Alfa-Amylase from germinating soybe

Alfa-Amylase from germinating soybean (Glycine max) seeds – Purification,characterization and sequential similarity of conserved and catalytic amino acid residues
Abstract
Starch hydrolysing from germinated soybeans seeds (Glycine max) has been purified 400-fold to electrophoretic homogeneity with a final specific activity of 384 units/mg. SDS-PAGE of the final preparation revealed a single protein band of 100 kDa, whereas molecular mass was determined to be 80 kDa by MALDI-TOF and gel filtration on superdex-200 (FPLC). The enzyme exhibited maximum activity at pH 5.5 and a pI value of 4.85. The energy of activation was determined to be 6.09 kcal/mol in the temperature range 25-85 ºC. Apparent michaelis constant (Km(app)) for starch was 0.71 mg/ml and turnover number (kcat) was 280 S-1 in 50 mM sodium acetate buffer, pH 5.5. Thermal in activation studies at 85 ºC showed first-order kinetics with rate constant (k) equal to 0.0063 min-1. Soybean Alfa-amylase showed high specificity for its primary supstrate starch. High similarity of Soybean Alfa-amylase with known amylases suggests that this Alfa-amylase belongs to glycosyl hydrolase family 13. Cereal Alfa-amylase have gained
importance due to their compatibility for biotechnological applications. Wide availability and easy puri- fication protocol make soybean as an attractive alternative for plant alfa-amylase. Soybean can be used as commercially viable source of a-amylase for various industrial applications.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

อัลฟาอะไมเลสจากงอกเมล็ดถั่วเหลือง (Glycine max) – บริสุทธิ์ สมบัติ และคล้ายคลึงตามลำดับของกรดอะมิโนภัต และปัจจัยตกค้างบทคัดย่อแป้ง hydrolysing จากเปลือกงอกถั่วเหลือง (Glycine max) ของเมล็ดได้บริสุทธิ์ homogeneity 400-fold electrophoretic ไปพร้อมกับกิจกรรมสุดท้ายของหน่วย 384 / mg. หน้า SDS ของการเตรียมการขั้นสุดท้ายเปิดเผยวงโปรตีนเดี่ยวของ 100 kDa ในขณะที่มวลโมเลกุลถูกกำหนดเป็น 80 kDa MALDI TOF และเจการกรองบน superdex-200 (FPLC) เอนไซม์นี้จัดแสดงกิจกรรมสูงสุดที่ pH 5.5 และค่า pI 4.85 พลังงานที่เปิดใช้งานที่ถูกกำหนดเป็น 6.09 กิโลแคลอรี/โมลในอุณหภูมิช่วง 25-85 ºC คงชัดเจน michaelis (Km(app)) สำหรับแป้ง 0.71 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร และเลขหมุนเวียน (kcat) 280 รายการ S-1 ในบัฟเฟอร์ 50 มม.โซเดียมอะซิเตท pH 5.5 ความร้อนในการเปิดใช้งานศึกษาที่ 85 ºC พบจลนพลศาสตร์ลำดับแรกกับค่าคงอัตรา (k) เท่ากับ 0.0063 1 นาที ถั่วเหลืองอัลฟาอะไมเลสแสดงความจำเพาะสูงสำหรับแป้งของหลัก supstrate คล้ายกันสูงของถั่วเหลืองอัลฟาอะไมเลสมี amylases รู้จักแนะนำว่า อัลฟาอะไมเลสเป็นนี้เป็นของครอบครัว hydrolase glycosyl 13 ได้รับธัญพืชอัลฟาอะไมเลสความสำคัญเนื่องจากการเข้ากันได้สำหรับกับการประยุกต์ ห้องพักกว้างและง่ายภูริ-fication โพรโทคอลให้ถั่วเหลืองเป็นทางเลือกน่าสนใจสำหรับพืชอัลฟาอะไมเลส ถั่วเหลืองสามารถใช้เป็นแหล่งข้อมูลเชิงพาณิชย์การเป็นอะไมเลสสำหรับงานอุตสาหกรรมต่าง ๆ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

