as follows:
0–4 min DA593 nm of test sample
0–4 min DA593 nm of standard
Fe21 standard
mmol=l:
The AA value inmmol/l was calculated by comparison of
0–1 min change in absorbance at 593 nm of the extract and
that of an AA calibrator, as follows:
0–1 min DA593 nm
0–1 minDA593 nm sample 2 ao
2
0–1 min DA593 nm sample 1 ao;
and
AA concentration
mmol=l
0–1 min DA593 nm of test sample
0–1 min DA593 nm of standard
AA standard
mmol=l;
where ao is ascorbic oxidase.
AA was converted from mmol/l extract to mg/kg wet
weight of fruit or vegetable by simple calculation based on
molecular mass of AA (176), the weight of fruit or vegetable
extracted and the volume of fluid used for extraction
(typically 5 g and 100 ml respectively). The % contribution
of AA (which has a stoichiometric value of 2 in the FRAP
assay, i.e. 1 mol AA reduces 2 mol Fe31
to Fe21
) to the total
antioxidant capacity (FRAP value) of each fruit or vegetable
tested was calculated as follows:
วัสดุและวิธีการสารสกัดจากผักและผลไม้หิน uncooked สดได้จัดทำ โดย homogenising 5 กรัม (น้ำหนักเปียกสดของการส่วนกิน มี หรือไม่ มีผิวและเมล็ดพืช เหมือนปกติจะกิน) ใน 100 มลกลั่นน้ำ 30 sHomogenates คำ filtered สารต้านอนุมูลอิสระทั้งหมดกำลังการผลิตและความเข้มข้นของ AA (ฟอร์มลดลง)วัดใน triplicate ทันทีภายหลัง โดยใช้การทดสอบที่เรียกว่า FRASC (Benzie และต้องใช้ 1997) น้ำสารสกัดจากผักมี pH เป็นกลางใกล้ ดังนั้นสารสกัดในบัฟเฟอร์ acetate (pH 3:6) ยังทำ เป็น AAเสถียรที่ค่า pH เป็นกลาง เราเปรียบเทียบค่า FRAP และ AAค่า pH เป็นกลางและสารสกัดจากกรดเพื่อกำหนดว่าถ้ามีการsignificant สารต้านอนุมูลอิสระใน uncooked เสียอย่างรวดเร็วผักต่อทรัพยโทรศัพท์มือถือ สารสกัดจากผลไม้ได้เปรี้ยว และทำเฉพาะน้ำสารสกัดเหล่านี้พันธุ์และผลไม้ชนิดต่าง ๆ 17 17ผักถูกทดสอบ สำหรับผักและผลไม้แต่ละน้อยทดสอบ 3 อย่าง ซื้อจากร้านค้าท้องถิ่นใน triplicate แต่ละ แสดงผลเป็นสารต้านอนุมูลอิสระรวมเนื้อหาเป็นค่า FRAP (asmmol/kg เปียกน้ำหนัก), AAเนื้อหา (mmol/kg น้ำหนักเปียก และ เป็น mg/kg เปียกน้ำหนัก), และผลิตสารต้านอนุมูลอิสระรวม%ของการสารสกัดโดย AAทำการทดสอบ FRASC ตามที่อธิบายไว้ในรายละเอียดอื่น ๆ (Benzie และต้องใช้ 1997, 1999) สังเขปreductants ('อนุมูล') ในตัวอย่างลดการเฟอร์ –tripyridyltriazine คอมเพล็กซ์ ใน stoichiometric เกินสีฟ้าสีเหล็กฟอร์ม การเปลี่ยนแปลง absorbanceที่ 593 nm กว่า 4 นาทีเป็นสัดส่วนรวม (รวม)FRAP ค่าของสารต้านอนุมูลอิสระในตัวอย่าง ในนอกจากนี้การเลือกทำลาย FRASC วิเคราะห์ AAของ oxidase ascorbate คู่ aliquots อย่างหนึ่ง ในการเปลี่ยนแปลง absorbance ของตัวอย่างที่กรณีนี้ascorbate oxidase เข้ามาหักออกจากabsorbance ของส่วนลงตัวตรงที่น้ำ ค่อนข้างกว่าเพิ่ม ascorbate oxidase ข้อแตกต่างคือครบกำหนดspecifically จะ AA (ฟอร์มลดลง) การเปลี่ยนแปลงabsorbance (0-1 นาทีสำหรับ AA และ 0 – 4 นาทีสำหรับ FRAP) เป็นแปลงเป็น mmol/l by comparison with มาตรฐานของรู้จัก AA ความเข้มข้นหรือค่า FRAP โซลูชั่นอควีของเหล็กประจุ (iron(II) ซัลเฟต (FeSO4.7H2O)) และแอสคอร์บิคกรด (L (1) -AA ผลึกบริสุทธิ์พิเศษ) ทั้งจากเมอร์ค(ดาร์มส เยอรมนี) ใช้เป็นความทนทานและเชื่อถือ FRAPทดสอบขีดจำกัดของการตรวจสอบของ 2mmol/l และความแม่นยำยอดเยี่ยม: อยู่ภายใน และระหว่างรัน CV, 0:5 และ 1:0%ลำดับที่ 500 และ 2000mmol/l สารต้านอนุมูลอิสระ-ลดใช้พลังงาน n.8 ในแต่ละกรณี สำหรับ AA ภายใน- และมี CV FRASC, 5% 25, 50, 100 ระหว่างทำงาน และ440mmol/lReagents และโซลูชั่นทั้งหมดได้ถูกเตรียมไว้ Qน้ำ ที่ทำจากน้ำ ultrapure มากระบบ (มาก Corp. กลาสโกว์ MA สหรัฐอเมริกา) FRASCreagents มีดังนี้: บัฟเฟอร์ acetate mmol/l ค่า pH 3 300:6เตรียม โดยยุบ 3:trihydrate acetate โซเดียม 1 กรัมในกลั่นน้ำ กรดอะซิติกน้ำแข็ง 16 ml (BDHอุปกรณ์ห้องปฏิบัติการ Poole, UK) เพิ่ม และทำถึง 1ลิตร ด้วยน้ำกลั่น 10 มม.-2,4,6 tripyridyl-S-triazine(Fluka เคมี Buchs สวิตเซอร์แลนด์) แก้ปัญหาใน40 มม.-HCl (BDH อุปกรณ์ห้องปฏิบัติการ); 20 มม.-FeCl3. 6-H2โอ โซลูชั่น (BDH ห้องปฏิบัติการวัสดุ) ในน้ำกลั่นทำงาน FRASC รีเอเจนต์เตรียมไว้ ตาม ด้วยการผสมบัฟเฟอร์ acetate 10 ml มี 1 ml 2,4,6 tripyridyl-S-triazineโซลูชันและ 1 ml FeCl3.6H2โอ โซลูชั่น แอสคอร์บิค 4 IUโซลูชัน oxidase/ml (ซิกเคมี จำกัด เซนต์ Louis, MOสหรัฐอเมริกา) ถูกเตรียมในน้ำกลั่น แบ่งส่วนและเก็บไว้ที่ C 2708 จนต้องสำหรับการวิเคราะห์ FRASC, 100ml ของแต่ละคนซึ่งทำแยกอาหารที่ผสมกับ oxidase แอสคอร์บิค 40mlโซลูชั่น ส่วนลงตัว 100ml (จัดเป็นคู่) ตรงของสารสกัดแต่ละที่ผสมกับน้ำ 40ml แยกจัดเป็นคู่ได้โหลดทันทีบน analyser (Cobas Fara แรงเหวี่ยงanalyser โรชวินิจฉัยจำกัด