Bioreactor cultivations were performed in a 2-L bioreactor
(BioFlo 110, New Brunswick Sci., NJ, USA) with an initial working
volume of 1 L at 30 C and an aeration rate of 1 Lpm. Agitation
was automatically adjusted to keep dissolved oxygen tension
(DOT) above 10% via an agitation cascade (from 350 to 500 rpm).
Excessive foam formation was prevented by automatic addition
of diluted (1:10) Y-30 emulsion (Sigma–Aldrich, Germany). The
bioreactor was equipped with a pH meter (Mettler Toledo,
Switzerland) and a polarographic dissolved oxygen electrode(InPro 6830, Mettler Toledo, Switzerland) for continuous on-line
monitoring of pH and DOT values, respectively.
A two-stage pH-shifted bioconversion strategy was adopted as
previously reported (Alonso et al., 2011). The strategy consisted in
controlling pH above 6.5 (pH was left uncontrolled above this value
during the growth phase and then maintained at 6.5) by means of
computer-controlled peristaltic pumps via automatic addition of
4 M NaOH. The seed culture was obtained by harvesting biomass
(after centrifugation at 11,000g for 10 min) from a NB shake-flask
culture and re-suspending cells in a 500 mL Erlenmeyer flask containing
100 mL of diluted sweet whey. These cultures were subsequently
grown at 250 rpm in an orbital shaker at 30 C for 12 h
and then employed as seed culture in the bioreactor at 30% (v/v)
containing undiluted sweet whey. A constant feeding rate of
16.8 mL/h (3.36 g/L h) for lactose, glucose and glycerol feed solutions
(200 g/L, 0.1 L) was employed in fed-batch cultivations for
6 h from 10 until 16 h.
เครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพที่เพาะปลูกได้ดำเนินการใน 2-L เครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพ
(BioFlo 110, นิวบรันวิทย์., NJ, สหรัฐอเมริกา)
กับการทำงานครั้งแรกปริมาณ1 ลิตรที่ 30 องศาเซลเซียสและอัตราการให้อากาศ 1 Lpm
กวนถูกปรับโดยอัตโนมัติเพื่อให้ความตึงเครียดออกซิเจนละลาย
(DOT) สูงกว่า 10% ผ่านน้ำตกกวน (350-500 รอบต่อนาที).
รูปแบบโฟมที่มากเกินไปได้รับการป้องกันโดยอัตโนมัตินอกจากนี้การปรับลด (01:10) Y-30 อิมัลชัน (Sigma-Aldrich เยอรมนี) เครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพเป็นอุปกรณ์ที่มีค่า pH เมตร (Mettler Toledo, วิตเซอร์แลนด์) และอิเล็กโทรออกซิเจนละลายน้ำโพลาโรกราฟิก (InPro 6830, Mettler Toledo วิตเซอร์แลนด์) ต่อเนื่องในสายการตรวจสอบค่าpH และค่านิยมจุดตามลำดับ. สองขั้นตอนค่า pH เปลี่ยน กลยุทธ์ทางชีวภาพเป็นลูกบุญธรรมรายงานก่อนหน้านี้(อลอนโซ่ et al., 2011) กลยุทธ์ประกอบด้วยการควบคุมค่า pH ดังกล่าวข้างต้น 6.5 (pH ถูกทิ้งไว้ข้างต้นไม่สามารถควบคุมค่านี้ในระหว่างขั้นตอนการเจริญเติบโตและการบำรุงรักษาแล้วที่6.5) โดยวิธีการของคอมพิวเตอร์ควบคุมปั๊มperistaltic ผ่านนอกจากอัตโนมัติ4 M NaOH วัฒนธรรมเมล็ดพันธุ์ที่ได้รับจากชีวมวลเก็บเกี่ยว(หลังจากการหมุนเหวี่ยงที่ 11,000g เป็นเวลา 10 นาที) จาก NB เขย่าขวดวัฒนธรรมและre-ระงับเซลล์ใน 500 มิลลิลิตรขวด Erlenmeyer มี100 มิลลิลิตรเวย์หวานเจือจาง วัฒนธรรมเหล่านี้ถูกต่อมาเติบโตที่ 250 รอบต่อนาทีในเครื่องปั่นวงโคจรที่ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 12 ชั่วโมงและมีงานทำแล้วเป็นวัฒนธรรมเมล็ดในเครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพที่30% (v / v) มีเวย์หวานเจือปน อัตราการให้อาหารอย่างต่อเนื่องของ16.8 มิลลิลิตร / ชั่วโมง (3.36 กรัม / ลิตรต่อชั่วโมง) สำหรับแลคโตสกลูโคสและกลีเซอรอลโซลูชั่นอาหาร(200 กรัม / ลิตร, 0.1 ลิตร) ทำงานอยู่ในที่เพาะปลูกอาหารชุดสำหรับ6 ชั่วโมงตั้งแต่วันที่ 10 จนถึงวันที่ 16 ชั่วโมง
การแปล กรุณารอสักครู่..

