2.3. Incubation of pVNPs in murine serum and plants infectionWhole blood was collected from C57BL/6J mice (Harlan Labora-tories, Inc., Indianapolis, IN, USA) and allowed to clot by incubationat RT for 15 min. The clot was pelleted through centrifugation at2000 × g for 10 min at 4◦C and the overlying serum collected. pVNPswere diluted in serum at a concentration of 400 ng/l and incu-bated at 37◦C for 0.5, 2, 4 and 24 h. In control samples pVNPs werediluted and incubated with phosphate buffered saline (PBS; 10 mMNa2HPO4, 10 mM NaH2PO4, 150 mM NaCl, pH 7.2). At each timeinterval, an aliquot of pVNPs was collected and used to infect N. ben-thamiana L. plants, as described above (with 20, 2 or 0.2 g/leaf). Asadditional control, plants were infected with 20 g/leaf of pVNPsdiluted in PBS or serum but not incubated at 37◦C, to test if serumper se could hamper viral infectivity.Plants were daily controlled to monitor the onset of infectionsymptoms
2.3 การบ่มของ pVNPs ในพืช infectionWhole เลือดและซีรั่ม murine ถูกรวบรวมจากหนู C57BL/6J (ฮาร์ลาน Labora tories, Inc. อินเดียนาโพลิส ใน สหรัฐอเมริกา) และอนุญาตให้ clot โดย incubationat RT ใน 15 นาที การ clot ได้ pelleted ผ่าน centrifugation at2000 × g สำหรับ 4◦C และเซรั่มอยู่เหนือกว่าที่รวบรวม 10 นาที ผสมในเซรั่มที่เข้มข้น 400 pVNPswere ng / l และ incu bated ที่ 37◦C 0.5, 2, 4 และ 24 h ในตัวควบคุมตัวอย่าง pVNPs werediluted และ incubated ด้วยน้ำเกลือฟอสเฟต buffered (PBS, 10 mMNa2HPO4, 10 มม. NaH2PO4, NaCl, 150 มม. pH 7.2) ในแต่ละ timeinterval เป็นส่วนลงตัวของ pVNPs ถูกรวบรวม และใช้ในการติดเชื้อตอนเหนือเบน-thamiana L. พืช ตามที่อธิบายไว้ด้านบน (มี 20, 2 หรือ 0.2 g/ใบ) Asadditional ควบคุม พืชติดเชื้อ g 20 ใบของ pVNPsdiluted ใน PBS หรือเซรั่ม แต่ไม่ incubated ใน 37◦C การทดสอบ serumper se สามารถขัดขวาง infectivity ไวรัส ทุกวันถูกควบคุมพืชการตรวจสอบของ infectionsymptoms
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.3 บ่มเพาะของ pVNPs ในซีรั่มหมาและพืชเลือด infectionWhole ถูกเก็บรวบรวมจาก C57BL / 6J หนู (ฮาร์ลาน Labora-ดังสนั่น, Inc อินเดียแนโพลิ, IN, USA) และได้รับอนุญาตให้ก้อนโดย incubationat RT สำหรับ 15 นาที ก้อนเม็ดได้ผ่านการหมุนเหวี่ยง at2000 ×กรัมเป็นเวลา 10 นาทีที่4◦Cและซีรั่มวางที่เก็บรวบรวม pVNPswere เจือจางในซีรั่มที่เข้มข้น 400 ng /? ลิตรและ incu-ซึ้งน้อยลงที่37◦C 0.5, 2, 4 และ 24 ชั่วโมง ในตัวอย่างควบคุม pVNPs werediluted และบ่มด้วยน้ำเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (พีบีเอส 10 mMNa2HPO4 10 มิลลิ NaH2PO4 150 มิลลิโซเดียมคลอไรด์มีค่า pH 7.2) ในแต่ละ timeinterval การหารของ pVNPs ถูกเก็บรวบรวมและใช้ในการติดเชื้อเอ็นเบน-thamiana พืชลิตรตามที่อธิบายไว้ข้างต้น (20, 2 หรือ 0.2? g / ใบ) ควบคุม Asadditional พืชมีการติดเชื้อ 20 กรัม / ใบ pVNPsdiluted ในพีบีเอสหรือซีรั่ม แต่ไม่บ่มที่37◦Cเพื่อทดสอบว่า serumper SE อาจขัดขวาง infectivity.Plants ไวรัสถูกควบคุมในชีวิตประจำวันในการตรวจสอบการโจมตีของ infectionsymptoms
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.3 บ่ม pvnps ในซีรั่มและพืช ~ เลือด infectionwhole รวบรวมจาก c57bl / 6j หนู ( ฮาร์แลน labora ดังสนั่น , อิงค์ , Indianapolis , สหรัฐอเมริกา ) และอนุญาตให้แข็งตัวโดย incubationat RT เป็นเวลา 15 นาที ลิ่มเลือดคือเม็ดผ่าน 3 at2000 × G สำหรับ 10 นาทีที่ 4 ◦ C เซรั่มและวางเก็บpvnpswere เจือจางในซีรั่มความเข้มข้น 400 กรัม / ลิตร และลด incu ที่ 37 ◦ C 0 , 2 , 4 และ 24 ชั่วโมงตัวอย่างควบคุมและ pvnps werediluted แยกเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( PBS 10 mmna2hpo4 10 มม. nah2po4 150 mM NaCl , pH 7.2 ) ในแต่ละช่วงเวลาที่กำหนด มีการเทศนาของ pvnps ถูกเก็บรวบรวมและใช้ติดเอ็น เบน thamiana ล. พืชตามที่อธิบายไว้ข้างต้น ( 20 , 2 หรือ 0.2 กรัม / ใบ )ควบคุม asadditional , พืชติดเชื้อ 20 กรัม / ใบ pvnpsdiluted ใน PBS หรือ เซรั่ม แต่ไม่ได้บ่มที่ 37 ◦ C เพื่อทดสอบว่า serumper SE สามารถขัดขวางไวรัส การติดเชื้อ พืชมีทุกวัน ควบคุมตรวจสอบการ infectionsymptoms
การแปล กรุณารอสักครู่..
