- ข้อความ
- ประวัติศาสตร์
being the supernatant (milk layer)
being the supernatant (milk layer) removed for analysis of
AFM1. The same procedures as described above were performed in
triplicate positive controls (only spiked skim milk containing 0.5
AFM1 mg L1
), negative controls (only S. cerevisiae, LAB pool or S.
cerevisiae þ LAB pool) and non-spiked skim milk controls.
2.3. Analysis of aflatoxin M1 in milk
Extraction and purification of the supernatant from the binding
assays for AFM1 determination were performed as described by
Fernandes, Correa, Rosim, Kobashigawa, and Oliveira (2012), with
some adaptations proposed by the manufacturer of the immunoaffinity
columns (NeoColumn, Neogen, Neogen Europe Ltd.,
Scotland, UK). Identification and quantification of the AFM1 residues
was achieved by injecting 20 ml of sample extracts in a high
performance liquid chromatography (HPLC), using a Shimadzu
(Kyoto, Japan) 10VP liquid chromatograph with a 10 AXL fluorescence
detector (excitation at 366 nm and emission above 428 nm). A
Synergy Fusion column (4.6 150 mm, 4 mm, Phenomenex, Torrance,
CA, USA) and a Shim-Pack pre-column (4 10 mm, 5 mm CLC
G-ODS) were used. The system was stabilized for one hour at a flow
rate of 1 mL/min at room temperature with an isocratic mobile
phase containing water, acetonitrile and methanol (60:20:20).
Under these conditions, the retention time for AFM1 was approximately
5.7 min. Calibration curve of AFM1 was prepared using
standard solutions of AFM1 (Sigma, St Louis, MO, USA) previously
evaluated according to Scott (1990), at concentrations of 0.5, 1.0, 2.5,
5.0 and 10.0 ng mL1
. The determination limit of the analytical
method was 0.01 ng mL1
, considered the minimum amount of
AFM1 that could generate a chromatographic peak three times over
the baseline standard deviation.
The equation below was used to determine the percentage of AFM1
bound by the microorganisms tested in each assay. Letters B, C,Dand E
are themean areas of chromatographic peaks of positive controls, nonspiked
skim milk controls, sample analyzed and negative controls,
respectively.
A ¼
½ðB CÞðD EÞ
B C
*100
2.4. Statistical analysis
Statistical analysis of AFM1 binding assays was carried out in the
General Linear Model of SAS (SAS, 2004) by using the Tukey Test
for significant differences between the microorganisms tested (S.
cerevisiae, LAB and S. cerevisiae þ LAB) and contact time at P < 0.05.
3. Results and discussion
Table 1 shows the AFM1 levels in UHT skim milk samples in the
binding assays with heat-killed S. cerevisiae cells, alone or in
combination with LAB pool cells. AFM1 levels in spiked skim milk
samples (0.5 ng AFM1 mL1
) treated with LAB pool cells (1010 cells
mL1
) for 30 and 60 min ranged from 0.442 0.022 to
0.443 0.011 ng mL1
. For milks treated with S. cerevisiae cells (109
cells mL1
) during the same contact times, or S. cerevisiae þ LAB
cells during 30 min, AFM1 mean concentrations were 0.037 0.004
to 0.048 0.002 ng mL1 and 0.042 0.003 ng mL1
, respectively.
Milk samples treated with S. cerevisiae þ LAB pool cells for 60 min
had no detectable levels of AFM1.
The percentages of AFM1 bound in UHT skim milk by the
microorganism studied after different contact times are presented
in Table 2. LAB pool showed mean percentages of AFM1 bound of
11.5 2.3% and 11.7 4.4% for 30 min and 60 min, respectively.
C
AFM1. The same procedures as described above were performed in
triplicate positive controls (only spiked skim milk containing 0.5
AFM1 mg L1
), negative controls (only S. cerevisiae, LAB pool or S.
cerevisiae þ LAB pool) and non-spiked skim milk controls.
2.3. Analysis of aflatoxin M1 in milk
Extraction and purification of the supernatant from the binding
assays for AFM1 determination were performed as described by
Fernandes, Correa, Rosim, Kobashigawa, and Oliveira (2012), with
some adaptations proposed by the manufacturer of the immunoaffinity
columns (NeoColumn, Neogen, Neogen Europe Ltd.,
Scotland, UK). Identification and quantification of the AFM1 residues
was achieved by injecting 20 ml of sample extracts in a high
performance liquid chromatography (HPLC), using a Shimadzu
(Kyoto, Japan) 10VP liquid chromatograph with a 10 AXL fluorescence
detector (excitation at 366 nm and emission above 428 nm). A
Synergy Fusion column (4.6 150 mm, 4 mm, Phenomenex, Torrance,
CA, USA) and a Shim-Pack pre-column (4 10 mm, 5 mm CLC
G-ODS) were used. The system was stabilized for one hour at a flow
rate of 1 mL/min at room temperature with an isocratic mobile
phase containing water, acetonitrile and methanol (60:20:20).