บาเซิล สวิตเซอร์แลนด์) ที่0-1 การเปลี่ยนแปลงนาทีอ่าน nm A593 สารสกัดจากจัดเป็นคู่(ทดสอบพร้อมกัน) ถูกดึง และใช้ในการคำนวณการความเข้มข้นเอเอ 0 – 4 นาที A593 nm ของเปลี่ยนแปลงได้รับน้ำเท่านั้น (ไม่มีแอสคอร์บิค oxidase) สารสกัดจากดึงข้อมูล และใช้ในการคำนวณค่า FRAP FRAPคำนวณค่าใน mmol/l โดยเปรียบเทียบง่าย ๆ0 – 4 นาทีเปลี่ยนแปลง absorbance ที่ 593 nm ของตัวอย่างทดสอบและที่เป็น Fe21เครื่องสอบเทียบ เป็นดังนี้:0 – 4 นาที DA593 nm ของตัวอย่างทดสอบ0 – 4 นาที DA593 nm ของมาตรฐานMmol มาตรฐาน Fe21 = l:AA ค่า inmmol/l ถูกคำนวณ โดยการเปรียบเทียบ0-1 นาทีเปลี่ยนแปลง absorbance ที่ 593 nm ของการดึงข้อมูล และที่เป็น AA เครื่องสอบเทียบ เป็นดังนี้:0-1 นาที minDA593 DA593 nm 0 – 1 nm ตัวอย่าง 2 อ่าว2 0 – 1 นาที DA593 nm ตัวอย่าง 1 อ่าวและความเข้มข้นเอเอ mmol = l0-1 นาที DA593 nm ของตัวอย่างทดสอบ0-1 นาที DA593 nm ของมาตรฐานMmol เอเอมาตรฐาน = lที่อ่าวเป็น oxidase แอสคอร์บิคAA ถูกแปลงจากสารสกัด mmol/l มก./กก.เปียกน้ำหนักของผลไม้หรือผัก โดยการคำนวณอย่างง่าย ๆ ตามมวลโมเลกุลของ AA (176), น้ำหนักของผลไม้หรือผักสกัด และระดับเสียงของ fluid ใช้สำหรับแยก(ปกติ 5 กรัมและ 100 ml ตามลำดับ) สัดส่วน%ของ AA (ซึ่งมี 2 ค่า stoichiometric FRAPวิเคราะห์ เช่น AA 1 โมล 2 โมล Fe31 ลดการ Fe21) รวมหม่อน (ค่า FRAP) ของผลไม้หรือผักแต่ละทดสอบคำนวณเป็นดังนี้:
การแปล กรุณารอสักครู่..

วัสดุและวิธีการ
สารสกัดจากล้างดิบ, ผลไม้และผักสด
ที่ถูกจัดทำขึ้นโดย homogenising 5 กรัม (น้ำหนักเปียกสดของ
ส่วนที่กินได้มีหรือไม่มีผิวและเมล็ดตามที่จะ
นำมารับประทานได้ตามปกติ) ในน้ำกลั่น 100 ml สำหรับ 30 วินาที
homogenates ถูกไฟ ltered และสารต้านอนุมูลอิสระรวม
กำลังการผลิตและ AA (รูปแบบที่ลดลงเท่านั้น) ความเข้มข้นถูก
วัดได้ในทันทีหลังจากนั้นเพิ่มขึ้นสามเท่าโดยใช้
การทดสอบที่รู้จักในฐานะ FRASC (Benzie และความเครียด 1997) น้ำ
สารสกัดจากพืชผักผลไม้มีค่า pH ใกล้เป็นกลางดังนั้น
สารสกัดจากอะซิเตทในบัฟเฟอร์ (pH ที่ 3:
6) ที่ถูกสร้างขึ้นยังเป็น AA เป็น
ความไม่แน่นอนที่ pH เป็นกลาง เราเมื่อเทียบกับ FRAP และค่า AA
ค่า pH เป็นกลางและสารสกัดจากกรดเพื่อตรวจสอบว่ามีความ
ลาดเทมีนัยสำคัญการสูญเสียอย่างรวดเร็วของสารต้านอนุมูลอิสระในดิบ
ผักต่อไปนี้การหยุดชะงักของเซลล์ สารสกัดจากผลไม้ที่
มีฤทธิ์เป็นกรดและมีเพียงสารสกัดน้ำของเหล่านี้ได้ทำ.
