The PCR reaction consisted of 10 ll

The PCR reaction consisted of 10 ll of Real Time 2 HS-PCR Mix SYBR A (A&A Biotechnology,
Poland), 1 ll of each forward and reverse primers (2 ll in the case of mcrA), and 2 ll of DNA template (1 ng/ll), with sterile double distilled water added to achieve a total volume of 20 ll. The initial denaturation lasted 3 min at 95 C and was followed by 40 cycles of the following incubation cycle: denaturation for 15 s at 95 C, primer annealing for 30 s at 55 C (61 C for dsrA and mcrA), and then product elongation for 30 s at 72 C. SYBR Green fluorescence detection was performed at the end of each primer annealing step. Amplicon specificity was confirmed via melting curve analysis of the qPCR end products

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ปฏิกิริยา PCR ประกอบด้วย 10 จะ SYBR ผสม HS PCR 2 เวลาจริง A และ A เทคโนโลยีชีวภาพโปแลนด์), 1 ll ของไพรเมอร์แต่ละข้างหน้า และย้อนกลับ (2 จะในกรณีของ mcrA), และ 2 ll แม่แบบดีเอ็นเอ (1 ฉบับ/จะ), กับน้ำกลั่นปลอดเชื้อคู่ที่เพิ่มเพื่อให้ได้ปริมาตรรวม 20 จะ Denaturation ครั้งแรกกินเวลา 3 นาทีที่ 95 C และตามมา ด้วย 40 รอบของรอบการกกไข่ต่อไปนี้: denaturation 15 s ที่ C 95 รองพื้นหลอม 30 s 55 C (61 C สำหรับ dsrA และ mcrA), และจากนั้นยืดตัวผลิตภัณฑ์ 30 s ที่ตรวจหาสารเรืองแสงสีเขียว SYBR C. 72 ทำที่รองพื้นแต่ละขั้นตอนการหลอม ความ Amplicon ได้รับการยืนยันผ่านละลายผลิตภัณฑ์สิ้น qPCR การวิเคราะห์โค้ง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ปฏิกิริยา PCR ประกอบด้วย 10 LL ของ Real Time 2? HS-PCR ผสม SYBR A (A & A เทคโนโลยีชีวภาพ
โปแลนด์) 1 LL ของแต่ละข้างหน้าและย้อนกลับไพรเมอร์ (2 LL ในกรณีของ mcrA) และ 2 LL ของแม่แบบดีเอ็นเอ (1 ng / LL) ด้วยการฆ่าเชื้อน้ำกลั่นคู่เพิ่ม เพื่อให้บรรลุปริมาณรวมของ 20 LL denaturation เริ่มต้นกินเวลา 3 นาทีที่ 95 C และตามมาด้วย 40 รอบของวงจรการบ่มต่อไปนี้:? denaturation สำหรับ 15 วินาทีที่ 95 C, การอบไพรเมอร์เป็นเวลา 30 วินาทีที่ 55 C (61 องศาเซลเซียสเป็นเวลา dsrA และ mcrA) แล้วยืดตัวสินค้าเป็นเวลา 30 วินาทีที่ 72 องศาเซลเซียส SYBR การตรวจสอบการเรืองแสงสีเขียวที่ได้ดำเนินการในตอนท้ายของแต่ละขั้นตอนการอบไพรเมอร์ amplicon เฉพาะเจาะจงได้รับการยืนยันที่ผ่านการวิเคราะห์โค้งละลายของผลิตภัณฑ์ที่สิ้นสุด qPCR