Under these conditions, the retention time for AFM1 was approximately
5.7 min. Calibration curve of AFM1 was prepared using
standard solutions of AFM1 (Sigma, St Louis, MO, USA) previously
evaluated according to Scott (1990), at concentrations of 0.5, 1.0, 2.5,
5.0 and 10.0 ng mL1
. The determination limit of the analytical
method was 0.01 ng mL1
, considered the minimum amount of
AFM1 that could generate a chromatographic peak three times over
the baseline standard deviation.
The equation below was used to determine the percentage of AFM1
bound by the microorganisms tested in each assay. Letters B, C,Dand E
are themean areas of chromatographic peaks of positive controls, nonspiked
skim milk controls, sample analyzed and negative controls,
respectively.
A ¼
½ðB CÞðD EÞ
B C
*100
2.4. Statistical analysis
Statistical analysis of AFM1 binding assays was carried out in the
General Linear Model of SAS (SAS, 2004) by using the Tukey Test
for significant differences between the microorganisms tested (S.
cerevisiae, LAB and S. cerevisiae þ LAB) and contact time at P < 0.05.
3. Results and discussion
Table 1 shows the AFM1 levels in UHT skim milk samples in the
binding assays with heat-killed S. cerevisiae cells, alone or in
combination with LAB pool cells. AFM1 levels in spiked skim milk
samples (0.5 ng AFM1 mL1
) treated with LAB pool cells (1010 cells
mL1
) for 30 and 60 min ranged from 0.442 0.022 to
0.443 0.011 ng mL1
. For milks treated with S. cerevisiae cells (109
cells mL1
) during the same contact times, or S. cerevisiae þ LAB
cells during 30 min, AFM1 mean concentrations were 0.037 0.004
to 0.048 0.002 ng mL1 and 0.042 0.003 ng mL1
, respectively.
Milk samples treated with S. cerevisiae þ LAB pool cells for 60 min
had no detectable levels of AFM1.
The percentages of AFM1 bound in UHT skim milk by the
microorganism studied after different contact times are presented
in Table 2. LAB pool showed mean percentages of AFM1 bound of
11.5 2.3% and 11.7 4.4% for 30 min and 60 min, respectively.
C
0/5000
supernatant (นมชั้น) ถูกเอาออกสำหรับวิเคราะห์AFM1 กระบวนการเดียวกันตามที่อธิบายไว้ข้างต้นได้ดำเนินการในtriplicate บวกควบคุม (เฉพาะถูกแทง skim นมประกอบด้วย 0.5AFM1 มิลลิกรัม L 1), ลบตัวควบคุม (เฉพาะ S. cerevisiae สระว่ายน้ำของห้องปฏิบัติการ หรือ S.cerevisiae þแล็บสระ) และตัวควบคุมไม่ใช่ spiked skim นม2.3 การวิเคราะห์ของ aflatoxin M1 ในน้ำนมสกัดและทำให้บริสุทธิ์ของ supernatant จากการรวมสำหรับการกำหนด AFM1 assays ดำเนินตามที่อธิบายไว้โดยFernandes ต่อ Rosim, Kobashigawa และ Oliveira (2012), กับบางท้องที่นำเสนอ โดยผู้ผลิต immunoaffinityคอลัมน์ (NeoColumn, Neogen, Neogen ยุโรป จำกัดสก็อตแลนด์ สหราชอาณาจักร) รหัสและนับตก AFM1สำเร็จ โดย injecting 20 ml สารสกัดจากตัวอย่างในสูงประสิทธิภาพของเหลว chromatography (HPLC), Shimadzu ใช้Chromatograph เหลว 10VP (เกียวโต ญี่ปุ่น) กับ 10 AXL fluorescenceเครื่องตรวจจับ (ในการกระตุ้นที่ 366 nm และมลพิษข้าง 428 nm) Aคอลัมน์ฟิวชั่น synergy (4.6 150 mm, 4 mm, Phenomenex รันซ์CA, USA) และคอลัมน์ก่อน Shim Pack (4 10 mm, 5 mm CLCG-ODS) ใช้ ระบบไม่เสถียรเวลาชั่วโมงหนึ่งในขั้นตอนการอัตรา 1 มิลลิลิตร/นาทีที่อุณหภูมิห้องกับ isocratic คิดการเคลื่อนระยะที่ประกอบด้วยน้ำ acetonitrile และเมทานอล (60:20:20)ภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้ เวลาเก็บข้อมูลสำหรับ AFM1 ถูกประมาณต่ำสุด 5.7 เทียบโค้งของ AFM1 ถูกเตรียมไว้ใช้โซลูชั่นมาตรฐานของ AFM1 (ซิก St Louis, MO สหรัฐอเมริกา) ก่อนหน้านี้ประเมินตามสกอตต์ (1990), ที่ความเข้มข้น 0.5, 1.0, 2.55.0 และ 10.0 ng mL 1. กำหนดขีดจำกัดของการวิเคราะห์ทางวิธี 0.01 ng mL 1ถือว่าเป็นจำนวนน้อยที่สุดAFM1 ที่สามารถสร้างยอด chromatographic สามครั้งผ่านส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐานพื้นฐานสมการนี้ถูกใช้เพื่อกำหนดเปอร์เซ็นต์ของ AFM1ผูก ด้วยจุลินทรีย์ที่ผ่านทดสอบในการทดสอบแต่ละ อักษร B, C, Dand Eคือ themean แห่ง chromatographic ควบคุมบวก nonspikedนมการควบคุม วิเคราะห์ตัวอย่างการอ่านอย่างคร่าว ๆ และลบตัวควบคุมตามลำดับเป็น¼½ðB CÞ ðD EÞB C* 1002.4. สถิติวิเคราะห์วิเคราะห์ทางสถิติของ AFM1 ผูก assays ถูกดำเนินการในการแบบจำลองเชิงเส้นทั่วไปของ SAS (SAS, 2004) โดยใช้การทดสอบของ Tukeyสำหรับความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญระหว่างจุลินทรีย์ทดสอบ (s ได้cerevisiae แล็บและ S. cerevisiae þ LAB) และติดต่อ P < 0.053. ผลลัพธ์ และสนทนาตารางที่ 1 แสดงระดับ AFM1 อย่าง skim นมยูเอชทีในการผูก assays ร้อนฆ่า S. cerevisiae เซลล์ คนเดียว หรือในร่วมกับห้องปฏิบัติการกลุ่มเซลล์ ระดับ AFM1 ในน้ำนม skim ถูกแทงตัวอย่าง (0.5 ng AFM1 มล 1) รับ LAB สระเซลล์ (เซลล์ 1010มล. 1) สำหรับ 30 และ 60 นาทีมา 0.022 0.442 เพื่อng 0.443 0.011 mL 1. สำหรับ milks ถือว่า S. cerevisiae เซลล์ (109เซลล์ mL 1) ขณะเดียวกันเวลาติดต่อ หรือ S. cerevisiae þแล็บเซลล์ในช่วง 30 นาที ความเข้มข้นเฉลี่ย AFM1 ได้ 0.037 0.004ถึง 0.048 0.002 ng mL 1 และ 0.042 0.003 ng mL 1ตามลำดับตัวอย่างน้ำนมรักษา ด้วย S. cerevisiae þเซลล์แล็บสระว่ายน้ำ 60 นาทีได้ระดับ AFM1 ไม่สามารถตรวจสอบได้เปอร์เซ็นต์ของ AFM1 ผูกยูเอชทีนม skim โดยศึกษาจุลินทรีย์หลังจากแสดงเวลาติดต่อแตกต่างกันในตารางที่ 2 สระว่ายน้ำของห้องปฏิบัติการพบว่าค่าเฉลี่ยเปอร์เซ็นต์ของ AFM1 ผูกของ11.5 2.3% และ 11.7 4.4% ใน 30 นาทีและ 60 นาที ตามลำดับC
การแปล กรุณารอสักครู่..
ถูกใส (ชั้นนม) ถอดออกมาเพื่อวิเคราะห์
AFM1 วิธีการเดียวกับที่กล่าวไว้ข้างต้นได้ดำเนินการใน
การควบคุมการเพิ่มขึ้นสามเท่าบวก (แทงเพียงหางนมที่มี 0.5
มิลลิกรัม AFM1 L 1
) การควบคุมเชิงลบ (เฉพาะเอส cerevisiae, สระว่ายน้ำหรือ LAB S.
cerevisiae þสระว่ายน้ำ LAB) และนมพร่องมันเนยที่ไม่ได้ถูกแทง ควบคุม.
2.3 การวิเคราะห์อะฟลาท็อกซิน M1 ในน้ำนม
สกัดและการทำให้บริสุทธิ์ของสารละลายจากผลผูกพัน
การตรวจหาปริมาณ AFM1 ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้โดย
เฟอร์นันเดกอร์ Rosim, Kobashigawa และ Oliveira (2012) ที่มี
การดัดแปลงบางส่วนที่เสนอโดยผู้ผลิต immunoaffinity
คอลัมน์ ( NeoColumn, Neogen, Neogen ยุโรป จำกัด ,
สกอตแลนด์สหราชอาณาจักร) การจำแนกชนิดและปริมาณของสารตกค้าง AFM1
ก็ประสบความสำเร็จโดยการฉีด 20 มล. ของสารสกัดจากตัวอย่างในสูง
ของเหลว chromatography ประสิทธิภาพ (HPLC) โดยใช้ Shimadzu
(เกียวโตญี่ปุ่น) 10VP chromatograph ของเหลวที่มีการเรืองแสง 10 AXL
เครื่องตรวจจับ (กระตุ้นที่ 366 นาโนเมตรและการปล่อย ดังกล่าวข้างต้น 428 นาโนเมตร)
คอลัมน์ฟิวชั่นเนอร์จี้ (4.6? 150 มิลลิเมตร 4 มิลลิเมตร Phenomenex, Torrance,
CA, USA) และชิม-Pack ก่อนคอลัมน์ (4 10 มมมม 5 CLC
G-ODS) ถูกนำมาใช้ ระบบมีเสถียรภาพเป็นเวลาหนึ่งชั่วโมงในการไหล
อัตรา 1 มิลลิลิตร / นาทีที่อุณหภูมิห้องที่มีโทรศัพท์มือถือ isocratic
ขั้นตอนที่มีน้ำ acetonitrile และเมทานอล (60:20:20).
ภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้เวลาการเก็บรักษาสำหรับ AFM1 ประมาณ
5.7 นาที เส้นโค้งการสอบเทียบ AFM1 ถูกจัดทำขึ้นโดยใช้
สารละลายมาตรฐานของ AFM1 (Sigma, St Louis, MO, USA) ก่อนหน้านี้
การประเมินตามสกอตต์ (1990) ที่ระดับความเข้มข้น 0.5, 1.0, 2.5,
5.0 และ 10.0 มิลลิลิตรงะ?
1 ขีด จำกัด ของความมุ่งมั่นของการวิเคราะห์
วิธีการเป็น 0.01 นาโนกรัมมิลลิลิตร 1
พิจารณาจำนวนเงินขั้นต่ำของ
AFM1 ที่สามารถสร้างยอดโครมาสามครั้งกว่า
พื้นฐานส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน.
สมการดังต่อไปนี้ถูกใช้ในการกำหนดอัตราร้อยละของ AFM1
ผูกพันตามจุลินทรีย์ที่ผ่านการทดสอบ ในแต่ละการทดสอบ ตัวอักษร B, C, E Dand
เป็นพื้นที่ themean ของยอดเขาโครมาของการควบคุมบวก nonspiked
ควบคุมนมพร่องมันเนยตัวอย่างการวิเคราะห์และการควบคุมเชิงลบ
ตามลำดับ.
¼
? ½ðB? CTH? DD? ผลประโยชน์ทับซ้อน?
B? C 100 * 2.4 การวิเคราะห์ทางสถิติการวิเคราะห์สถิติของ AFM1 ตรวจผูกพันได้ดำเนินการในเชิงเส้นทั่วไปรุ่นแซส (SAS, 2004) โดยใช้การทดสอบ Tukey ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างจุลินทรีย์ที่ผ่านการทดสอบ (S. cerevisiae, LAB และ S. cerevisiae þ LAB) และรายชื่อผู้ติดต่อ เวลาที่ P <0.05. 3 ผลการอภิปรายและตารางที่ 1 แสดงระดับ AFM1 ในยูเอชทีนมพร่องมันเนยตัวอย่างในการตรวจผูกพันด้วยความร้อนฆ่าเซลล์เอส cerevisiae, คนเดียวหรือร่วมกับเซลล์ LAB สระว่ายน้ำ ระดับ AFM1 ในนมพร่องมันเนยถูกแทงตัวอย่าง (0.5 นาโนกรัม AFM1 มิลลิลิตร 1 ) การรักษาด้วยเซลล์สระว่ายน้ำ LAB (1,010 เซลล์มิลลิลิตร 1 ) เป็นเวลา 30 และ 60 นาทีตั้งแต่ 0.442? เพื่อ 0.022 0.443? 0.011 งะมล? 1 สำหรับนมรับการรักษาด้วยเซลล์ S. cerevisiae (109 มิลลิลิตรเซลล์ 1 ) ในช่วงเวลาที่ติดต่อเดียวกันหรือเอส cerevisiae þ LAB เซลล์ในช่วง 30 นาทีความเข้มข้นของ AFM1 หมายถึงการเป็น 0.037? 0.004 0.048 ไป? 0.002 งะมิลลิลิตร 1 และ 0.042? 0.003 งะมิลลิลิตร 1 ตามลำดับ. ตัวอย่างนมที่รักษาด้วย S. cerevisiae þเซลล์ LAB สระว่ายน้ำสำหรับ 60 นาทีไม่มีการตรวจพบระดับของ AFM1. ร้อยละของ AFM1 ผูกพันในหางนมยูเอชทีโดยจุลินทรีย์ศึกษาครั้งหลังจากที่การติดต่อที่แตกต่างกันจะถูกนำเสนอในตาราง 2. สระว่ายน้ำห้องปฏิบัติการแสดงให้เห็นว่าร้อยละเฉลี่ยของ AFM1 ผูกพันของ11.5? 2.3% และ 11.7? 4.4% เป็นเวลา 30 นาทีและ 60 นาทีตามลำดับ. C
AFM1 วิธีการเดียวกับที่กล่าวไว้ข้างต้นได้ดำเนินการใน
การควบคุมการเพิ่มขึ้นสามเท่าบวก (แทงเพียงหางนมที่มี 0.5
มิลลิกรัม AFM1 L 1
) การควบคุมเชิงลบ (เฉพาะเอส cerevisiae, สระว่ายน้ำหรือ LAB S.
cerevisiae þสระว่ายน้ำ LAB) และนมพร่องมันเนยที่ไม่ได้ถูกแทง ควบคุม.