เจ็ดพันธุ์ของผลไม้และเจ็ดประเภทที่แตกต่างกันของ
ผักได้มีการทดสอบ สำหรับแต่ละผักและผลไม้อย่างน้อย
สามตัวอย่างที่ซื้อมาจากร้านค้าในท้องถิ่นได้รับการทดสอบ
ในแต่ละเพิ่มขึ้นสามเท่า นำเสนอผลการเป็นสารต้านอนุมูลอิสระรวม
เนื้อหาเป็นค่า FRAP (asmmol / กก. น้ำหนักเปียก), AA
เนื้อหา (ตาม mmol / กก. น้ำหนักเปียกและเป็น mg / kg เปียก
น้ำหนัก) และ% สารต้านอนุมูลอิสระทั้งหมดของ
สารสกัดจากส่วนโดย AA.
ทดสอบ FRASC ได้ดำเนินการตามที่ระบุไว้ในรายละเอียด
อื่น ๆ (Benzie และสายพันธุ์ 1997, 1999) ในช่วงสั้น ๆ
reductants ('สารต้านอนุมูลอิสระ') ในกลุ่มตัวอย่างลด ferric-
ซับซ้อน tripyridyltriazine ปัจจุบันในส่วนที่เกิน stoichiometric,
ไปยังแบบฟอร์มเหล็กสีฟ้า การเปลี่ยนแปลงของการดูดกลืนแสง
ที่ 593 นาโนเมตรในช่วง 4 นาทีเป็นสัดส่วนรวมกัน (รวม)
ค่า FRAP ของสารต้านอนุมูลอิสระในตัวอย่าง ใน
การทดสอบ FRASC, AA ถูกทำลายการคัดเลือกโดยการเติม
ของ oxidase ascorbate ให้เป็นหนึ่งในคู่ของ aliquots ตัวอย่าง ใน
กรณีนี้การเปลี่ยนแปลงการดูดกลืนแสงของกลุ่มตัวอย่างที่
oxidase ascorbate ถูกเพิ่มเข้ามาจะถูกหักออกจาก
การดูดกลืนแสงของการจับคู่ลงตัวที่น้ำค่อนข้าง
กว่า oxidase ascorbate ถูกเพิ่มเข้ามา; ความแตกต่างที่เกิดจาก
ที่ระบุไว้ในการถอนรากถอนโคน AA (รูปแบบที่ลดลงเท่านั้น) การเปลี่ยนแปลงใน
การดูดกลืนแสง (0-1 นาที AA และ 0-4 นาที FRAP) จะถูก
แปลงเป็นมิลลิโมล / ลิตรโดยการเปรียบเทียบกับมาตรฐานของ
ความเข้มข้น AA ที่รู้จักหรือมูลค่า FRAP สารละลาย
ของไอออนเหล็ก (เหล็ก (II) ซัลเฟต (FeSO4.7H2
O)) และวิตามินซี
กรด (L (1) -AA ผลึกบริสุทธิ์พิเศษ) ทั้งจากเมอร์
(Darmstadt, Germany) จะถูกนำมาใช้เป็นเครื่องสอบเทียบ FRAP
ทดสอบมีข้อ จำกัด ของการตรวจสอบของ 2mmol / ลิตร, และความแม่นยำเป็น
เลิศ: within- และระหว่างทำงาน CV เป็น 0:
5 และ 1:
0%
ตามลำดับในระหว่าง 500 และ 2000mmol / ลิตรสารต้านอนุมูลอิสระ
ลดอำนาจ, n 8 ในแต่ละกรณี สำหรับ AA, within- และ
ระหว่างทำงาน CV ของ FRASC มี, 5% ที่ 25, 50, 100, และ
440mmol / ลิตร.
