Subjects and methods
Subjects and toluene exposure
End-of-shift urine samples were collected from 13 male workers
occupationally exposed to toluene in a printing workshop. The
shift lasted from 9:00 a.m. until 5:00 p.m., including a 1-h lunch
break at noon. Time-weighted average (TWA) toluene exposure
concentrations in breathing-zone air were monitored by diusive
sampling using carbon cloth K-1500 (Toyobo, Osaka, Japan) as the
adsorbent (Hirayama and Ikeda 1979; Ikeda et al. 1984; Kasahara
and Ikeda 1987). The TWA exposure concentrations were distributed
in a wide range from 18 to 140 ppm. In addition, urine samples
were collected from 10 men in a clerical section who were not
occupationally exposed to any organic solvent and from 8 subjects
(6 men and 2 women) with glycosuria or proteinuria.
Urine collection and HPLC determination of urine for toluene
Acetonitrile (1 ml/bottle) was taken into 2.2-ml glass bottles for
HPLC determination (nominal capacity 1.5 ml; JASCO, Kyoto,
Japan). Immediately after urine had been sampled in a toluene-free
room, 1 ml of the urine sample was added to each bottle, and the
bottle was sealed tightly with a Te¯on septum and a plastic screw
cap. The bottle was stored at 4 °C until toluene determination.
Immediately before the determination, 100 ll methanol was added
to the bottle. The bottle was tightly closed and spun at 1600 g for
10 min to settle any suspended matter to the bottom. An aliquot
(35±70 ll) of the supernatant phase was introduced into the HPLC
system by means of automated sampling as described below.
When necessary it is also possible to add methanol to the acetonitrile
prior to urine addition in such a way that 1 ml urine is added
to 1.1 ml acetonitrile ± methanol (10:1, v/v) mixture. An additional
experiment showed that such a modi®ed procedure did not induce
any change in the effects of methanol and, therefore, in the analytical
results obtained with glycosuric samples as described in Results.
The HPLC system used consisted of a Shimadzu Model LC-10A
chromatograph connected to an automated liquid sampler (Shimadzu
81L-10AXL, Kyoto, Japan), a degasser (Shimadzu DGU2-
14A), a spectrophotometer (Shimadzu UV-VIS Detector Model
SPD-10A), a temperature controller for the detector (Shimadzu),
and a data processor (Shimadzu Chromato-processor Model
C-R7A Plus). The column (250 mm in length and 4.6 mm in diameter)
was packed with PRODIGY 5l ODS(3) 100A (Phenomenex,
Vas Torrance, Calif., USA) and was kept at 60 °C. A mixture
of acetonitrile (350 ml):60% perchloric acid (1 ml):phosphoric acid
(50 ll):deionized water (to a total volume of 1 l) was introduced
after thorough degassing (by ultrasonication) to the system as the
mobile phase. The mobile phase was allowed to ¯ow at 2.0 ml/min,
and the effluent was monitored at 191 nm. Care was taken to
achieve complete removal of foams from the ¯ow system. Each
determination was terminated within 30 min. A typical chromatogram
of urinalysis is shown in Fig. 1 in comparison with that of
standard toluene.
In some instances the toluene concentration in urine was adjusted
for creatinine concentration (Jackson 1966) or for a specific
gravity of urine of 1.016 (Rainsford and Lloyd Davies 1965).
Creatinine concentration and specific gravity were measured by
colorimetry and refractometry, respectively.
