Bs binary toxin in Bti The strategy

Bs binary toxin in Bti
The strategy of improving mosquitocidal bacteria by producing the Bs binary toxin in Bti has been used much less frequently, primarily because Bti already has a broad host spectrum and is more effective than Bs against most mosquito species. In addition, Bs is more effective and persists better than Bti in polluted waters, so improving the host spectrum and toxicity of Bs with Bti proteins had the potential for producing
an excellent recombinant strain. It is not clear at this point which host is the best for optimizing toxin production and achieving broad-spectrum mosquito control. It may be that Bti is the best for some endotoxin combinations, targets and ecological situations and Bs for others. But producing the Bs
binary toxin in Bti along with its normal toxin complement, especially using some of the enhancing elements, shows that very effective recombinants that use Bt as a host cell can be constructed. In the first study where Bs toxins were produced in Bti, the binary toxin of Bs 1593 was cloned into the shuttle vector
pBU4, yielding pGSP10 (Bourgouin et al., 1990). This plasmid was then transformed into the 4QS-72 strain of Bti, a strain that only contains the large plasmid encoding the Cyt and Cry endotoxins typically found in this subspecies. Analysis of the recombinant Bti strain showed that it produced the standard Bti toxins in normal amounts along with the 51.4-kDa and 41.9- kDa peptides of the Bs binary toxin. When tested against A. aegypti, C. pipiens and A. stephensi, the toxicity of the recombinant was no better than that of either the parental Bti or Bs strains. In the above study, Bs promoters were used to express the
Bs binary toxin in Bti, and none of the enhancing elements identified after this study was published were present in the plasmid used to produce the Bs binary toxin in Bti. Electron microscopy indicated that only small crystal of the binary toxin was produced in the Bti transformants. This could account for the lack of improved toxicity. More recently, we have taken a different strategy in which we use Bt promoters and genetic elements that enhance toxin synthesis in Bt to produce both Bs and Bt proteins in Bti. Using