สารเคมีทั้งหมดและการแก้ปัญหาที่ถูกจัดทำขึ้น Milli-Q
น้ำซึ่งถูกสร้างขึ้นมาจากน้ำบริสุทธิ์ค
ระบบ ( คคอร์ป, ฟอร์ด, MA, USA) FRASC
น้ำยามีดังนี้ 300 มิลลิโมล / ลิตรบัฟเฟอร์อะซิเตท, พีเอช 3:
6
จัดทำโดยการละลายที่ 3:
1 กรัมโซเดียม acetate trihydrate ใน
น้ำกลั่น 16 มลน้ำแข็งกรดอะซิติก (BDH
อุปกรณ์ห้องปฏิบัติการพูลสหราชอาณาจักร) เพิ่มและทำ ถึง 1
ลิตรด้วยน้ำกลั่น; 10 MM-2,4,6 tripyridyl-S-triazine
(Fluka เคมีภัณฑ์ Buchs วิตเซอร์แลนด์) วิธีการแก้ปัญหาใน
40 MM-HCl (BDH อุปกรณ์ห้องปฏิบัติการ); 20 MM-FeCl3
.6-
H2
O (BDH อุปกรณ์ห้องปฏิบัติการ) สารละลายในน้ำกลั่น.
ทำงานน้ำยา FRASC ถูกจัดทำขึ้นตามความจำเป็นโดยการผสม
10 มิลลิลิตรบัฟเฟอร์อะซิเตทกับ 1 มิลลิลิตร 2,4,6 tripyridyl-S-triazine
การแก้ปัญหาและ 1 มิลลิลิตร FeCl3 .6H2
O วิธีการแก้ปัญหา 4 IU ซี
oxidase / แก้ปัญหามล (Sigma Chemical Co. , St, Louis, MO,
USA) ได้รับการจัดทำขึ้นในน้ำกลั่นแบ่งออกเป็นส่วน
และเก็บไว้ที่ 2708C จนต้อง.
สำหรับการวิเคราะห์ FRASC, 100ml ของแต่ละปรุงสดใหม่
สารสกัดจากอาหาร ผสมกับ 40ml oxidase ซี
แก้ปัญหา; การจับคู่ (คู่) 100ml ลงตัวของสารสกัดแต่ละ
ผสมกับน้ำ 40ml; สารสกัดจับคู่ถูก
โหลดทันทีในการวิเคราะห์ (Cobas Fara แรงเหวี่ยง
วิเคราะห์; Roche Diagnostics จำกัด , บาเซิล, สวิตเซอร์)
การเปลี่ยนแปลง 0-1 นาทีในการอ่าน A593 นาโนเมตรของสารสกัดจับคู่
(ทดสอบในแบบคู่ขนาน) ถูกดึงและใช้ในการคำนวณ
ความเข้มข้น AA 0-4 นาทีการเปลี่ยนแปลงใน A593 นาโนเมตรของ
สารสกัดจากได้รับการรักษาด้วยน้ำ (ไม่ oxidase ซี) ถูก
ดึงและใช้ในการคำนวณค่า FRAP FRAP
ค่าในมิลลิโมล / ลิตรที่คำนวณได้จากการเปรียบเทียบง่ายของ
0-4 นาทีการเปลี่ยนแปลงในการดูดกลืนแสงที่ 593 นาโนเมตรของตัวอย่างทดสอบ
และของ Fe21
สอบเทียบดังนี้
0-4 นาที DA593 นาโนเมตรของตัวอย่างทดสอบ
0-4 นาที DA593 นาโนเมตรของมาตรฐาน
? ?? Fe21 ?? มาตรฐาน ?? mmol = ลิตร ??
