IRESs have been incorporated into v

IRESs have been incorporated into virus vectors to facilitate polycistronic expression of multiple genes in eukaryotic cells (Thompson 2012). In particular, an IRES element derived from the coat protein gene of the crucifer Tobacco Mosaic Virus (cr-TMV) has
been used for polycistronic gene expression in plants (Ha et al. 2010; Skulachev et al. 1999). Yamamoto et al used the cr-TMV IRES to selectively express a firefly luciferase gene from a single mRNA that also encoded a Renilla luciferase gene positioned 5′ to the firefly gene (Yamamoto et al. 2003). RNA silencing, also referred to as RNA interference, involves post-transcriptional degradation of RNAs mediated by short (21–24nt) interfering RNAs (siRNAs) in a sequence-dependent manner (Baulcombe 2004).
RNA silencing is a host defense system against invading viruses (Pumplin and Voinnet 2013). To defeat this defense system, many plant viruses encode RNA silencing suppressors (Voinnet et al. 1999). The p19 protein of Tombusvirus, an RNA silencing suppressor that is widely used in transgenic experiments, binds viral siRNAs and abrogates siRNA-mediated degradation of viral RNAs (Vargason et al. 2003). Until now, the suppressor activity of the p19 protein has been used to maintain expression of genes by co-expression of p19 as a separate mRNA (Voinnet et al. 2003). In this report, we first attempted to improve IRESmediated polycistronic expression by a transient
expression system using Nicotiana benthamiana. In addition, we established a novel mRNA self-protection system from RNA silencing using two IRES cassettes harboring the p19 gene.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

IRESs ได้ถูกรวมเข้าไปในไวรัสเวกเตอร์เพื่อ polycistronic นิพจน์ของยีนหลายใน eukaryotic เซลล์ (2012 ทอมป์สัน) โดยเฉพาะอย่างยิ่ง มีองค์ IRES ที่สืบทอดมาจากยีนในตราของ crucifer ยาสูบไวรัสโมเสก (cr-TMV)ใช้สำหรับ polycistronic ยีนในพืช (Ha et al. 2010 Skulachev et al. 1999) ยามาโมโตะ et al ใช้ IRES cr TMV เพื่อเลือกแสดงเป็นยีน luciferase หิ่งห้อยจาก mRNA เดียวที่ยัง เข้า 5′ ตำแหน่งยีน luciferase Renilla กับยีนหิ่งห้อย (ยามาโมโตะ et al. 2003) อาร์เอ็นเอ silencing หรือที่เรียกว่าการแทรกแซงอาร์เอ็นเอ เกี่ยวข้องกับการสลายตัวที่ post-transcriptional ของ RNAs mediated โดยสั้น (21 – 24nt) RNAs รบกวน (siRNAs) ในลักษณะที่ขึ้นอยู่กับลำดับ (Baulcombe 2004)อาร์เอ็นเอ silencing เป็นระบบป้องกันโฮสต์กับไวรัส (Pumplin และ Voinnet 2013) เพื่อเอาชนะระบบป้องกันนี้ ไวรัสพืชหลายเข้ารหัสอาร์เอ็นเอ silencing suppressors (Voinnet et al. 1999) โปรตีนของ Tombusvirus เป็นอาร์เอ็นเอ silencing ตัวป้องกันไฟเกินที่จะใช้ในการทดลองถั่วเหลือง p19 binds ไวรัส siRNAs และ abrogates siRNA mediated สลายตัวของไวรัส RNAs (Vargason et al. 2003) จนถึงขณะนี้ กิจกรรมตัวป้องกันไฟเกินของโปรตีน p19 ใช้รักษาของยีน โดยนิพจน์ร่วมของ p19 mRNA แยก (Voinnet et al. 2003) ในรายงานนี้ แรกเราพยายามปรับปรุงนิพจน์ polycistronic IRESmediated โดยแบบฉับพลันระบบนิพจน์ที่ใช้ Nicotiana benthamiana นอกจากนี้ เราสามารถสร้างระบบปก mRNA นวนิยายจากอาร์เอ็นเอ silencing ใช้ฝ้า IRES สอง harboring ยีน p19

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

iress ได้รับการจดทะเบียนเป็นพาหะไวรัสเพื่อความสะดวกในการแสดงออกของยีนในยูคาริโอติกเซลล์หลาย polycistronic ( ทอมสัน 2012 ) โดยเฉพาะองค์ประกอบ IRES มาจากยีนโปรตีนห่อหุ้มของวงศ์กะหล่ำยาสูบทำด้วยโมเสคไวรัส ( CR tmv )
ถูกใช้สำหรับการแสดงออกของยีนในพืช ( ฮา polycistronic et al . 2010 ; skulachev et al . 1999 )ยามาโมโตะ et al ใช้ IRES tmv CR ที่จะคัดเลือกแสดงหิ่งห้อยลูซิเฟอเรสยีนเดียว mRNA ที่เข้ารหัส renilla ลูซิเฟอเรสยีนวาง 5 ’ไปหิ่งห้อยยีน ( Yamamoto et al . 2003 ) silencing RNA ก็เรียกว่าการแทรกแซงอาร์เอ็นเอ ,ที่เกี่ยวข้องกับการย่อยสลายของ RNAs ( ลองโพสต์โดยย่อ ( 21 ) 24nt ) แทรกแซง RNAs ( sirnas ) ในลำดับขึ้นอยู่กับลักษณะ ( baulcombe 2004 ) .
rna สามารถเป็นโฮสต์ระบบป้องกันการบุกรุก ( pumplin ต่อต้านไวรัส และ voinnet 2013 ) การเอาชนะระบบนี้ป้องกันไวรัสพืชหลายเข้ารหัสยีน silencing suppressors ( voinnet et al . 1999 ) การ p19 tombusvirus โปรตีน ,เป็น RNA สามารถเก็บเสียงที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการทดลองพันธุกรรมผูกไวรัสและผ่านการย่อยสลายของบริษัท sirnas abrogates ไวรัส RNAs ( vargason et al . 2003 ) จนถึงตอนนี้ เครื่องห้ามกิจกรรมของ p19 โปรตีนถูกใช้เพื่อรักษา การแสดงออกของยีนโดย Co การแสดงออกของ p19 เป็น mRNA ที่แยกต่างหาก ( voinnet et al . 2003 ) ในรายงานนี้เราพยายามที่จะปรับปรุง iresmediated polycistronic การแสดงออกโดยชั่วคราว
การแสดงออกโดยใช้ระบบขนะ benthamiana . นอกจากนี้ เราสร้างใหม่ของการป้องกันระบบจาก RNA สามารถใช้สอง IRES แบบที่กรมเจ้าท่า p19 ยีน