Immunohistochemistry
Immunohistochemistry was performed on 4 μm tissue slices in slides previously prepared with silane. The slices were incubated with primary antibodies anti-5-lypoxygenase (5-LO), anti-LTA4 hydrolase (LTA4H), anti-CysLT1 receptor, anti-CysLT2 receptor, anti-LTC4 synthase, anti-LTB4 receptor 2 (BLT2) (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, USA), and with proper secondary antibodies conjugated with biotin–streptavidin–peroxidase. The number of positive peribronchial leukocytes, as well as the percentage of epithelial area expressing each LT pathway marker was performed using a combined image analysis with point-counting technique (12, 13). Counting was performed in five airways for each animal of all experimental groups at 400× magnification. Stained peribronchial positive leukocytes were expressed as the number of positive cells per square millimeter (12, 13), whereas airway epithelium protein expression was represented as a percentage of positive area of the epithelium.
ImmunohistochemistryImmunohistochemistry ดำเนินการบนชิ้นเนื้อเยื่อμ m 4 ในภาพนิ่งก่อนหน้านี้ พร้อมกับไซเลน ชิ้นได้รับการกกกับแอนติบอดีหลักป้องกัน-5-lypoxygenase (5-LO), hydrolase ป้องกัน LTA4 (LTA4H), anti-CysLT1 รับ รับต่อต้าน-CysLT2 ป้องกัน LTC4 synthase รับ LTB4 ป้องกัน 2 (BLT2) (เทคโนโลยีชีวภาพซานตาครูซ ซานตาครูซ CA, USA), และ มีแอนติบอดีรองที่เหมาะสมที่ผันกับไบโอติน – streptavidin – ฮอส จำนวนเม็ดเลือดขาว peribronchial บวก และเปอร์เซ็นต์ของเยื่อบุผิวบริเวณแสดงแต่ละลิตรเดินเครื่องหมายดำเนินการโดยใช้การวิเคราะห์ภาพรวม ด้วยเทคนิคการนับจุด (12, 13) นับได้ดำเนินการใน 5 สายการบินสำหรับสัตว์แต่ละกลุ่มทดลองทั้งหมดที่กำลังขยาย× 400 เม็ดเลือดขาวบวก peribronchial ย้อมถูกแสดงเป็นจำนวนบวกเซลล์ต่อตารางมิลลิเมตร (12, 13), ในขณะที่การแสดงออกของโปรตีนเยื่อบุผิวทางเดินหายใจได้รับการแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ของพื้นที่บวกของ epithelium
การแปล กรุณารอสักครู่..
immunohistochemistry
immunohistochemistry ได้ดำเนินการเมื่อวันที่ 4 ไมครอนชิ้นเนื้อเยื่อในภาพนิ่งก่อนหน้านี้จัดทำขึ้นด้วยไซเลน ชิ้นถูกบ่มกับแอนติบอดีปฐมภูมิต่อต้าน-5-lypoxygenase (5-LO), ป้องกัน LTA4 hydrolase (LTA4H), ป้องกัน CysLT1 รับต่อต้าน CysLT2 รับต่อต้าน LTC4 เทสป้องกัน LTB4 รับ 2 (BLT2) ( ซานตาครูซเทคโนโลยีชีวภาพ, ซานตาครูซ, CA, USA) และมีแอนติบอดีรองที่เหมาะสมผันที่มีไบโอติน-สเต-peroxidase จำนวนของเม็ดเลือดขาว peribronchial บวกเช่นเดียวกับร้อยละของพื้นที่เยื่อบุผิวแสดงแต่ละเครื่องหมายทางเดิน LT ถูกดำเนินการโดยใช้การวิเคราะห์ภาพรวมด้วยเทคนิคจุดนับ (12, 13) นับได้ดำเนินการในห้าของสายการบินสำหรับการเลี้ยงสัตว์ของกลุ่มทดลองทั้งหมดในแต่ละที่ 400 ×ขยาย สีเม็ดเลือดขาวในเชิงบวก peribronchial ถูกแสดงเป็นจำนวนของเซลล์ในเชิงบวกต่อตารางมิลลิเมตร (12, 13) ในขณะที่การแสดงออกของโปรตีนเยื่อบุผิวทางเดินหายใจถูกแสดงเป็นร้อยละของพื้นที่ในเชิงบวกของเยื่อบุผิวที่
การแปล กรุณารอสักครู่..