this strategy, we have achieved significant improvement in the levels of Bt and Bs endotoxins synthesized in Bti and improvements in toxicity that were correspondingly higher against C. quinquefasciatus. Examples of two improved Bti strains will be used to illustrate this strategy. In the first, we constructed a strain of Bti that produced a combination of Cyt1A, Cry11B and the Bs Bin toxin, all in large quantities
(Park et al., 2003). To engineer this strain, we constructed two plasmids, each of which contained a different selectable

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Bs พิษไบนารีในเข้า กลยุทธ์ของการพัฒนา mosquitocidal แบคทีเรียผลิตพิษนารี Bs ในเข้ามีการใช้มากน้อยบ่อย เป็นหลักเนื่องจากเข้ามีสเปกตรัมโฮสต์กว้าง และมีประสิทธิภาพมากขึ้นกว่า Bs กับชนิดของยุงส่วนใหญ่แล้ว นอกจากนี้ Bs มีประสิทธิภาพมากขึ้น และยังคงดีกว่าเข้าในน้ำเสีย การปรับปรุงดังนั้น สเปกตรัมโฮสต์ และความเป็นพิษของ Bs กับโปรตีนเข้ามีศักยภาพในการผลิตต้องใช้ดี recombinant มันไม่ได้ชัดเจนจุดนี้โฮสต์ซึ่งเป็นการเพิ่มประสิทธิภาพการผลิตพิษ และบรรลุการควบคุมยุง broad-spectrum มันอาจจะเข้าว่าส่วนชุด endotoxin เป้าหมาย และสถานการณ์ของระบบนิเวศและ Bs คน แต่ผลิต Bsสารพิษที่ไบนารีในเข้ากับของเสริมพิษปกติ โดยเฉพาะอย่างยิ่งใช้บางองค์ประกอบส่งเสริม แสดงว่ามีประสิทธิภาพมาก recombinants ที่สามารถสร้างเซลล์โฮสต์ใช้ Bt ในการศึกษาครั้งแรกที่ผลิตสารพิษ Bs ในเข้า พิษไบนารีของ Bs 1593 ถูกโคลนเป็นเวกเตอร์รถpBU4, pGSP10 ผลผลิต (Bourgouin และ al., 1990) Plasmid นี้ถูกแล้วเปลี่ยนเป็นสายพันธุ์ 4QS-72 ของเข้า ต้องใช้ที่ประกอบด้วย plasmid ขนาดใหญ่ที่เข้ารหัส endotoxins Cyt และร้องซึ่งมักพบในชนิดย่อยนี้เท่านั้น วิเคราะห์สายพันธุ์เข้า recombinant แสดงให้เห็นว่า มันผลิตสารพิษเข้ามาตรฐานจำนวนปกติพร้อมกับเปปไทด์ 51.4-kDa และ 41.9 kDa ของพิษนารี Bs เมื่อนำมาทดสอบกับ A. aegypti, C. pipiens และ A. stephensi ความเป็นพิษของวททชถูกไม่ดีกว่าของอย่างใดอย่างหนึ่งผู้ปกครองเข้าหรือ Bs สายพันธุ์ ในการศึกษาข้างต้น Bs ก่อถูกใช้เพื่อแสดงการBs พิษไบนารีในไทยธนาคาร และไม่มีการส่งเสริมองค์ประกอบระบุหลังจากการศึกษานี้ถูกตีพิมพ์ขึ้นใน plasmid ที่ใช้ในการผลิตสารพิษ Bs ไบนารีในเข้า อิเล็กตรอน microscopy ระบุว่า คริสตัลขนาดเล็กเฉพาะสารพิษไบนารีถูกผลิตใน transformants เข้า นี้สามารถบัญชีสำหรับขาดความเป็นพิษดีขึ้น เมื่อเร็ว ๆ นี้ เราได้นำกลยุทธ์ต่าง ๆ ที่เราใช้ Bt ก่อและองค์ประกอบทางพันธุกรรมที่สังเคราะห์สารพิษบีทีเพื่อผลิตโปรตีน Bs และ Bt ในเข้าเพิ่ม โดยใช้กลยุทธ์นี้ เราได้รับปรับปรุงอย่างมีนัยสำคัญในระดับของบีทีและบีเอส endotoxins สังเคราะห์เข้าและปรับปรุงในความเป็นพิษที่สูงขึ้นตามลำดับกับ C. quinquefasciatus ตัวอย่างของสองสายพันธุ์เข้าที่ปรับปรุงจะถูกใช้เพื่อแสดงให้เห็นถึงกลยุทธ์นี้ ในครั้งแรก เราสร้างขึ้นต้องใช้เข้าที่ผลิต Cyt1A, Cry11B และ พิษช่อง Bs ในปริมาณมาก(สวนร้อยเอ็ด al., 2003) ให้วิศวกรต้องใช้นี้ เราสร้างสอง plasmids ซึ่งประกอบด้วยความแตกต่างกันสามารถเลือกได้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Bs พิษไบนารีใน Bti