2.3 การวิเคราะห์อะฟลาท็อกซิน M1 ในน้ำนม
สกัดและการทำให้บริสุทธิ์ของสารละลายจากผลผูกพัน
การตรวจหาปริมาณ AFM1 ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้โดย
เฟอร์นันเดกอร์ Rosim, Kobashigawa และ Oliveira (2012) ที่มี
การดัดแปลงบางส่วนที่เสนอโดยผู้ผลิต immunoaffinity
คอลัมน์ ( NeoColumn, Neogen, Neogen ยุโรป จำกัด ,
สกอตแลนด์สหราชอาณาจักร) การจำแนกชนิดและปริมาณของสารตกค้าง AFM1
ก็ประสบความสำเร็จโดยการฉีด 20 มล. ของสารสกัดจากตัวอย่างในสูง
ของเหลว chromatography ประสิทธิภาพ (HPLC) โดยใช้ Shimadzu
(เกียวโตญี่ปุ่น) 10VP chromatograph ของเหลวที่มีการเรืองแสง 10 AXL
เครื่องตรวจจับ (กระตุ้นที่ 366 นาโนเมตรและการปล่อย ดังกล่าวข้างต้น 428 นาโนเมตร)
คอลัมน์ฟิวชั่นเนอร์จี้ (4.6? 150 มิลลิเมตร 4 มิลลิเมตร Phenomenex, Torrance,
CA, USA) และชิม-Pack ก่อนคอลัมน์ (4 10 มมมม 5 CLC
G-ODS) ถูกนำมาใช้ ระบบมีเสถียรภาพเป็นเวลาหนึ่งชั่วโมงในการไหล
อัตรา 1 มิลลิลิตร / นาทีที่อุณหภูมิห้องที่มีโทรศัพท์มือถือ isocratic
ขั้นตอนที่มีน้ำ acetonitrile และเมทานอล (60:20:20).
ภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้เวลาการเก็บรักษาสำหรับ AFM1 ประมาณ
5.7 นาที เส้นโค้งการสอบเทียบ AFM1 ถูกจัดทำขึ้นโดยใช้
สารละลายมาตรฐานของ AFM1 (Sigma, St Louis, MO, USA) ก่อนหน้านี้
การประเมินตามสกอตต์ (1990) ที่ระดับความเข้มข้น 0.5, 1.0, 2.5,
5.0 และ 10.0 มิลลิลิตรงะ?
1 ขีด จำกัด ของความมุ่งมั่นของการวิเคราะห์
วิธีการเป็น 0.01 นาโนกรัมมิลลิลิตร 1
พิจารณาจำนวนเงินขั้นต่ำของ
AFM1 ที่สามารถสร้างยอดโครมาสามครั้งกว่า
พื้นฐานส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน.
สมการดังต่อไปนี้ถูกใช้ในการกำหนดอัตราร้อยละของ AFM1
ผูกพันตามจุลินทรีย์ที่ผ่านการทดสอบ ในแต่ละการทดสอบ ตัวอักษร B, C, E Dand
เป็นพื้นที่ themean ของยอดเขาโครมาของการควบคุมบวก nonspiked
ควบคุมนมพร่องมันเนยตัวอย่างการวิเคราะห์และการควบคุมเชิงลบ
ตามลำดับ.
¼
? ½ðB? CTH? DD? ผลประโยชน์ทับซ้อน?
