2.2. Cuticle and bulk chitin preparation
The preparation of chitin exoskeletons was adapted fromseveral different previously described protocols (Announcement,1995; Percot, 2015). In brief, insects/arthropods were either leftwhole or dissected; washed three times in dH2O and then pro-cessed (Fig. 1) with an acidic treatment in 1 M HCL at 65◦C,overnight for larger/thicker specimens or 1 hr for smaller/thinnersamples; followed by several washes in dH20; this was fol-lowed by a basic treatment of 1 M NaOH solution at 65◦C,overnight; followed by several large volume washes in dH20.Large volume washes are necessary to remove all salts from thesample. The samples were dehydrated in an ethanol series: 20%,50%, 70%, 84%, 90%, 95% for 10–15 min and into 100% ethanolovernight, and then we allowed the solvent to evaporate for finalpreparation prior to imaging. For comparison and control wealso performed bulk chitin preparations using a similar methodFig
2.2. หนังและจำนวนมากการเตรียมไคทินการเตรียมไคทิน exoskeletons ถูกปรับ fromseveral อื่นอธิบายไว้ก่อนหน้านี้โพรโทคอล (ประกาศ 1995 Percot, 2015) สรุป แมลง/arthropods ถูก leftwhole อย่างใดอย่างหนึ่ง หรือ dissected ล้าง 3 ครั้งใน dH2O แล้วโป cessed (รูปที่ 1) ด้วยการรักษา 1 M HCL เป็นกรดที่ 65◦C ค้างคืน สำหรับตัวอย่างขนาดใหญ่หนา หรือ 1 ชม.สำหรับขนาด เล็ก/thinnersamples ตาม ด้วยล้างหลายใน dH20 นี้เป็น lowed fol โดยการรักษาพื้นฐาน 1 M NaOH ละลายที่ 65◦C ข้าม คืน ตาม โดยจำนวนมากหลาย ความใน dH20.Large ปริมาณความจำเป็นเพื่อเอาเกลือทั้งหมดจาก thesample ตัวอย่างที่อบแห้งในชุดมีเอทานอล: 20%, 50%, 70%, 84%, 90%, 95% 10 – 15 นาที และ ใน ethanolovernight 100% แล้ว เราอนุญาตให้ใช้ตัวทำละลายที่ระเหยสำหรับ finalpreparation ก่อนที่จะถ่ายภาพ สำหรับผลิตภเปรียบเทียบและควบคุมดำเนินการเตรียมไคทินจำนวนมากที่ใช้ methodFig คล้าย
การแปล กรุณารอสักครู่..
2.2 หนังกำพร้าและเป็นกลุ่มไคตินการเตรียมความพร้อมในการจัดทำเปลือกไคตินถูกนำมาดัดแปลง fromseveral โปรโตคอลที่แตกต่างกันอธิบายไว้ก่อนหน้า (ประกาศ, 1995; Percot 2015)
ในช่วงสั้น ๆ แมลง / รพทั้ง leftwhole หรือชำแหละ; ล้างสามครั้งใน dH2O แล้วโปร cessed (รูปที่ 1). ที่มีการรักษาความเป็นกรดใน 1 M HCL ที่65◦Cค้างคืนสำหรับขนาดใหญ่ / ตัวอย่างหนาหรือ 1 ชั่วโมงสำหรับขนาดเล็ก / thinnersamples; ตามด้วยการล้างหลาย dH20; นี้ตามมา-lowed โดยการรักษาพื้นฐานของการแก้ปัญหา M 1 NaOH ที่65◦Cค้างคืน; ตามด้วยการล้างปริมาณมากในหลาย dH20.Large ล้างปริมาณที่มีความจำเป็นที่จะเอาเกลือจาก thesample กลุ่มตัวอย่างที่มีการคายน้ำในซีรีส์เอทานอล 20%, 50%, 70%, 84%, 90%, 95% ประมาณ 10-15 นาทีและเป็น 100% ethanolovernight และจากนั้นเราได้รับอนุญาตให้ทำละลายจะระเหยสำหรับ finalpreparation ก่อนที่จะมีการถ่ายภาพ . สำหรับการเปรียบเทียบและการควบคุมการดำเนินการเตรียมการ wealso ไคตินจำนวนมากโดยใช้ methodFig ที่คล้ายกัน
การแปล กรุณารอสักครู่..