The wild-type phytases from the Asp

The wild-type phytases from the Aspergillus niger strains NRRL 3135 and T213 display a three-fold difference in specific activity (103 versus 32 U/mg protein), despite only 12 amino acid differences that are distributed all over the sequence of the protein. Of the 12 divergent positions, three are located in or close to the substrate binding site. Site-directed mutagenesis of these residues in A. niger T213 phytase showed that the R297Q mutation (R in T213, Q in NRRL 3135) fully accounts for the differences in catalytic properties observed. Molecular modelling revealed that R297 may directly interact with a phosphate group of phytic acid. The fact that this presumed ionic interaction – causing stronger binding of substrates and products – correlates with a lower specific activity indicates that product (myo-inositol pentakisphosphate) release is the rate-limiting step of the reaction.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Phytases ป่าชนิดจากสายพันธุ์ Aspergillus ไนเจอร์ NRRL 3135 และ T213 แสดงความแตกต่างในกิจกรรมเฉพาะ (103 เมื่อเทียบกับโปรตีน 32 U/mg), three-fold แม้ มีความแตกต่างของกรดอะมิโน 12 เท่านั้นที่กระจายผ่านลำดับของโปรตีนทั้งหมด ตำแหน่งแตกต่าง 12 สามอยู่ใน หรืออยู่ใกล้กับพื้นผิวรวมกัน สังเกตความแตกต่างในคุณสมบัติของตัวเร่งปฏิกิริยา mutagenesis กำกับเว็บไซต์เหล่านี้ตกค้างใน T213 ไนเจอร์อ.โอสเตบิลพบว่า การกลายพันธุ์ R297Q (R ใน T213, Q ใน NRRL 3135) เต็มบัญชีสำหรับ แบบจำลองโมเลกุลเปิดเผยว่า R297 อาจโต้ตอบโดยตรงกับกลุ่มฟอสเฟตกรดไฟติก ความจริงที่ว่านี้สันนิษฐานว่า ไอออนโต้ –ก่อให้เกิดการแข็งรวมของพื้นผิวและผลิตภัณฑ์ – คู่กับกิจกรรมเฉพาะด้านล่าง ระบุว่า รุ่นของผลิตภัณฑ์ (myo-ทอ pentakisphosphate) ขั้นจำกัดอัตราของปฏิกิริยา

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

phytases ชนิดป่าจากเชื้อรา Aspergillus ไนเจอร์สายพันธุ์ NRRL 3135 และ T213 แสดงความแตกต่างสามเท่าในกิจกรรมที่เฉพาะเจาะจง (103 เทียบกับ 32 U / mg โปรตีน) แม้จะมีความแตกต่างของกรดอะมิโนเพียง 12 ที่มีการกระจายทั่วลำดับของโปรตีน ในตำแหน่งที่แตกต่างกัน 12 สามจะอยู่ในหรือใกล้เคียงกับเว็บไซต์ที่มีผลผูกพันสารตั้งต้น ฉับเว็บไซต์กำกับของสารตกค้างเหล่านี้ในประเทศไนเจอร์ A. T213 phytase แสดงให้เห็นว่าการกลายพันธุ์ R297Q (R ใน T213, Q ใน NRRL 3135) อย่างเต็มที่บัญชีสำหรับความแตกต่างในคุณสมบัติของตัวเร่งปฏิกิริยาที่สังเกต การสร้างแบบจำลองโมเลกุลเปิดเผยว่า R297 โดยตรงอาจโต้ตอบกับกลุ่มฟอสเฟตของกรดไฟติก ความจริงที่ว่านี้มีปฏิสัมพันธ์ไอออนิกสันนิษฐาน - ก่อให้เกิดความผูกพันที่แข็งแกร่งของพื้นผิวและผลิตภัณฑ์ - ความสัมพันธ์กับกิจกรรมที่เฉพาะเจาะจงต่ำแสดงว่าผลิตภัณฑ์ (pentakisphosphate Myo-ทอ) เปิดตัวเป็นขั้นตอนการ จำกัด อัตราการเกิดปฏิกิริยา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ของ phytases จาก Aspergillus niger และสายพันธุ์ NRRL 135 t213 แสดงสามพับ ความแตกต่างของกิจกรรมที่เฉพาะเจาะจง ( 103 เมื่อเทียบกับ 32 U / mg protein ) แม้เพียง 12 กรดอะมิโนแตกต่าง ที่กระจายไปในการเรียงลำดับของโปรตีน ของ 12 อเนกตำแหน่งสามตั้งอยู่ในหรือใกล้กับพื้นผิวรวมเว็บไซต์ การเปลี่ยนแปลงเหล่านี้ในเว็บไซต์โดยตรงของ A . niger t213 และพบว่า r297q การกลายพันธุ์ ( r t213 Q ใน NRRL 135 ) พร้อมบัญชีสำหรับความแตกต่างในคุณสมบัติการเร่งปฏิกิริยา ) แบบจำลองโมเลกุล พบว่า r297 โดยตรงอาจโต้ตอบกับกลุ่มฟอสเฟตของกรดไฟติก . ความจริงที่ว่านี้สันนิษฐานว่าการทำให้แข็งแกร่ง ( ไอออน ) และผลิตภัณฑ์ที่เกี่ยวข้องกับพื้นผิวและกว่ากิจกรรมแสดงเฉพาะผลิตภัณฑ์ที่ ( เมียวไอโนซิทอล pentakisphosphate ) ปล่อยอัตราการขั้นตอนของปฏิกิริยา