มูลค่า AA inmmol / ลิตรที่คำนวณได้จากการเปรียบเทียบ
0-1 นาทีการเปลี่ยนแปลงในการดูดกลืนแสงที่ 593 นาโนเมตรของสารสกัดและ
ที่สอบเทียบ AA ดังนี้
0-1 นาทีนาโนเมตร DA593? ? ?? 0-1 minDA593 ตัวอย่างนาโนเมตร 2 อ่าว ??
2 ?? 0-1 นาที DA593 ตัวอย่าง 1 นาโนเมตรอ่าว ??;
และ
AA เข้มข้น ?? mmol = ลิตร ??
??
0-1 นาที DA593 นาโนเมตรของตัวอย่างทดสอบ
0- 1 นาที DA593 นาโนเมตรของมาตรฐาน
? AA ?? ?? มาตรฐาน ?? mmol = ลิตร ??;
ที่อ่าวเป็น oxidase ซี.
เอเอถูกดัดแปลงมาจากมิลลิโมล / ลิตรสารสกัดเพื่อ mg / kg เปียก
น้ำหนักของผลไม้หรือผักโดยการคำนวณง่ายขึ้นอยู่กับ
มวลโมเลกุลของ AA (176) น้ำหนักของผลไม้ หรือผัก
สกัดและปริมาณของ UID ชั้นที่ใช้ในการสกัด
(ปกติ 5 กรัมและ 100 มล. ตามลำดับ) การมีส่วนร่วม%
ของ AA (ซึ่งมีมูลค่าทางทฤษฎีของ 2 ใน FRAP
ทดสอบคือ 1 mol AA ลด 2 โมล Fe31
เพื่อ Fe21
) การรวม
สารต้านอนุมูลอิสระ (ค่า FRAP) ของแต่ละผลไม้หรือผัก
ที่ผ่านการทดสอบที่คำนวณได้ดังนี้
การแปล กรุณารอสักครู่..

วัสดุและวิธีการ
สารล้าง , ดิบ , ผลไม้สดและผัก
เตรียม homogenising 5 กรัม ( สด น้ำหนักเปียกของ
ส่วน กินได้หรือไม่มีผิวและเมล็ดเป็นจะ
ปกติจะกิน ) ใน 100 มล. น้ำกลั่น 30 S .
homogenates อยู่จึง ltered และรวมสารต้านอนุมูลอิสระ
ความจุและ AA ( ลดปริมาณ
แบบฟอร์มเท่านั้น )วัดทั้งสามใบทันทีภายหลังการใช้
( ที่รู้จักกันเป็น frasc ( benzie &สายพันธุ์ , 1997 ) สารสกัดน้ำของผักมีใกล้
pH เป็นกลาง ดังนั้นสารสกัดอะซีเตทบัฟเฟอร์ pH 3 :
6 ) ยังทำให้เป็น AA คือ
เสถียรที่เป็นกลาง . เราเปรียบเทียบ VDO และ AA ค่า pH เป็นกลางและกรด
สารสกัดเพื่อตรวจสอบหากมี
signi จึงไม่สามารถ การสูญเสียอย่างรวดเร็วของสารต้านอนุมูลอิสระ ในดิบ
ผักตามเซลล์หยุดชะงัก สารสกัดของผลไม้
เป็นเปรี้ยว และสารสกัดน้ำของเหล่านี้ถูกทำ .
