3.4. DDX21 suppresses DENV replicat

3.4. DDX21 suppresses DENV replication
We set up knockdown and over-expression conditions for
DDX21 respectively followed by DENV infection, and then analyzed
the viral RNA level by RT-qPCR. The results showed that DDX21
knockdown resulted in an increase in DENV RNA level (Fig. 4A)
whereas DENV levels were reduced in DDX21 overexpressing cells
(Fig. 4B). These results demonstrate that DDX21 negatively regulates
DENV replication in cells.
Next we evaluated the role of DDX21 in the innate immune
response. We used the dual-luciferase assay to monitor the IFN-bpromoter
activity and interferon stimulated response element
(ISRE) activity in DDX21-overexpressing 293T cells during DENV
infection. The reporter assays showed that the transcription level of
IFN-b and ISRE was increased by approximately 1.6- and 1.3- fold
respectively in DDX21 overexpressed cells compared to vector
control group (Fig. 4C). After DENV infection, the transcription level
of IFN-b and ISRE was increased greatly by approximately 10.9- and
15.2- fold respectively in DDX21 overexpressed cells compared to
control group (Fig. 4D). These results suggested that DDX21 may
contribute to IFN-b production and ISRE activation during the early
stage of DENV infection, thereby inhibiting DENV replication.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3.4. DDX21 ลด DENV จำลองเราตั้งเงื่อนไขถอดและแสดงออกมากเกินไปDDX21 ตามลำดับตาม ด้วยการติดเชื้อ DENV และวิเคราะห์แล้วระดับ RNA ไวรัส โดย RT qPCR แสดงผล DDX21 ที่ถอดผลในการเพิ่มระดับ DENV RNA (รูปที่ 4A)ในขณะที่ถูกลดระดับ DENV ในเซลล์ overexpressing DDX21(รูปที่ 4B) ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นว่า DDX21 ส่งออกDENV การจำลองแบบในเซลล์ต่อไป เราประเมินบทบาทของ DDX21 ในภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติการตอบสนอง เราใช้ทดสอบ luciferase คู่การตรวจ IFN-bpromoterองค์ประกอบที่กระตุ้นการตอบสนองกิจกรรมและอินเตอร์เฟียรอนกิจกรรม (ISRE) ในเซลล์ DDX21 overexpressing 293T ระหว่าง DENVการติดเชื้อ Assays ข่าวแสดงให้เห็นว่าระดับการถอดรหัสIFN-b และ ISRE เพิ่มขึ้นโดยประมาณ 1.6 และ 1.3-พับตามลำดับใน DDX21 overexpressed เซลล์เทียบกับเวกเตอร์กลุ่มควบคุม (รูป 4C) หลังจากการติดเชื้อ DENV ระดับการถอดรหัสIFN-b และ ISRE เพิ่มขึ้นมาก โดยประมาณ 10.9 - และ15.2-พับในเซลล์ overexpressed เมื่อเทียบกับ DDX21 ตามลำดับกลุ่มควบคุม (รูป 4D) ผลลัพธ์เหล่านี้แนะนำว่า อาจ DDX21การเปิดใช้งาน ISRE ในช่วงต้นและผลิต IFN-bขั้นตอนของการติดเชื้อ DENV จึงยับยั้งการจำลองแบบ DENV

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3.4 DDX21 ยับยั้งการจำลองแบบ DENV
เราตั้งค่าล้มลงและมากกว่าการแสดงออกเงื่อนไขสำหรับการ
DDX21 ตามตามลำดับจากการติดเชื้อ DENV แล้ววิเคราะห์
ระดับอาร์เอ็นเอของไวรัสโดย RT-qPCR ผลการศึกษาพบว่า DDX21
ล้มลงส่งผลให้เพิ่มขึ้นในระดับอาร์เอ็นเอ DENV (รูป. 4A)
ในขณะที่ระดับ DENV ลดลงใน DDX21 overexpressing เซลล์
(รูป. 4B) ผลการศึกษานี้แสดงให้เห็นว่าในเชิงลบ DDX21 ควบคุม
การจำลองแบบ DENV ในเซลล์.
ต่อไปเราประเมินบทบาทของ DDX21 ในภูมิคุ้มกัน
ตอบสนอง เราใช้การทดสอบแบบ dual-luciferase ในการตรวจสอบ IFN-bpromoter
กิจกรรมและ interferon กระตุ้นการตอบสนององค์ประกอบ
(ISRE) กิจกรรมใน DDX21-293T overexpressing เซลล์ในช่วง DENV
การติดเชื้อ ตรวจผู้สื่อข่าวพบว่าระดับการถอดความจาก
IFN-B และ ISRE เพิ่มขึ้นประมาณ 1.6- และ 1.3- พับ
ตามลำดับใน DDX21 เซลล์ overexpressed เมื่อเทียบกับเวกเตอร์
กลุ่มควบคุม (รูป. 4C) หลังจากติดเชื้อ DENV ระดับถอดความ
ของ IFN-B และ ISRE เพิ่มขึ้นอย่างมากโดยประมาณ 10.9- และ
15.2- พับตามลำดับใน DDX21 เซลล์ overexpressed เมื่อเทียบกับ
กลุ่มควบคุม (รูป. 4D) ผลการศึกษานี้ชี้ให้เห็นว่า DDX21 อาจ
นำไปสู่การ IFN-B ผลิตและการเปิดใช้งาน ISRE ในช่วงต้น
ขั้นตอนของการติดเชื้อ DENV จึงยับยั้งการจำลองแบบ DENV

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3.4 . ddx21 ยับยั้ง denv ซ้ำเราตั้งค่า knockdown และการแสดงออกเงื่อนไขสำหรับddx21 ตามลำดับ รองลงมาคือ การติดเชื้อ denv แล้ววิเคราะห์ไวรัส RNA ระดับโดย RT qpcr . ผลการศึกษาพบว่า ddx21น็อคดาวน์ มีผลทำให้มีการเพิ่มขึ้นในระดับอาร์เอ็นเอ denv ( รูปที่ 4 )ส่วน denv ระดับลดลงใน ddx21 overexpressing เซลล์( ภาพที่ 4B ) ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นว่า ddx21 ลบควบคุมdenv ซ้ำในเซลล์ต่อไปเราประเมินบทบาทของ ddx21 ในเรื่องภูมิคุ้มกันการตอบสนอง เราใช้สองวิธีในการตรวจสอบหนึ่ง bpromoter ลูซิเฟอเรสกิจกรรมและกระตุ้นการทำลายองค์ประกอบ( isre ) กิจกรรมใน ddx21 overexpressing 293t เซลล์ใน denvการติดเชื้อ นักข่าว ) พบว่าระดับของบัณฑิตยสถานและ ifn-b isre เพิ่มขึ้น 1.6 - ประมาณ 1.3 เท่า และddx21 ตามลำดับในเซลล์เมื่อเทียบกับเวกเตอร์กลุ่มควบคุม ( ภาพที่ 4C ) หลังจากการติดเชื้อ denv , ระดับการถอดความของ ifn-b isre และเพิ่มขึ้นอย่างมาก โดยเฉลี่ยแล้วประมาณ15.2 เท่า ตามลำดับ เทียบกับ ddx21 เซลล์กลุ่มควบคุม ( รูป 4D ) ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า ddx21 อาจมีส่วนร่วมในการผลิตและการ ifn-b isre ในช่วงต้นขั้นตอนของการติดเชื้อ denv จึงยับยั้ง denv ซ้ำ