PCRSensitivities of uniplex RT-PCR

PCRSensitivities of uniplex RT-PCR and mRT-PCR for the detectionof three pear viruses were determined by using 10-fold serial dilu-tions of cDNAs generated from total RNA extracted from in vitrocultured pear plants infected by all three target viruses and plas-mids containing CP genes of three viruses, respectively. When theplasmids were used as templates (Fig. 3B), the detection limits ofthe uniplex RT-PCR assays were 10−4for all three viruses, and themRT-PCR assay raised the same detection limit of 10−4for ASPV andACLSV and a slightly lower limit of 10−3for ASGV. When the cDNAswere used as templates (Fig. 3A), the detection limits of the uniplexRT-PCR assays were 10−2for ASPV and ACLSV, respectively, and thedetection limit for ASGV was 10−1(Fig. 3A, a). All three viruses werewell detected at dilution of 10−1(equivalent to 100 g of plant tis-sue), and their detection limit was at dilution of 10−2in mRT-PCR.Those results indicated that the sensitivity of the mRT-PCR assayfor the three viruses was similar to that of the uniplex assays andsuitable for the simultaneous detection of those three viruses.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

PCRSensitivities uniplex RT-PCR และรถไฟฟ้าใต้ดิน-PCR สำหรับ detectionof สามต้นไวรัสถูกกำหนดโดย tions ประจำแรมดีลู 10-fold ของ cDNAs สร้างจากอาร์เอ็นเอรวมสกัดจากพืชต้น vitrocultured เชื้อไวรัสเป้าหมายสามและ plas mids มี CP ยีนของไวรัสสาม ทั้งหมดตามลำดับ เมื่อ theplasmids ใช้เป็นแม่แบบ (Fig. 3B), ตรวจสอบขีดจำกัดของ uniplex RT-PCR assays ถูกไวรัสทั้งหมดสาม 10−4for และ themRT PCR assay ยกเดียวตรวจจำนวน 10−4for ASPV andACLSV และ 10−3for ASGV จำกัดต่ำกว่าเล็กน้อย เมื่อ cDNAswere ที่ใช้เป็นแม่แบบ (Fig. 3A), ตรวจสอบขีดจำกัดของ assays uniplexRT PCR ได้ 10−2for ASPV และ ACLSV ตามลำดับ และวงเงิน thedetection ASGV เป็น 10−1 (Fig. 3A คำ) Werewell สามไวรัสทั้งหมดที่ตรวจพบที่เจือจางของ 10−1 (เทียบเท่ากับ 100 กรัมพืชมอก.บางซื่อ), และการตรวจสอบวงเงินที่เจือจางผล mRT PCR.Those 10−2in ระบุว่า ความไวของ mRT PCR assayfor สามไวรัสคล้ายกับของ uniplex assays andsuitable สำหรับการตรวจพบไวรัสที่สามพร้อมกัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

PCRSensitivities ของ Uniplex RT-PCR และ MRT-PCR สำหรับ detectionof สามไวรัสลูกแพร์ได้รับการพิจารณาโดยใช้ 10 เท่าทั้งนี้ dilu อนุกรมของ cDNAs สร้างขึ้นจาก RNA รวมสกัดจากพืชลูกแพร์ vitrocultured ติดเชื้อโดยทั้งสามไวรัสเป้าหมายและพลาส-เสียงกลางที่มี CP ยีนของไวรัสสามตามลำดับ เมื่อ theplasmids ถูกนำมาใช้เป็นแม่แบบ (รูป. 3B) ข้อ จำกัด การตรวจสอบการตรวจ ofthe Uniplex RT-PCR เป็น 10-4for ทั้งสามไวรัสและทดสอบ themRT-PCR ยกขีด จำกัด การตรวจสอบเดียวกันของ 10-4for ASPV andACLSV และวงเงินที่ต่ำกว่าเล็กน้อย ของ 10-3for ASGV เมื่อ cDNAswere ใช้เป็นแม่แบบ (รูป. 3A) ข้อ จำกัด ของการตรวจสอบการตรวจ uniplexRT-PCR เป็น 10-2for ASPV และ ACLSV ตามลำดับและสำหรับวงเงิน thedetection ASGV เป็น 10-1 (รูป. 3A, ก) ทั้งสาม werewell ไวรัสที่ตรวจพบในการลดสัดส่วนของ 10-1 (เทียบเท่า 100 กรัมของพืช tis-ฟ้อง) และ จำกัด การตรวจสอบของพวกเขาอยู่ที่การลดสัดส่วนของ 10-2in ผล MRT-PCR.Those ชี้ให้เห็นว่ามีความไวของ MRT-วิธี PCR assayfor สามไวรัสก็คล้ายคลึงกับที่ของการตรวจ Uniplex andsuitable สำหรับการตรวจสอบพร้อมกันของทั้งสามไวรัส

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

pcrsensitivities ของ uniplex RT-PCR และ MRT PCR สำหรับผู้สามลูกแพร์ไวรัสวิเคราะห์โดยใช้อนุกรม 10 พับ dilu tions ของ cdnas ที่เกิดจากอาร์เอ็นเอทั้งหมดสกัดจากลูกแพร์ใน vitrocultured พืชที่ติดเชื้อโดยเป้าหมายทั้งสามไวรัสและสถานที่ที่มียีนของไวรัสน่ะ ( 3 ) เมื่อ theplasmids ถูกใช้เป็นแม่แบบ ( รูปที่ 3B )การตรวจสอบขอบเขตของ uniplex RT-PCR วิธี = 10 − 4for ทั้งไวรัส และ themrt PCR assay ยกเดียวกันขีดจำกัด 10 − 4for aspv andaclsv และวงเงินลดลงเล็กน้อย 10 asgv 3for − . เมื่อ cdnaswere ใช้เป็นแม่แบบ ( ภาพที่ 3 ) , การตรวจสอบขอบเขตของ uniplexrt PCR วิธี = 10 − 2 เพราะ aspv และ aclsv ตามลำดับ และ thedetection จํากัด asgv 10 − 1 ( รูปที่ 3A ,) ทั้งสาม werewell ตรวจพบไวรัสที่เจือจาง 10 − 1 ( เทียบเท่ากับ 100 กรัมของพืช  มอก. ฟ้อง ) และขีดจำกัดในการเจือจาง 10 − 2in ผล mrt-pcr.those พบว่า ความไวของเชื้อ assayfor MRT สามไวรัสที่คล้ายกับที่ของ uniplex ) andsuitable ตรวจหาพร้อมกันสาม ไวรัส