กลยุทธ์ของการปรับปรุง mosquitocidal แบคทีเรียโดยการผลิตสารพิษไบนารี Bs ใน Bti ถูกนำมาใช้มากน้อยบ่อยเพราะ Bti แล้วมีคลื่นความถี่โฮสต์ในวงกว้างและมีประสิทธิภาพมากขึ้นกว่าชัดที่สุดกับสายพันธุ์ยุง นอกจากนี้ Bs มีประสิทธิภาพมากขึ้นและยังคงดีกว่า Bti ปนเปื้อนในน้ำดังนั้นการปรับปรุงคลื่นความถี่โฮสต์และความเป็นพิษของ Bs กับโปรตีน Bti
ได้ที่มีศักยภาพในการผลิตสายพันธุ์recombinant ที่ดีเยี่ยม มันไม่ได้เป็นที่ชัดเจนที่จุดซึ่งเป็นเจ้าภาพที่ดีที่สุดสำหรับการเพิ่มประสิทธิภาพการผลิตสารพิษและบรรลุการควบคุมยุงกว้างสเปกตรัมนี้ อาจเป็นได้ว่า Bti ที่ดีที่สุดสำหรับบางคนรวมกัน endotoxin เป้าหมายและสถานการณ์ของระบบนิเวศและ Bs สำหรับคนอื่น ๆ แต่การผลิต Bs
พิษไบนารีใน Bti พร้อมกับเติมเต็มสารพิษตามปกติโดยเฉพาะอย่างยิ่งการใช้บางส่วนขององค์ประกอบการเสริมสร้างแสดงให้เห็นว่าโคที่มีประสิทธิภาพมากที่ใช้บาทเป็นเซลล์โฮสต์สามารถสร้าง ในการศึกษาครั้งแรกที่สารพิษ Bs มีการผลิตใน Bti, สารพิษไบนารีของ Bs 1593 เป็นโคลนเป็นเวกเตอร์รถรับส่ง
pBU4 ยอม pGSP10 (Bourgouin et al., 1990) พลาสมิดนี้ถูกเปลี่ยนแล้วเป็นสายพันธุ์ 4QS-72 ของ Bti สายพันธุ์เท่านั้นที่มีพลาสมิดที่มีขนาดใหญ่การเข้ารหัส Cyt และ Cry endotoxins มักจะพบในชนิดย่อยนี้ การวิเคราะห์สายพันธุ์ recombinant Bti แสดงให้เห็นว่ามันผลิตสารพิษ Bti มาตรฐานในปริมาณที่ปกติพร้อมกับ-51.4 กิโลดาลตันและเปปไทด์ 41.9- กิโลดาลตันของสารพิษไบนารี Bs เมื่อทดสอบกับยุงลายเอ, ซีและ pipiens stephensi A. , ความเป็นพิษของ recombinant ก็ไม่ได้ดีไปกว่าของทั้งผู้ปกครอง Bti หรือสายพันธุ์ Bs ในการศึกษาดังกล่าวข้างต้นก่อการ Bs
ถูกนำมาใช้ในการแสดงพิษไบนารีBs ใน Bti และไม่มีองค์ประกอบเสริมสร้างระบุหลังจากการศึกษานี้ถูกตีพิมพ์ที่ถูกนำเสนอในพลาสมิดที่ใช้ในการผลิตสารพิษไบนารี Bs ใน Bti กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนชี้ให้เห็นว่าคริสตัลขนาดเล็กเพียงหนึ่งเดียวของสารพิษไบนารีผลิตใน transformants Bti ซึ่งอาจบัญชีสำหรับการขาดของความเป็นพิษที่ดีขึ้น เมื่อเร็ว ๆ นี้เราได้นำกลยุทธ์ที่แตกต่างกันในการที่เราจะใช้ก่อการบาทและองค์ประกอบทางพันธุกรรมที่ช่วยเพิ่มการสังเคราะห์สารพิษในบาทในการผลิตทั้ง Bs และโปรตีนบาทใน Bti การใช้กลยุทธ์นี้เรามีความสำคัญในการปรับปรุงระดับของบาทและ Bs endotoxins สังเคราะห์ใน Bti และการปรับปรุงในความเป็นพิษที่มีสูงขึ้นตามลําดับกับซี quinquefasciatus
ตัวอย่างของทั้งสองสายพันธุ์ที่ดีขึ้น Bti จะใช้ในการแสดงให้เห็นถึงกลยุทธ์นี้ ในครั้งแรกที่เราสร้างสายพันธุ์ของ Bti ที่ผลิตรวมกันของ Cyt1A ที่ Cry11B และสารพิษถัง Bs ทั้งหมดในปริมาณมาก
