2.3.2. Extraction and determination

2.3.2. Extraction and determination of fatty acids
Freeze dried plant material (20 mg) were extracted in freshly
made methanolic 1 M HCl according to Browse, McCourt, and
Somerville (1986). Detected fatty acids were quantified using
10 lg/sample heptadecanoic acid as internal standard (Fluka
51610), applied by an automated pipette. Seven biological replicates
were extracted per treatment and extracted twice for analysis.
Fatty acids were separated by gas chromatography using an
Agilent 6890 N gas chromatograph equipped with a 7683 B auto
injector and a flame ionisation detector (FID) (Agilent Technologies
Inc., Santa Clara, CA, USA). Helium was used as carrier gas through
a Varian CP7419 capillary column (50 m  250 lm  0.25 lm
nominal) (Varian Inc., Middelburg, The Netherlands). Injector and
detector temperatures were 240 and 250 C, respectively. A predefined
temperature program was used to ensure the best possible
separation of the fatty acids: 50 C for two minutes, then an
increase of 10 C/min to 150 C, followed by 2 C/min to 205 C
and finally 15 C/min until 255 C and 255 C for 10 min. The fatty
acids were identified by comparison to the fatty acid standards
1895, 1893, 1891, PUFA No. 1 and PUFA No. 3 from Sigma (Sigma
Chemicals Co., St. Louis, MO, USA) and fatty acid standard 68D from
NuChek (NuChek Prep. Inc., Elysian, MN, USA).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.3.2 การสกัดและความมุ่งมั่นของกรดไขมันตรึงแห้งวัสดุโรงงาน (20 mg) ถูกสกัดในสดทำ methanolic 1 M HCl ตามดู McCourt และSomerville (1986) ตรวจพบกรดไขมันถูก quantified โดยใช้กรด 10 ตัว อย่าง/lg heptadecanoic เป็นมาตรฐานภายใน (Fluka51610), ใช้การเปตต์อัตโนมัติ เหมือนกับชีวภาพ 7สกัดต่อการรักษา และแยกสองสำหรับการวิเคราะห์กรดไขมันถูกแยกโดย chromatography ก๊าซChromatograph ก๊าซ Agilent 6890 N ที่เพียบพร้อมไป ด้วยอัตโนมัติ 7683 Bหัวฉีดและตัวจับ ionisation เปลวไฟ (FID) (Agilent เทคโนโลยีอิงค์ ซานตาคลารา CA, USA) ใช้ฮีเลียมเป็นก๊าซผู้ขนส่งผ่านCP7419 แล้วแต่กำหนดคอลัมน์เส้นเลือดฝอย (50 เมตร 250 lm 0.25 lmnominal) (แล้วแต่กำหนด Inc., Middelburg ประเทศเนเธอร์แลนด์) หัวฉีด และเครื่องตรวจจับอุณหภูมิ 240 และ 250 C ตามลำดับ ที่กำหนดไว้ล่วงหน้าใช้โปรแกรมอุณหภูมิให้ดีที่สุดแยกกรดไขมัน: C 50 นาที 2 แล้วมีเพิ่ม 10 C/นาที ถึง 150 C ตาม ด้วย 2 C/นาที ถึง 205 Cและสุดท้าย 15 C/นาที จน ถึง 255 C และ C 255 สำหรับ 10 นาที ไขมันที่กรดได้ระบุโดยการเปรียบเทียบมาตรฐานกรดไขมัน1895, 1893, 1891, PUFA หมายเลข 1 และหมายเลขของ PUFA 3 จาก (ซิกซิกจำกัดเคมีภัณฑ์ St. Louis, MO สหรัฐอเมริกา) และกรดไขมันมาตรฐาน 68 D จากNuChek (NuChek เตรียมไว้ อิงค์ ค้า MN