Preparation of NEFA treatments
The types and concentrations of free fatty acids used are
based on the in vivo concentrations found in the serum of
high-yielding dairy cows in negative energy balance [6].
The oviductal luminal fluid (OLF) is essentially an ultrafiltration
from the serum [41], complemented with a cycledependent
active secretion of the outlining epithelial cells
[42,43], follicular fluid, and cumulus cells released after
ovulation [44,45]. Therefore, it is assumable that NEFAs can
occur in the OLF like they occur in the serum. Preliminary
data in our laboratory suggest a correlation between serum
NEFA concentrations and those measured in the OLF,
similar to the observations made between serum. On the
basis of these findings, we established four treatment
groups: (1) control group without NEFAs, (2) basal physiological
NEFA concentrations of 72 mM, ranging up until (3)
360 mM in moderate elevated though physiological concentrations,
and (4) 720 mM in high pathologic and
potentially cytotoxic metabolic conditions.
Stearic acid (SA), palmitic acid (PA), and oleic acid (OA;
Sigma–Aldrich) were dissolved in a stock solution of pure
ethanol at concentrations of 25, 150, and 200 mM,
respectively. These ethanol stock solutions were vortex
mixed for 4 minutes and diluted to obtain the desired final
concentration in the culture medium. Before use, all media
were vigorously shaken and filter sterilized under aseptic
conditions. Non-esterified fatty acid solvability was
checked in all NEFA medium samples before exposure to
determine whether the intended concentrations were
การเตรียมการของ NEFA รักษาชนิดและความเข้มข้นของกรดไขมันอิสระที่ใช้ขึ้นอยู่กับความเข้มข้นในสัตว์ทดลองที่พบในซีรั่มของผลผลิตสูงนมสมดุลพลังงานลบ [6]น้ำมัน luminal oviductal (OLF) เป็นหลักการ ultrafiltrationจากเซรั่ม [41], ครบครัน ด้วย cycledependentงานหลั่งเซลล์ epithelial เค้าร่าง[42,43], follicular fluid และเซลล์ลัสออกหลังตกไข่ [44,45] จึง มันเป็น assumable NEFAs สามารถเกิดขึ้นใน OLF เหมือนจะเกิดขึ้นในซีรั่ม เบื้องต้นความสัมพันธ์ระหว่างเซรั่มแนะนำข้อมูลในห้องปฏิบัติการของเราความเข้มข้นของ NEFA และที่วัดใน OLFคล้ายกับข้อสังเกตุระหว่างเซรั่ม ในการพื้นฐานสิ่งเหล่านี้ เราสร้างรักษา 4กลุ่ม: กลุ่ม (1) ควบคุม โดย NEFAs, (2) โรคสรีรวิทยาความเข้มข้นของ NEFA 72 มม. ตั้งแต่จนถึง (3)ความเข้มข้นสูงแต่สรีรวิทยาปานกลาง 360 มม.และ (4) สูง 720 มม. pathologic และสภาพ cytotoxic อาจเผาผลาญกรด stearic (SA), กรด palmitic (PA), และ oleic กรด (OASigma–Aldrich) ได้ละลายในโซลูชันหุ้นของแท้เอทานอลที่ความเข้มข้น ของ 25, 150, 200 mMตามลำดับ โซลูชันเหล่านี้สต็อกเอทานอลมี vortexผสม 4 นาที และทำให้สุดท้ายต้องได้รับความเข้มข้นในสื่อวัฒนธรรม ก่อนใช้ สื่อทั้งหมดดั่งถูกเขย่า และกรอง sterilized ภายใต้เข้มข้นเงื่อนไขการ Solvability กรดไขมัน esterified ไม่ถูกเช็คอินทั้งหมด NEFA ปานกลางตัวอย่างก่อนที่จะสัมผัสกับตรวจสอบว่า ความเข้มข้นที่กำหนดไว้ได้
การแปล กรุณารอสักครู่..