สิบเจ็ดพันธุ์ 17 ชนิดของผักและผลไม้
ถูกทดสอบ สำหรับแต่ละผักและผลไม้อย่างน้อย
3 ตัวอย่าง ซื้อจากร้านค้าท้องถิ่น , ทดสอบ
แต่ละทั้งสามใบ ผลลัพธ์ที่นำเสนอเป็น
สารต้านอนุมูลอิสระทั้งหมดเนื้อหาเป็นค่า VDO ( asmmol กิโลกรัมน้ำหนักเปียก ) , เนื้อหา AA
( มิลลิโมล / กิโลกรัมน้ำหนักเปียกและเป็นมิลลิกรัมต่อกิโลกรัมน้ำหนักเปียก
) และ % สารต้านอนุมูลอิสระสารสกัดส่วนโดยรวมของ
frasc AA ) ได้อธิบายไว้ในรายละเอียดอื่น ๆ (
benzie &ความเครียด , 2540 , 2542 ) ในช่วงสั้น ๆ ,
reductants ( 'antioxidants ' ) ในตัวอย่างลดเฟอร์–
tripyridyltriazine ซับซ้อนปัจจุบันในอัตราส่วนเกิน
กับสีฟ้าสีเฟอร์ฟอร์ม การเปลี่ยนแปลงของค่า
ที่ 593 nm กว่า 4 นาทีเป็นปฏิภาคกับรวม ( รวม )
VDO คุณค่าของสารต้านอนุมูลอิสระในตัวอย่าง ใน
frasc assay , AA จะเลือกทำลาย โดยการเพิ่มหนึ่งของ ascorbate
โดยคู่ของตัวอย่างเฉยๆ . ในเคสนี้การเปลี่ยนแปลงค่า
ตัวอย่างที่แอสคอร์เบทออกซิเดสเพิ่มเป็นลบออกจาก
การดูดกลืนแสงของการจับคู่ส่วนลงตัวน้ำซึ่งค่อนข้าง
กว่า ascorbate oxidase เพิ่มความแตกต่างเนื่องจาก
กาจึง CALLY AA ( ลดแบบฟอร์มเท่านั้น ) การเปลี่ยนแปลงค่า (
0 – 1 นาทีสำหรับ AA และ 0 – 4 นาที VDO )
แปลงมิลลิโมล / ลิตรโดยเปรียบเทียบกับมาตรฐานที่ทราบความเข้มข้น AA หรือค่า Frap
. สารละลาย
ไอออนของโลหะเหล็ก ( เหล็กซัลเฟต ( II ) ( feso4.7h2
O
) วิตามินซีและกรดแอล ( 1 ) - AA , ผลึกบริสุทธิ์พิเศษ ) จากเมอร์ค
( ดาร์มสตัดท์ , เยอรมนี ) ใช้เป็นเทียบ . การใช้ Frap
มีขีดจำกัดของการตรวจหา 2mmol / L และความแม่นยำเป็นเลิศภายใน
และระหว่างวิ่ง CV , 0 :
5 และ 1 :
0
% ตามลำดับ ที่ระหว่าง 500 และ 2000mmol / l (
n.8 สารต้านอนุมูลอิสระลดพลังงานในแต่ละกรณี สำหรับภายใน -
อ๊ะระหว่างวิ่ง CV ของ frasc เป็น 5% ที่ 25 , 50 , 100 , และ
/ l
440mmol reagents และโซลูชั่นที่เตรียมไว้ใน milli-q
น้ำซึ่งทำจากน้ำบริสุทธิ์มากมิลลิ
ระบบ ( มิลลิคอร์ป , ฟอร์ด , MA , USA ) frasc
reagents ดังนี้ 300 มิลลิโมล / ลิตรอะซิเตทบัฟเฟอร์พีเอช 3 :
6
เตรียมโดยละลาย 3 :
1 กรัม โซเดียมอะซิเตตต่างๆใน
น้ำกลั่นกับกรดแอซีติก ( bdh
16 มล.ห้องปฏิบัติการวัสดุ , พูล , UK ) และเพิ่มขึ้น 1
ลิตรกับน้ำ 10 mm-2,4,6 tripyridyl-s-triazine
( fluka เคมีภัณฑ์ buchs , สวิตเซอร์แลนด์ ) สารละลาย HCl