อัลฟ่าอะไมเลสจากงอกถั่วเหลือง (Glycine สูงสุด) เมล็ด - ฟอกตัวละครและความคล้ายคลึงกันตามลำดับของการอนุรักษ์และการเร่งปฏิกิริยากรดอะมิโน
บทคัดย่อ
แป้งย่อยสลายจากเมล็ดงอกถั่วเหลือง (Glycine แม็กซ์) ได้รับการทำให้บริสุทธิ์ 400 เท่าเป็นเนื้อเดียวกันอิเลคกับกิจกรรมที่เฉพาะเจาะจงสุดท้าย 384 / หน่วยมิลลิกรัม ระบบ SDS-PAGE ของการเตรียมการขั้นสุดท้ายเผยวงเดียวโปรตีน 100 กิโลดาลตันในขณะที่มวลโมเลกุลมุ่งมั่นจะเป็น 80 กิโลดาลตันโดย MALDI-TOF และกรองเจล Superdex-200 (FPLC) เอนไซม์ที่มีฤทธิ์สูงสุดที่ pH 5.5 และค่า pI 4.85 พลังงานของการเปิดใช้งานมุ่งมั่นจะเป็น 6.09 kcal / mol ในช่วงอุณหภูมิ 25-85 องศาเซลเซียส Michaelis ชัดเจนคงที่ (กม (app)) สำหรับแป้ง 0.71 mg / ml และผลประกอบการจำนวน (kcat) เป็น 280 S-1 ใน 50 มิลลิบัฟเฟอร์โซเดียมอะซิเตท, พีเอช 5.5 ความร้อนในการศึกษาการเปิดใช้งานที่ 85 องศาเซลเซียสแสดงให้เห็นจลนศาสตร์ลำดับแรกที่มีอัตราคงที่ (k) เท่ากับ 0.0063 นาที 1 ถั่วเหลืองอัลฟาอะไมเลสแสดงให้เห็นความจำเพาะสูงสำหรับแป้ง supstrate หลัก ความคล้ายคลึงกันสูงของถั่วเหลืองอัลฟาอะไมเลสกับอะมัยเลสที่รู้จักกันนี้แสดงให้เห็นว่าอัลฟาอะไมเลสเป็น glycosyl hydrolase ครอบครัว 13. ธัญพืชอัลฟาอะไมเลสได้รับ
ความสำคัญเนื่องจากความเข้ากันได้ของพวกเขาสำหรับการใช้งานเทคโนโลยีชีวภาพ ว่างกว้างและง่ายต่อการตรวจโปรโตคอล puri- ทำให้ถั่วเหลืองเป็นทางเลือกที่น่าสนใจสำหรับโรงงานอัลฟ่าอะไมเลส ถั่วเหลืองสามารถใช้เป็นแหล่งที่มีศักยภาพในเชิงพาณิชย์ของอะไมเลสสำหรับงานอุตสาหกรรมต่างๆ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

อัลฟาอะไมเลสจากจากเมล็ดถั่วเหลือง ( Glycine max ) และการ วิเคราะห์ และความเหมือนลำดับของการอนุรักษ์และการตกค้างของกรดอะมิโนบทคัดย่อhydrolysing แป้งจากเมล็ดถั่วเหลือง ( Glycine max ) ได้รับ 400 พับเพื่อการตรวจวัดค่าให้กับกิจกรรมเฉพาะสุดท้ายของ 384 หน่วย / มิลลิกรัม การแก้ปัญหาของการเตรียมการขั้นสุดท้ายพบแถบโปรตีนเพียง 100 กิโลดาลตันในขณะที่โมเลกุลมวลที่ถูกกำหนดให้ 80 kDa และโดย maldi-tof gel filtration ใน superdex-200 ( fplc ) เอนไซม์มีฤทธิ์สูงสุดที่ pH 5.5 และปี่มูลค่า 4.85 . พลังงานของการกระตุ้นคือมุ่งมั่นที่จะเป็น 6.09 กิโลแคลอรีต่อโมล ในช่วงอุณหภูมิที่ 25-85 ชัดเจนมากº C คงที่ ( กม. ( app ) ) แป้งของ mg / ml และการหมุนเวียนวน ( kcat ) คือ 280 ที่สุดใน 50 มิลลิเมตรโซเดียมอะซิเตตบัฟเฟอร์ พีเอช 5.5 . ความร้อนในการศึกษาที่ 85 º C พบจลนศาสตร์ครั้งแรกกับค่าคงที่อัตรา ( k ) เท่ากับ 0.0063 min-1 . ถั่วเหลือง อัลฟาอะไมเลสพบว่ามีความจำเพาะสูง แป้ง supstrate หลักของมัน ความคล้ายคลึงกันสูงของถั่วเหลือง อัลฟาอะไมเลส กับ กลุ่ม พันธมิตรประชาชนเพื่อประชาธิปไตย รู้จักแสดงให้เห็นว่านี้อัลฟาอะไมเลสเป็นของ glycosyl ไฮโดรเลสครอบครัว 13 ธัญพืชอัลฟาอะไมเลส ได้รับความเข้ากันได้ของพวกเขาเนื่องจากการเทคโนโลยีชีวภาพ . ห้องพักกว้างและปุริ - ง่ายโปรโตคอล fication ทำให้ถั่วเหลืองเป็นทางเลือกที่น่าสนใจสำหรับแอลฟาอะไมเลสโรงงาน ถั่วเหลือง สามารถใช้เป็นแหล่งที่มาของ a-amylase ในเชิงพาณิชย์สำหรับการใช้งานในอุตสาหกรรมต่างๆ