(พาร์ et al., 2003) วิศวกรสายพันธุ์นี้เราสร้างพลาสมิดสองแต่ละที่มีอยู่เลือกที่แตกต่างกัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ไบนารี พิษใน BS อะ
กลยุทธ์ของการพัฒนา mosquitocidal แบคทีเรียโดยการผลิต BS ไบนารี พิษในต่ำมีการใช้มากน้อยบ่อย เป็นหลัก เพราะสามารถมีคลื่นความถี่ที่กว้างและโฮสต์ที่มีประสิทธิภาพมากกว่า BS กับสายพันธุ์ยุงมากที่สุด นอกจากนี้ , BS มีประสิทธิภาพมากขึ้นและดีกว่าสามารถยังคงอยู่ในมลพิษน้ำการปรับปรุงเพื่อให้โฮสต์สเปกตรัมและความเป็นพิษของ BS มีโปรตีนต่ำมีศักยภาพในการผลิตรีคอมบิแนนท์
สายพันธุ์ที่ดีเยี่ยม . มันไม่ชัดเจนที่จุดนี้โฮสต์ซึ่งเป็นที่ดีที่สุดสำหรับการเพิ่มประสิทธิภาพการผลิตสารพิษและบรรลุการควบคุมยุงเหล่านี้ . มันอาจจะสามารถเป็นดีที่สุดสำหรับบางชุดนโดท็อกซิน เป้าหมายและสภาพทางนิเวศวิทยาและ BS สำหรับคนอื่น ๆแต่การผลิตสารพิษใน BS
เลขฐานสองพร้อมกับเติมเต็มของสารพิษในปริมาณปกติ โดยเฉพาะอย่างยิ่งการใช้บางส่วนของการเพิ่มองค์ประกอบ พบว่า มีประสิทธิภาพมาก recombinants ที่ใช้ BT เป็นเซลล์โฮสต์สามารถสร้าง ในการศึกษาครั้งแรกที่ BS สารพิษที่ถูกผลิตใน BTI , สารพิษไบนารีของ BS 1490 ถูกโคลนเข้าไปรับส่งฟรี
pbu4 หยุ่น pgsp10 ( bourgouin et al . , 1990 )พลาสมิดนี้ได้กลายเป็น 4qs-72 เมื่อย BTI , สายพันธุ์ที่ประกอบด้วยพลาสมิดขนาดใหญ่การเข้ารหัส cyt และร้องไห้ถือเซลล์มักจะพบในสายพันธุ์ การวิเคราะห์สายพันธุ์พบว่ารีคอมบิแนนท์สามารถผลิตมาตรฐานต่ำสารพิษในปริมาณที่ปกติ พร้อมกับ 51.4-kda และ 41.9 - แยกเปปไทด์ของ BS ไบทอกซิน เมื่อทดสอบกับลูกน้ำยุงลาย . . . . .pipiens และ A . stephensi , ความเป็นพิษของรีคอมบิแนนท์ดีกว่าที่ทั้งผู้ปกครอง Bti หรือมาตรฐานสายพันธุ์ ในการศึกษา , BS โปรถูกใช้เพื่อแสดง
BS ไบนารี พิษในต่ำ และไม่มีการเพิ่มองค์ประกอบระบุหลังจากการศึกษานี้ถูกตีพิมพ์อยู่ในพลาสมิดที่ใช้ผลิตไบนารี พิษใน BS อะ .กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนชนิดส่องกราด พบว่าผลึกขนาดเล็กของสารพิษไบนารีถูกผลิตในพลาสมิดอะ . นี้อาจบัญชีสำหรับการขาดการปรับปรุงเป็นพิษ เมื่อเร็วๆ นี้ เราได้นำกลยุทธ์ต่าง ๆที่เราใช้โปรโมเตอร์ BT และพันธุกรรมขององค์ประกอบที่เพิ่มการสังเคราะห์สารพิษใน BT จะผลิตทั้ง BS และ BT โปรตีนต่ำ .
ใช้กลยุทธ์นี้เราได้รับการปรับปรุงอย่างมีนัยสำคัญในระดับของ BT และ BS ถือเซลล์สังเคราะห์ใน Bti และการปรับปรุงในพิษที่ถูกดับที่สูงขึ้นต่อ C โดย . ตัวอย่างของทั้งสองสามารถปรับปรุงสายพันธุ์จะถูกใช้เพื่อแสดงให้เห็นถึงกลยุทธ์นี้ ในตอนแรก เราสามารถสร้างสายพันธุ์ที่ผลิตรวมกันของ cyt1a cry11b , และ BS บินพิษทั้งหมดใน
ปริมาณมาก ( ปาร์ค et al . , 2003 ) วิศวกรสายพันธุ์นี้ เราสร้างสอง ) ซึ่งแต่ละแบบที่แตกต่างกันเลือก