การเตรียมความพร้อมของการรักษา NEFA
ชนิดและความเข้มข้นของกรดไขมันอิสระที่ใช้จะขึ้นอยู่กับความเข้มข้นในร่างกายที่พบในซีรั่มของที่ให้ผลผลิตสูงโคนมในสมดุลพลังงานเชิงลบ[6]. ของเหลวที่ท่อนำไข่ luminal (OLF) เป็นหลักกรองจากซีรั่ม [41], ครบครันด้วย cycledependent หลั่งที่ใช้งานของเซลล์เยื่อบุผิวสรุป[42,43] ของเหลว follicular และเซลล์คิวมูลัสการปล่อยตัวหลังจากการตกไข่[44,45] ดังนั้นจึงเป็นที่ assumable NEFAs สามารถเกิดขึ้นในOLF เช่นที่พวกเขาเกิดขึ้นในซีรั่ม เบื้องต้นข้อมูลในห้องปฏิบัติการของเราแสดงให้เห็นความสัมพันธ์ระหว่างซีรั่มความเข้มข้นของNEFA และผู้ที่อยู่ในวัด OLF ที่คล้ายกับการสังเกตระหว่างซีรั่ม บนพื้นฐานของการค้นพบเหล่านี้เราจัดตั้งสี่รักษากลุ่มคือ(1) กลุ่มควบคุมโดยไม่ต้อง NEFAs (2) พื้นฐานทางสรีรวิทยาความเข้มข้นของNEFA 72 มิลลิตั้งแต่จนถึง (3) 360 มิลลิในระดับปานกลางสูงแม้ว่าความเข้มข้นทางสรีรวิทยาและ(4 ) 720 มิลลิในพยาธิสูงและเงื่อนไขการเผาผลาญอาหารเป็นพิษที่อาจเกิดขึ้น. กรดสเตีย (SA) กรดปาล์มิติ (PA) และกรดโอเลอิก (OA; Sigma-Aldrich) ละลายในการแก้ปัญหาสต็อกบริสุทธิ์เอทานอลที่ความเข้มข้น25, 150, และ 200 มิลลิ, ตามลำดับ โซลูชั่นเหล่านี้สต็อกเอทานอลเป็นน้ำวนผสม 4 นาทีและจะได้รับการปรับลดครั้งสุดท้ายที่ต้องการความเข้มข้นในสื่อวัฒนธรรม ก่อนที่จะใช้สื่อทั้งหมดถูกเขย่าอย่างจริงจังและกรองฆ่าเชื้อภายใต้ปลอดเชื้อเงื่อนไข ไขมัน Non-esterified solvability กรดได้รับการตรวจสอบในทุกตัวอย่างNEFA กลางก่อนที่จะสัมผัสกับตรวจสอบว่ามีความเข้มข้นที่ตั้งใจไว้ได้
การแปล กรุณารอสักครู่..

การเตรียมการรักษา nefa
ชนิดและความเข้มข้นของกรดไขมันอิสระที่ใช้
ตามในความเข้มข้นชนิดที่พบในโคนมที่ให้ผลผลิตสูงเซรั่ม
สมดุลของพลังงานเชิงลบ [ 6 ] .
+ oviductal ของเหลว ( olf ) เป็นหลักเป็นกรอง
จากเซรุ่ม [ 41 ] , ครบครันด้วย cycledependent
สรุปงานกระตุ้นเซลล์เยื่อ
[ 42,43 ]ปัจฉิมของเหลวและเซลล์คิวมูลัสออกหลังจากการตกไข่ 44,45
[ ] ดังนั้น จึงเป็น assumable ที่เนฟาสสามารถ
เกิดขึ้นใน olf เช่นที่พวกเขาเกิดขึ้นในซีรั่ม ข้อมูลเบื้องต้น
ในห้องปฏิบัติการของเราแนะนำว่า ความสัมพันธ์ระหว่าง ปริมาณเซรั่ม
nefa และวัดใน olf
, คล้ายกับสังเกตระหว่าง เซรั่ม บนพื้นฐานของผลนี้
เราก่อตั้งสี่รักษากลุ่ม( 1 ) กลุ่มควบคุมโดยไม่เนฟาส ( 2 ) พื้นฐานทางสรีรวิทยา
nefa ความเข้มข้นของ 72 มิลลิเมตร ตั้งแต่จนถึง ( 3 )
360 มม. ในระดับความเข้มข้นสูง แม้ว่าทางสรีรวิทยา ,
( 4 ) 720 มม. สูงและเงื่อนไขอาจสลายพิษพยาธิวิทยา
.
กรดสเตียริก ( SA ) , กรดปาล์มิติก ( ปา ) และกรดโอเลอิก ( OA ) ;
ซิกม่า Aldrich ) ถูกละลายในสารละลายบริสุทธิ์
หุ้นเอทานอลที่ความเข้มข้น 25 , 150 และ 200 mm
ตามลำดับ เหล่านี้เอทานอลหุ้นโซลูชั่น Vortex
ผสม 4 นาทีและเจือจางให้ได้ความเข้มข้นที่ต้องการ สุดท้าย
ในวัฒนธรรมสื่อ ก่อนใช้ทุกสื่อ
คือการให้ความบันเทิง และกรองฆ่าเชื้อภายใต้สภาวะปลอดเชื้อ
กรดไขมันไม่ esterified solvability ถูกตรวจสอบในตัวอย่าง
nefa ก่อนแสงปานกลางตรวจสอบว่าปริมาณที่ตั้งไว้
การแปล กรุณารอสักครู่..