แบบการเพาะใน 2-l (
( bioflo 110 , บรุนซ์ใหม่ Sci . , NJ , USA ) โดยเริ่มทำงาน
ปริมาณลิตร 30 C และเพิ่มอัตรา 1 แอลพีเอ็ม . การปรับโดยอัตโนมัติเพื่อให้
คือภาวะออกซิเจน ( dot ) สูงกว่า 10% ผ่านน้ำตก ( จาก 350 อัตราการกวน 500 รอบต่อนาที ) .
การเกิดฟองป้องกันโดยอัตโนมัติมากกว่า 2
เมื่อ ( 110 ) y-30 อิมัลชัน ( Sigma ) ดิช เยอรมนี )
( เป็นอุปกรณ์ที่มีเครื่องวัด ( เม็ตเลอร์ Toledo ,
สวิตเซอร์แลนด์ ) และออกซิเจนที่ขั้วของโพลาโรกราฟฟี่ ( Inpro 6830 เม็ตเลอร์ , Toledo , สวิตเซอร์แลนด์ ) สำหรับการตรวจสอบออนไลน์
อย่างต่อเนื่องของ pH และค่าจุด ตามลำดับ .
2 ขั้นตอน ( pH เปลี่ยนกลยุทธ์การประกาศใช้
รายงานก่อนหน้านี้ ( อลอนโซ่ et al . , 2011 )กลยุทธ์ที่ใช้ในการควบคุมค่า pH 6.5 (
ข้างบนซ้ายไม่มีการควบคุมค่า pH สูงกว่านี้
ในระหว่างขั้นตอนการเจริญเติบโตและรักษาที่ 6.5 ) โดยควบคุมผ่านปั๊ม peristaltic
เพิ่มอัตโนมัติของ
4 M NaOH การเพาะเมล็ดได้โดยการเก็บชีวมวล
( หลังการปั่นเหวี่ยงที่ 11000g 10 นาที ) จาก NB เขย่าขวด
วัฒนธรรมและระงับเซลล์ในขวดบรรจุ 500 มิลลิลิตร เออร์เลนเมเยอร์
100 ml เมื่อ whey หวาน วัฒนธรรมเหล่านี้ในภายหลัง
โตที่ 250 รอบต่อนาทีในเครื่องปั่นโคจรที่ 30 C 12 H
แล้วใช้เพาะเมล็ดในถังปฏิกรณ์ที่ 30 % ( v / v )
ที่มีเจือปนหวาน เวย์ อัตราการให้อาหารคงที่ของ
/ H 16.8 มิลลิลิตร ( 3.36 g / l H ) สำหรับแลคโตส กลูโคส และโซลูชั่นฟีรอล
( 200 กรัมต่อลิตร0.1 ลิตร ) ใช้ชุดเพาะเลี้ยงสำหรับ
6 H จาก 10 ถึง 16 ชั่วโมง
การแปล กรุณารอสักครู่..