B? C 100 * 2.4 การวิเคราะห์ทางสถิติการวิเคราะห์สถิติของ AFM1 ตรวจผูกพันได้ดำเนินการในเชิงเส้นทั่วไปรุ่นแซส (SAS, 2004) โดยใช้การทดสอบ Tukey ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างจุลินทรีย์ที่ผ่านการทดสอบ (S. cerevisiae, LAB และ S. cerevisiae þ LAB) และรายชื่อผู้ติดต่อ เวลาที่ P <0.05. 3 ผลการอภิปรายและตารางที่ 1 แสดงระดับ AFM1 ในยูเอชทีนมพร่องมันเนยตัวอย่างในการตรวจผูกพันด้วยความร้อนฆ่าเซลล์เอส cerevisiae, คนเดียวหรือร่วมกับเซลล์ LAB สระว่ายน้ำ ระดับ AFM1 ในนมพร่องมันเนยถูกแทงตัวอย่าง (0.5 นาโนกรัม AFM1 มิลลิลิตร 1 ) การรักษาด้วยเซลล์สระว่ายน้ำ LAB (1,010 เซลล์มิลลิลิตร 1 ) เป็นเวลา 30 และ 60 นาทีตั้งแต่ 0.442? เพื่อ 0.022 0.443? 0.011 งะมล? 1 สำหรับนมรับการรักษาด้วยเซลล์ S. cerevisiae (109 มิลลิลิตรเซลล์ 1 ) ในช่วงเวลาที่ติดต่อเดียวกันหรือเอส cerevisiae þ LAB เซลล์ในช่วง 30 นาทีความเข้มข้นของ AFM1 หมายถึงการเป็น 0.037? 0.004 0.048 ไป? 0.002 งะมิลลิลิตร 1 และ 0.042? 0.003 งะมิลลิลิตร 1 ตามลำดับ. ตัวอย่างนมที่รักษาด้วย S. cerevisiae þเซลล์ LAB สระว่ายน้ำสำหรับ 60 นาทีไม่มีการตรวจพบระดับของ AFM1. ร้อยละของ AFM1 ผูกพันในหางนมยูเอชทีโดยจุลินทรีย์ศึกษาครั้งหลังจากที่การติดต่อที่แตกต่างกันจะถูกนำเสนอในตาราง 2. สระว่ายน้ำห้องปฏิบัติการแสดงให้เห็นว่าร้อยละเฉลี่ยของ AFM1 ผูกพันของ11.5? 2.3% และ 11.7? 4.4% เป็นเวลา 30 นาทีและ 60 นาทีตามลำดับ. C
การแปล กรุณารอสักครู่..
ถูกนำ ( ชั้นนม ) เอาออกสำหรับการวิเคราะห์
afm1 . กระบวนการเดียวกันตามที่อธิบายไว้ข้างต้นมีการปฏิบัติในการควบคุมบวกทำสำเนาสามฉบับ ( เฉพาะ
afm1 จากหางนมที่มี 0.5 mg ผม 1
) , การควบคุมด้านลบ ( S . cerevisiae Lab Pool หรือ S .
S . cerevisiae þแล็บพูล ) และไม่แหลมหางนมการควบคุม .
2.3 การวิเคราะห์ของอะฟลาท็อกซิน M1 ในน้ำนม
การสกัดและการทำให้บริสุทธิ์ของน่านจากวิธีผูก
สำหรับ afm1 กำหนดจำนวนตามที่อธิบายไว้โดย
Fernandes คอเรีย rosim kobashigawa , , , และ โอลิเวียร่า ( 2012 ) กับ
บางดัดแปลงที่เสนอโดยผู้ผลิตของ immunoaffinity
คอลัมน์ ( neocolumn neogen neogen , ยุโรป , จำกัด ,
สกอตแลนด์สหราชอาณาจักร ) การจำแนกชนิดและปริมาณของ afm1 ตกค้าง
ทำโดยฉีด 20 มิลลิลิตร ตัวอย่างสารสกัดที่มีประสิทธิภาพสูง
liquid chromatography ( HPLC ) โดยใช้ Shimadzu
( โตเกียว , ญี่ปุ่น ) 10vp โครมาโทกราฟีของเหลวที่มี 10 แอคเซิลเรืองแสง
ตรวจจับ ( ความตื่นเต้นที่ 366 nm และการปล่อยเหนือ 428 nm )
คอลัมน์ ) เป็นฟิวชั่น ( 4.6 150 มม. 4 มม. phenomenex ซ์
, , CA , USA ) และชิมฟรีก่อนคอลัมน์ ( 4 10 มม. , 5 g-ods CLC
มม. ) มาใช้ระบบมีเสถียรภาพสำหรับหนึ่งชั่วโมง ในอัตราการไหล
1 มิลลิลิตร / นาทีที่อุณหภูมิห้องกับ Isocratic มือถือ
เฟสที่มีน้ำ ไน และเมทานอล ( 60:20:20 ) .
ภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้เวลาการเก็บรักษาสำหรับ afm1 ประมาณ 5 นาที รูปโค้งของ afm1
เตรียมโซลูชั่นมาตรฐานของ afm1 ( ใช้ Sigma , เซนต์ หลุยส์ โม , USA ) ก่อนหน้านี้
การประเมินผลตามที่สกอตต์ ( 1990 )ที่ความเข้มข้น 0.5 , 1.0 , 2.5 , 5.0 และ 10.0 กรัมมิลลิลิตร
1
กำหนดขีด จำกัด ของวิธีการวิเคราะห์
คือ 0.01 ของมล 1
, พิจารณาจำนวนเงินขั้นต่ำของ
afm1 ที่สามารถสร้างยอดและสามครั้งกว่า
( ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน . สมการด้านล่างถูกใช้เพื่อคำนวณหาค่าของ afm1
ผูกพันด้วยจุลินทรีย์ทดสอบในแต่ละการทดสอบ ตัวอักษร B , C และ E
เป็นค่าเฉลี่ยของพื้นที่และยอดของตัวควบคุมบวก nonspiked
หางนมการควบคุมตัวอย่างวิเคราะห์และลบตัวควบคุม
ตามลำดับ เป็น¼½ð B C D E Þ ð Þ
b C
* 100
2.4 . สถิติที่ใช้ในการวิเคราะห์ข้อมูลทางสถิติการวิเคราะห์ afm1 ผูกพัน
) ได้ดำเนินการในรูปแบบเชิงเส้นทั่วไปของ SAS ( SAS , 2004 ) โดยการฝึกทดสอบ
สำหรับความแตกต่างระหว่างเชื้อจุลินทรีย์ทดสอบ ( S .
จากห้องปฏิบัติการและ S . cerevisiae þ Lab ) และติดต่อที่ p < 0.05 .
3 ผลและการอภิปราย
ตารางที่ 1 แสดงระดับ afm1 ในยูเอชทีอ่านตัวอย่างนมใน
) ทำปฏิกิริยากับความร้อนฆ่าเชื้อ S . cerevisiae เซลล์เพียงอย่างเดียวหรือร่วมกับห้องปฏิบัติการ
สระเซลล์ ในระดับ afm1 ถูกแทงเรียดตัวอย่างนม
( 0.5 ng 1
afm1 มลการรักษาด้วยเซลล์ ( Lab ) สระ 1010 เซลล์
ml 1
) เป็นเวลา 30 และ 60 นาทีมีค่าจาก 0.422 0.022
0.443 0.011 ของมล 1
สำหรับยังปฏิบัติกับ S . cerevisiae เซลล์ ( เซลล์ 1 มล. 109
) ในช่วงเวลาติดต่อเดียวกัน หรือเชื้อ S . cerevisiae þ Lab
เซลล์ในช่วง 30 นาที afm1 หมายถึงความเข้มข้น 0.005 0.004 0.002
ถึง 0.048 ของมล 1 และ 0.042 0.003 ของมล 1
ตัวอย่างนมตามลำดับ การรักษาด้วย .โดยþเซลล์พูลแล็บ 60 นาทีไม่มีการตรวจพบระดับของ afm1
.
เปอร์เซ็นต์ของ afm1 ผูกพันในยูเอชทีหางนมโดย
จุลินทรีย์การศึกษาหลังจากเวลาติดต่อที่แตกต่างกันนำเสนอ
ในตารางที่ 2 ห้องพูล พบ หมายถึง ร้อยละของ afm1 ผูกพันของ
11.5 2.3% และ 11.7 4.4 % เป็นเวลา 30 นาทีและ 60 นาที ตามลำดับ
c
afm1 . กระบวนการเดียวกันตามที่อธิบายไว้ข้างต้นมีการปฏิบัติในการควบคุมบวกทำสำเนาสามฉบับ ( เฉพาะ
afm1 จากหางนมที่มี 0.5 mg ผม 1
) , การควบคุมด้านลบ ( S . cerevisiae Lab Pool หรือ S .
S . cerevisiae þแล็บพูล ) และไม่แหลมหางนมการควบคุม .
2.3 การวิเคราะห์ของอะฟลาท็อกซิน M1 ในน้ำนม
การสกัดและการทำให้บริสุทธิ์ของน่านจากวิธีผูก
สำหรับ afm1 กำหนดจำนวนตามที่อธิบายไว้โดย
Fernandes คอเรีย rosim kobashigawa , , , และ โอลิเวียร่า ( 2012 ) กับ
บางดัดแปลงที่เสนอโดยผู้ผลิตของ immunoaffinity
คอลัมน์ ( neocolumn neogen neogen , ยุโรป , จำกัด ,
สกอตแลนด์สหราชอาณาจักร ) การจำแนกชนิดและปริมาณของ afm1 ตกค้าง
ทำโดยฉีด 20 มิลลิลิตร ตัวอย่างสารสกัดที่มีประสิทธิภาพสูง
liquid chromatography ( HPLC ) โดยใช้ Shimadzu
( โตเกียว , ญี่ปุ่น ) 10vp โครมาโทกราฟีของเหลวที่มี 10 แอคเซิลเรืองแสง
ตรวจจับ ( ความตื่นเต้นที่ 366 nm และการปล่อยเหนือ 428 nm )
คอลัมน์ ) เป็นฟิวชั่น ( 4.6 150 มม. 4 มม. phenomenex ซ์
, , CA , USA ) และชิมฟรีก่อนคอลัมน์ ( 4 10 มม. , 5 g-ods CLC
มม. ) มาใช้ระบบมีเสถียรภาพสำหรับหนึ่งชั่วโมง ในอัตราการไหล
1 มิลลิลิตร / นาทีที่อุณหภูมิห้องกับ Isocratic มือถือ
เฟสที่มีน้ำ ไน และเมทานอล ( 60:20:20 ) .
ภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้เวลาการเก็บรักษาสำหรับ afm1 ประมาณ 5 นาที รูปโค้งของ afm1
เตรียมโซลูชั่นมาตรฐานของ afm1 ( ใช้ Sigma , เซนต์ หลุยส์ โม , USA ) ก่อนหน้านี้
การประเมินผลตามที่สกอตต์ ( 1990 )ที่ความเข้มข้น 0.5 , 1.0 , 2.5 , 5.0 และ 10.0 กรัมมิลลิลิตร
1
กำหนดขีด จำกัด ของวิธีการวิเคราะห์
คือ 0.01 ของมล 1
, พิจารณาจำนวนเงินขั้นต่ำของ
afm1 ที่สามารถสร้างยอดและสามครั้งกว่า
( ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน . สมการด้านล่างถูกใช้เพื่อคำนวณหาค่าของ afm1
ผูกพันด้วยจุลินทรีย์ทดสอบในแต่ละการทดสอบ ตัวอักษร B , C และ E
เป็นค่าเฉลี่ยของพื้นที่และยอดของตัวควบคุมบวก nonspiked
หางนมการควบคุมตัวอย่างวิเคราะห์และลบตัวควบคุม
ตามลำดับ เป็น¼½ð B C D E Þ ð Þ
b C
* 100
2.4 . สถิติที่ใช้ในการวิเคราะห์ข้อมูลทางสถิติการวิเคราะห์ afm1 ผูกพัน
) ได้ดำเนินการในรูปแบบเชิงเส้นทั่วไปของ SAS ( SAS , 2004 ) โดยการฝึกทดสอบ
สำหรับความแตกต่างระหว่างเชื้อจุลินทรีย์ทดสอบ ( S .
จากห้องปฏิบัติการและ S . cerevisiae þ Lab ) และติดต่อที่ p < 0.05 .
3 ผลและการอภิปราย
ตารางที่ 1 แสดงระดับ afm1 ในยูเอชทีอ่านตัวอย่างนมใน
) ทำปฏิกิริยากับความร้อนฆ่าเชื้อ S . cerevisiae เซลล์เพียงอย่างเดียวหรือร่วมกับห้องปฏิบัติการ
สระเซลล์ ในระดับ afm1 ถูกแทงเรียดตัวอย่างนม
( 0.5 ng 1
afm1 มลการรักษาด้วยเซลล์ ( Lab ) สระ 1010 เซลล์
ml 1
) เป็นเวลา 30 และ 60 นาทีมีค่าจาก 0.422 0.022
0.443 0.011 ของมล 1
สำหรับยังปฏิบัติกับ S . cerevisiae เซลล์ ( เซลล์ 1 มล. 109
) ในช่วงเวลาติดต่อเดียวกัน หรือเชื้อ S . cerevisiae þ Lab
เซลล์ในช่วง 30 นาที afm1 หมายถึงความเข้มข้น 0.005 0.004 0.002
ถึง 0.048 ของมล 1 และ 0.042 0.003 ของมล 1
ตัวอย่างนมตามลำดับ การรักษาด้วย .โดยþเซลล์พูลแล็บ 60 นาทีไม่มีการตรวจพบระดับของ afm1
.
เปอร์เซ็นต์ของ afm1 ผูกพันในยูเอชทีหางนมโดย
จุลินทรีย์การศึกษาหลังจากเวลาติดต่อที่แตกต่างกันนำเสนอ
ในตารางที่ 2 ห้องพูล พบ หมายถึง ร้อยละของ afm1 ผูกพันของ
11.5 2.3% และ 11.7 4.4 % เป็นเวลา 30 นาทีและ 60 นาที ตามลำดับ
c
การแปล กรุณารอสักครู่..
ภาษาอื่น ๆ
การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.
- จานรองสบู่แตก
- เลยมั้ง
- ฉันเบื่อคนเห็นแก่ตัว
- stand by me
- ฉันเบื่อคนเห็นแก่ตัว
- ยินดีที่ได้รู้จัก
- สามารถอ่านได้เข้าใจชัดเจน
- Unit members receive relevant informatio
- ฝันร้ายของฉันคือการตื่นสาย
- โรงภาพยนต์
- ok iam going
- วีดีโอตัวแรกจะเป็นการแนะนำตัว
- what you put white on you
- taken
- กรุณาแก้ไข P/O ของคุณจากจำนวน 384 เป็น 4
- เราคุยกันอย่างสนุก
- Material
- If you care about me. We can share inter
- If the user logs out before the ―License
- ตัวแปรที่ต้องการศึกษาสามารถพยากรณ์ได้หรื
- and acute illness.
- Exotic
- ภาพเดิม
- The principles of art are what happens t