สหรัฐอเมริกา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3.2 การสกัดและความมุ่งมั่นของกรดไขมันตรึงวัสดุจากพืชแห้ง (20 mg) ถูกสกัดในสดใหม่ทำเมทานอล1 M HCl ตามเรียกดู McCourt และวิลล์(1986) ตรวจพบกรดไขมันที่ถูกวัดโดยใช้10 แอลจี / ตัวอย่างกรด heptadecanoic เป็นมาตรฐานภายใน (Fluka 51610) นำไปใช้โดยอัตโนมัติปิเปต เซเว่นซ้ำชีวภาพสกัดต่อการรักษาและการสกัดครั้งที่สองสำหรับการวิเคราะห์. กรดไขมันถูกแยกออกจากแก๊ส chromatography ใช้Agilent 6890 ไม่มีก๊าซ Chromatograph พร้อมกับรถยนต์ B 7683 หัวฉีดและเครื่องตรวจจับเปลวไฟ Ionisation (FID) (Agilent Technologies, Inc, ซานตาคลารา , CA, USA) ฮีเลียมถูกใช้เป็นก๊าซผ่านคอลัมน์ของเส้นเลือดฝอย Varian CP7419 (50 เมตร? 250 LM? 0.25 ไมครอนที่ระบุ) (Varian อิงค์มิดเดลเบิร์ก, เนเธอร์แลนด์) หัวฉีดและอุณหภูมิที่ตรวจจับได้ 240 และ 250 องศาเซลเซียสตามลำดับ กำหนดไว้ล่วงหน้าโปรแกรมอุณหภูมิถูกนำมาใช้เพื่อให้แน่ใจว่าดีที่สุดแยกกรดไขมัน: 50 องศาเซลเซียสเป็นเวลาสองนาทีแล้ว?? เพิ่มขึ้น 10 C / นาที 150 C ตามด้วย 2 C / นาทีถึง 205 องศาเซลเซียสและในที่สุด 15 องศาเซลเซียส / นาทีจนถึง 255 องศาเซลเซียสและ 255 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาที ไขมันกรดถูกระบุโดยเปรียบเทียบกับมาตรฐานกรดไขมัน1895, 1893, 1891, PUFA ฉบับที่ 1 และฉบับที่ 3 PUFA จากซิกม่า (Sigma Chemicals Co. , เซนต์หลุยส์สหรัฐอเมริกา) และมาตรฐานของกรดไขมันจาก 68D NuChek (NuChek เตรียม. อิงค์เซี่ยน, MN, USA)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3.2 . การสกัดและการหาปริมาณกรดไขมัน
ตรึงวัสดุพืชแห้ง ( 20 มิลลิกรัม ) ถูกสกัดใน สด ๆทำให้ HCl เมทานอล
1 M ตามดูแมคคอทและ
Somerville ( 1986 ) พบว่ามีปริมาณกรดไขมันโดยใช้
10 LG / ตัวอย่าง heptadecanoic กรดเป็นมาตรฐานภายใน ( fluka
51610 ) โดยอัตโนมัติ ใช้หลอด เจ็ดนาที
ชีวภาพการแยกสกัดต่อสองครั้งสำหรับการวิเคราะห์ .
กรดไขมันที่ถูกแยกโดยวิธีแก๊สโครมาโตกราฟีโดยใช้แก๊สโครมาโตกราฟ 6890 n
เลนต์ พร้อมกับ 7683 B Auto
ฉีดและเปลวไฟ ionisation ตรวจจับ ( FID ) ( Agilent Technologies
อิงค์ , ซานตาคลารา แคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา ) ฮีเลียมถูกใช้เป็นแก๊สตัวพาผ่าน
เป็นเครื่อง cp7419 หลอดเลือดฝอยคอลัมน์ ( 50 เมตร  250 LM  0.25 LM
ชื่อ ) ( เครื่อง )มิดเดิลเบิร์ก , เนเธอร์แลนด์ ) ฉีดและเครื่องตรวจจับอุณหภูมิ 240 250 )
 องศาเซลเซียส ตามลำดับ ที่กำหนดไว้ล่วงหน้า
โปรแกรมอุณหภูมิใช้ให้แยกเป็นไปได้
ที่ดีที่สุดของกรดไขมัน : 50  C เป็นเวลา 2 นาที จากนั้น
เพิ่ม 10  องศาเซลเซียส / นาที 150  C ตามด้วย 2  องศาเซลเซียส / นาที 205  C
และในที่สุด 15  องศาเซลเซียส / นาทีจนกว่าคุณ  c และ 255  C 10 นาทีไขมัน
กรดถูกระบุโดยการเปรียบเทียบกับมาตรฐานกรดไขมัน
1895 1893 , 1891 และ PUFA ฉบับที่ 1 , ภูฟ้า หมายเลข 3 จากซิกม่า ( Sigma
Chemicals Co . , St . Louis , MO , USA ) และกรดไขมันจากมาตรฐาน 68d
nuchek ( nuchek เตรียมอิงค์ , รอบๆ , MN , USA )