40 มม. ( bdh ห้องปฏิบัติการวัสดุ ) ; 20 mm-fecl3
6 H2
-
o ( bdh อุปกรณ์ห้องปฏิบัติการ ) สารละลายในน้ำกลั่น
ทำงาน frasc เตรียมโดยการผสมสารเคมีตามต้องการ
10 ml พร้อม 2,4,6 อะซิเตทบัฟเฟอร์ tripyridyl-s-triazine
1 มิลลิลิตรโซลูชั่น 1 ml fecl3.6h2
O สารละลาย 4 IU / ml วิตามินซี
โดยโซลูชั่น ( Sigma Chemical Co . , เซนต์ หลุยส์ โม
USA ) ถูกเตรียมไว้ในน้ำกลั่น , แบ่งออกเป็นส่วนและเก็บไว้ใน 2708c
จนกว่าจะใช้ การวิเคราะห์ frasc 100ml ของแต่ละ , เตรียมอาหารแยก
สดๆ มาผสมกับวิตามินซีของโซลูชั่น 40ml
; ตรงกัน ( คู่ ) 100ml ส่วนลงตัวของแต่ละสารสกัด
ผสมกับสาหร่าย สูตรน้ำคู่สารสกัดถูก
ทันทีโหลดบนเครื่อง ( cobas การดับเครื่องแรงเหวี่ยง
; โรชไดแอกโนสติกส์จำกัด , Basel , Switzerland )
0 – 1 นาทีเปลี่ยน a593 nm ค่าของคู่สกัด
( แบบขนาน ) ถูกดึงและใช้เพื่อคำนวณ
ความเข้มข้น AA 0 – 4 นาทีในการเปลี่ยนแปลง a593 nm ของ
สารสกัดที่ได้รับการรักษาด้วยน้ำเท่านั้น ( ไม่มีแอส oxidase )
ดึงและใช้ Frap ที่จะคำนวณค่า ใช้ Frap
ค่ามิลลิโมล / ลิตรถูกคำนวณโดยการเปรียบเทียบง่ายของ
0 – 4 นาทีเปลี่ยนในการดูดกลืนแสงที่ 593 nm ของตัวอย่างทดสอบ
และที่ของ fe21 คาลิเบรเตอร์ ดังนี้
0 – 4 นาที da593 nm ของตัวอย่างทดสอบ
0 – 4 นาที da593 nm ของมาตรฐาน
จง fe21 มาตรฐาน . . . . . . . มิลลิโมล = L :
AA คุณค่า inmmol / ลิตร คำนวณโดยการเปรียบเทียบ
0 – 1 นาทีเปลี่ยนในการดูดกลืนแสงที่ 593 nm สารสกัดและ
ของคาลิเบรเตอร์ AA ดังนี้
0 – 1 นาที . . . . . . . da593 nm 0 – 1 minda593 nm ตัวอย่าง 2 อ่าว
2 . . . . . . . 0 – 1 นาที da593 nm ตัวอย่าง 1 อ่าว ;
= . . . . . . . มิลลิโมลและความเข้มข้น ผม
0 – 1 นาที da593 nm ของตัวอย่างทดสอบ
0 – 1 นาที da593 nm ของมาตรฐาน
จงมาตรฐาน AA . . . . . . . มิลลิโมล = L ;
ที่อ่าวเป็นแอส oxidase .
ถูกดัดแปลงมาจากมิลลิโมล / ลิตรสกัดมิลลิกรัม / กิโลกรัมเปียก
น้ำหนักของผลไม้หรือผัก โดยคำนวณง่ายๆ จาก
มวลโมเลกุลของ AA ( 176 ) , น้ำหนักของผลไม้หรือผัก
สกัดและปริมาณของflอี๊ดใช้สำหรับการสกัด
( ปกติและ 5 กรัมต่อ 100 มิลลิลิตร ) %
( ผลงานของ AA ซึ่งมีอัตราส่วนค่าของ 2 ใน Frap
3 คือ 1 mol AA ลด 2 mol fe31
เพื่อ fe21
) รวมสารต้านอนุมูลอิสระ ( VDO ค่า ) ของแต่ละผลไม้หรือผัก
ทดสอบ คำนวณได้ดังนี้
การแปล กรุณารอสักครู่..
