S. aureus was cultured in TSB at 37 1C for 18–24 h.
Twenty microliters of the bacterial suspension were
transferred to 3ml of TSB. Filter paper discs (+8 mm,
Advantec, Tokyo, Japan) were infiltrated with 160 ml of
the extract and air-dried for 2 h. One paper disc was
submerged into one test tube of the 2 and 4 h culture of
bacterial suspension. This suspension was incubated at
37 1C for 18–24 h. Bacterial cells were collected by
centrifugation at 10,000 g for 5 min. They were fixed in
the mixture of 3 g glutaraldehyde/100 ml solution at 4 1C
for 2 h. Cells were washed three times with 0.1 mol/l
phosphate buffer solution, pH 7.2 and post-fixed with
2 g OsO4/100 ml solution in 0.1 mol/l phosphate buffer
solution at room temperature overnight. The pellets
were embedded in 2 g/100 ml melted agar and then
dehydrated through a serial concentration of ethanol
(35, 50, 70, 95, 100 ml in 100 ml distilled water,
respectively, for 15 min). They were infiltrated in a
propylene oxide for 15 min twice, working mixture
(propylene oxide: Spurr’ resin, 1:1) for 30 min, followed
by Spurr’ resin for 60 min. They were kept in 100%
Spurr’ resin and polymerized in a hot air oven at 60 1C
for 72 h. The polymerized samples were sliced with an
ultramicrotome (MTX 75500, RMC, USA) and observed
using a transmission electron microscope (JEOL,
JEM 2010, Japan).
หมอเทศข้างลาย S. ถูกล้างใน TSB ที่ 1C 37 สำหรับ 18 – 24 ชมMicroliters ยี่สิบของระงับแบคทีเรียได้โอนไป 3ml ของ TSB กระดาษกรองแผ่น (+ 8 mmAdvantec โตเกียว ญี่ปุ่น) ถูกแทรกซึม ด้วย 160 mlสารสกัด และ air-dried สำหรับ 2 h แก้ไขดิสก์กระดาษหนึ่งแผ่นจมอยู่ใต้น้ำลงในหลอดทดสอบหนึ่งของวัฒนธรรม h 2 และ 4 ของระงับเชื้อแบคทีเรีย ระงับ incubated ที่37 1C สำหรับเซลล์แบคทีเรีย h. 18 – 24 ถูกจัดเก็บโดยหมุนเหวี่ยงที่ 10,000 g 5 นาที พวกเขาได้รับการแก้ไขในส่วนผสมของ 3 g glutaraldehyde/100 ml ที่ 4 1Cสำหรับ 2 h. เซลล์ถูกล้าง 3 ครั้ง ด้วย 0.1 mol/lละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.2 และหลังยึดด้วยก. 2 แก้ปัญหามล OsO4/100 ใน 0.1 mol/l ฟอสเฟตบัฟเฟอร์โซลูชันที่อุณหภูมิห้องค้างคืน เม็ดถูกฝังอยู่ในวุ้น 2 กรัม/100 มิลลิลิตรละลายแล้วอบแห้งผ่านซีเรียเข้มข้นเอทานอล(35, 50, 70, 95, 100 มิลลิลิตรในน้ำกลั่น 100 mlตามลำดับ สำหรับ 15 นาที) พวกเขาได้แทรกซึมเข้าไปในตัวนางรวิฐาพงศ์นุชิตสอง 15 นาทีส่วนผสมในการทำงาน(นางรวิฐาพงศ์นุชิต: Spurr' เรซิน 1:1) 30 นาที ตามด้วยโดย Spurr' เรซิ่นสำหรับ 60 นาที เขาไว้ 100%Spurr' เรซิน และ polymerized ในเตาอบลมร้อนที่ 60 1Cสำหรับ 72 ชั่วโมง ตัวอย่าง polymerized ถูกหั่นด้วยการultramicrotome (MTX 75500, RMC สหรัฐอเมริกา) และสังเกตโดยใช้กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน (JEOLทาง JEM ที่ 2010 ญี่ปุ่น)
การแปล กรุณารอสักครู่..

เชื้อ S. aureus เป็นที่เลี้ยงใน TSB ที่ 37 1C สำหรับ 18-24 ชม.
ยี่สิบไมโครลิตรของการระงับแบคทีเรียถูก
โอนไปยัง 3ML ของ TSB แผ่นกระดาษกรอง (8 มม
Advantec โตเกียวประเทศญี่ปุ่น) ได้รับการแทรกซึม 160 มล. ของ
สารสกัดและอากาศแห้งเป็นเวลา 2 ชั่วโมง แผ่นดิสก์กระดาษหนึ่งถูก
จมลงในหลอดทดสอบหนึ่งของวัฒนธรรมที่ 2 และ 4 ชั่วโมงของ
การระงับแบคทีเรีย ระงับการนี้ได้รับการบ่มที่
37 1C สำหรับ 18-24 ชั่วโมง เซลล์แบคทีเรียที่ถูกเก็บรวบรวมโดย
การหมุนเหวี่ยงที่ 10,000 กรัมเป็นเวลา 5 นาที พวกเขาได้รับการแก้ไขใน
ส่วนผสมของ 3 G glutaraldehyde / 100 มล. วิธีการแก้ปัญหาที่ 4 1C
เป็นเวลา 2 ชั่วโมง เซลล์ที่ถูกล้างสามครั้ง 0.1 โมล / ลิตร
วิธีการแก้ปัญหาฟอสเฟตบัฟเฟอร์ค่า pH 7.2 และการโพสต์คงมี
2 กรัม OsO4 / 100 มล. วิธีการแก้ปัญหาใน 0.1 โมล / ลิตรฟอสเฟตบัฟเฟอร์
วิธีการแก้ปัญหาที่อุณหภูมิห้องในชั่วข้ามคืน เม็ด
ถูกฝังอยู่ใน 2 กรัม / 100 มิลลิลิตรละลายวุ้นแล้ว
คายน้ำผ่านความเข้มข้นซีเรียลของเอทานอล
(35, 50, 70, 95, 100 มล. น้ำ 100 มล. กลั่น
ตามลำดับสำหรับ 15 นาที) พวกเขาได้แทรกซึมเข้าไปใน
ออกไซด์โพรพิลีนเป็นเวลา 15 นาทีสองส่วนผสมทำงาน
(โพรพิลีนออกไซด์: Spurr 'เรซิน 1: 1) เป็นเวลา 30 นาทีตาม
ด้วยการ Spurr' เรซินสำหรับ 60 นาที พวกเขาจะถูกเก็บไว้ใน 100%
เรซิน Spurr และ polymerized ในเตาอบลมร้อนที่ 60 1C
72 ชั่วโมง กลุ่มตัวอย่าง polymerized ถูกหั่นกับ
ultramicrotome (MTX 75500, RMC, สหรัฐอเมริกา) และสังเกต
โดยใช้กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน (JEOL,
JEM 2010 ญี่ปุ่น)
การแปล กรุณารอสักครู่..