Subjects and methodsSubjects and toluene exposureEnd-of-shift urine samples were collected from 13 male workersoccupationally exposed to toluene in a printing workshop. Theshift lasted from 9:00 a.m. until 5:00 p.m., including a 1-h lunchbreak at noon. Time-weighted average (TWA) toluene exposureconcentrations in breathing-zone air were monitored by diusivesampling using carbon cloth K-1500 (Toyobo, Osaka, Japan) as theadsorbent (Hirayama and Ikeda 1979; Ikeda et al. 1984; Kasaharaand Ikeda 1987). The TWA exposure concentrations were distributedin a wide range from 18 to 140 ppm. In addition, urine sampleswere collected from 10 men in a clerical section who were notoccupationally exposed to any organic solvent and from 8 subjects(6 men and 2 women) with glycosuria or proteinuria.Urine collection and HPLC determination of urine for tolueneAcetonitrile (1 ml/bottle) was taken into 2.2-ml glass bottles forHPLC determination (nominal capacity 1.5 ml; JASCO, Kyoto,Japan). Immediately after urine had been sampled in a toluene-freeroom, 1 ml of the urine sample was added to each bottle, and thebottle was sealed tightly with a Te¯on septum and a plastic screwcap. The bottle was stored at 4 °C until toluene determination.Immediately before the determination, 100 ll methanol was addedto the bottle. The bottle was tightly closed and spun at 1600 g for10 min to settle any suspended matter to the bottom. An aliquot(35±70 ll) ของเฟส supernatant ถูกนำเข้าสู่การ HPLCระบบโดยใช้วิธีการสุ่มตัวอย่างแบบอัตโนมัติอธิบายไว้ด้านล่างเมื่อจำเป็น ก็ยังสามารถเพิ่มเมทานอล acetonitrileก่อนนี้ปัสสาวะในลักษณะ เพิ่มที่ปัสสาวะ 1 มิลลิลิตรการ 1.1 มิลลิลิตร acetonitrile ±เมทานอล (10:1, v/v) ส่วนผสม เพิ่มเติมทดลองพบว่า modi ® ed ตอนไม่ได้ก่อให้เกิดการเปลี่ยนแปลงใด ๆ ในผลกระทบของเมทานอล และ จึง ในการวิเคราะห์ทางผลลัพธ์ที่ได้กับตัวอย่าง glycosuric ตามที่อธิบายไว้ในผลลัพธ์ระบบ HPLC ที่ใช้ประกอบด้วยแบบ Shimadzu รุ่น LC-10Aเชื่อมต่อกับการ sampler ของเหลวแบบอัตโนมัติ (Shimadzu chromatograph81 L-10AXL เกียวโต ญี่ปุ่น), degasser (Shimadzu DGU2 -14A), เครื่องทดสอบกรดด่าง (Shimadzu ยูวีวิจับแบบจำลองSPD-10A), ตัวควบคุมอุณหภูมิสำหรับเครื่องตรวจจับ (Shimadzu),และประมวลผลข้อมูล (Shimadzu Chromato-ตัวประมวลผลแบบจำลองC-R7A Plus) คอลัมน์ (250 มม. และ ความ ยาวเส้นผ่าศูนย์กลาง 4.6 mm)ถูกบรรจุ ด้วยโพรดิจี 5l ODS(3) 100A (PhenomenexVas รันซ์ รัฐแคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา) และถูกเก็บไว้ที่ 60 องศาเซลเซียส การผสมผสานระหว่างของ acetonitrile (350 มล.): 60% perchloric กรด (1 ml): กรดฟอสฟอริก(50 จะ): น้ำ deionized (กับปริมาณรวมของ 1 l) ถูกนำมาใช้หลังอย่าง degassing (โดย ultrasonication) ในระบบเป็นการระยะเคลื่อน เฟสเคลื่อนที่ได้รับอนุญาตให้ ¯ow ที่ 2.0 ml/minและมีการตรวจสอบน้ำที่ 191 nm ดูแลถูกนำไปให้เอาโฟมจากระบบ ¯ow สมบูรณ์ แต่ละกำหนดถูกยกเลิกภายใน 30 นาที Chromatogram ทั่วไปของ urinalysis จะแสดงใน Fig. 1 เมื่อเปรียบเทียบกับของโทลูอีนมาตรฐานในบางกรณี ความเข้มข้นของโทลูอีนในปัสสาวะถูกปรับปรุงสำหรับความเข้มข้นของ creatinine (Jackson 1966) หรือเฉพาะแรงโน้มถ่วงของปัสสาวะของ 1.016 (Rainsford และลอยด์เดวีส์ 1965)ความเข้มข้นของ creatinine และถ่วงถูกวัดโดยcolorimetry และ refractometry ตามลำดับ
การแปล กรุณารอสักครู่..
