Cetyltri-ammonium bromide; CTAB, 1.

Cetyltri-ammonium bromide; CTAB, 1.4 M NaCl, 0.2% v/v β-
mercaptoethanol, 20 mM EDTA, 100 mM TrisHCl pH 8, 0.2
mg/ml proteinase K), and then incubated at 55 °C for 6 hours.
Subsequently, proteins were precipitated using phenol/
chloroform (1:1) once, followed by phenol/ chloroform/
isoamylalcohol (25:24:1), centrifuged at 13,000 g for 10 min (4
°C) twice, and finally washed with chloroform (1:1). The upper
aqueous layer was removed, and DNA was precipitated in
isopropanol (2:3 v/v), mixed gently by inverting the tube a few
times, put on ice for 15 min, and then spun in a microcentrifuge
at 13,000 g for 5 min. After centrifugation, the supernatant was
discarded; the DNA pellets were washed in 75% absolute
ethanol, and centrifuged at 13,000 g for 5 min. After air-drying,
the DNA pellet was re-suspended in TE buffer (10 mM Tris,
1mM EDTA, pH 8.0) and stored at -20 °C until analysis. The
DNA concentration and purity were estimated

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โบรไมด์แอมโมเนีย Cetyltri CTAB, 1.4 M NaCl, 0.2% v/v β-mercaptoethanol, EDTA 20 มม. 100 มม. TrisHCl pH 8, 0.2mg/ml proteinase K), และจากนั้น ได้รับการกกที่ 55 ° C 6 ชั่วโมงต่อมา โปรตีนตกตะกอนการใช้ฟีนอล /คลอโรฟอร์ม (1:1) ครั้ง ตาม ด้วยฟีนอลคลอโรฟอร์ม/ /isoamylalcohol (25:24:1), ผลิตภัณฑ์ที่ 13,000 g 10 นาที (4° C) สองครั้ง และสุดท้ายล้าง ด้วยคลอโรฟอร์ม (1:1) ด้านบนชั้นของสารละลายถูกลบออก และมีการตกตะกอนดีเอ็นเอในisopropanol (2:3 v/v), ผสมเบา ๆ ด้วยสีตรงกันข้ามหลอดกี่ใส่น้ำแข็ง 15 นาที แล้ว ปั่นในเครื่องไมโครที่ g 13,000 5 นาที หลังจากหมุนเหวี่ยง supernatant ถูกละทิ้ง เม็ดดีเอ็นเอถูกล้างใน 75% แน่นอนเอทานอล และเหวี่ยงที่ 13,000 g 5 นาที หลัง air-dryingเม็ดดีเอ็นเอถูกระงับอีกในบัฟเฟอร์ TE (10 mM ทริส1 mM EDTA, pH 8.0) และเก็บไว้ที่-20 ° C จนถึงการวิเคราะห์ การประมาณดีเอ็นเอความเข้มข้นและความบริสุทธิ์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โบรไมด์ Cetyltri-แอมโมเนียม; CTAB 1.4 M NaCl 0.2% v / V β-
mercaptoethanol, 20 มิลลิเมตร EDTA, 100 มิลลิเมตร TrisHCl ค่า pH 8 0.2
mg / ml โปร K) และจากนั้นบ่มที่อุณหภูมิ 55 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 6 ชั่วโมง.
ต่อมาได้รับการตกตะกอนโปรตีนโดยใช้ ฟีนอล /
คลอโรฟอร์ม (1: 1) หนึ่งครั้งตามด้วยฟีนอล / คลอโรฟอร์ม /
isoamylalcohol (25: 24: 1), หมุนเหวี่ยงที่ 13,000 กรัมเป็นเวลา 10 นาที (4
° C) สองครั้งและในที่สุดก็ล้างด้วยคลอโรฟอร์ม (1: 1) บน
ชั้นน้ำจะถูกลบออกและดีเอ็นเอตกตะกอนใน
isopropanol (2: 3 v / v) ผสมเบา ๆ โดย inverting หลอดไม่กี่
ครั้งใส่น้ำแข็งเป็นเวลา 15 นาทีและจากนั้นปั่นในไมโคร
13,000 กรัม 5 นาที หลังจากปั่นสารละลายที่ถูก
ทิ้ง; ดีเอ็นเอเม็ดถูกล้างในที่แน่นอน 75%
เอทานอลและหมุนเหวี่ยงที่ 13,000 กรัมเป็นเวลา 5 นาที หลังจากที่อากาศแห้ง,
เม็ดดีเอ็นเอเป็นอีกครั้งที่ลอยอยู่ใน TE บัฟเฟอร์ (10 mM Tris,
1 mM EDTA, ค่า pH 8.0) และเก็บไว้ที่ -20 ° C จนการวิเคราะห์
ความเข้มข้นของดีเอ็นเอและความบริสุทธิ์อยู่ที่ประมาณ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

cetyltri แอมโมเนียมโบรไมด์ ; ctab 1.4 M NaCl , 0.2 % v / v - บีตาmercaptoethanol 20 mM EDTA 100 มม. trishcl pH 8 , 0.2มิลลิกรัม / มิลลิลิตรโปรตีน K ) แล้วบ่มที่ 55 องศา C เป็นเวลา 6 ชั่วโมงต่อมามีการใช้ฟีนอล / ตกตะกอนโปรตีนคลอโรฟอร์ม ( 1 : 1 ) เมื่อตามด้วยฟีนอล / ยาสลบ /isoamylalcohol ( 25:24:1 ) ที่ระดับ 13 , 000 กรัมเป็นเวลา 10 นาที ( 4° C ) สองครั้ง และสุดท้ายล้างด้วยคลอโรฟอร์ม ( 1 : 1 ) ส่วนบนน้ำชั้นถูกเอาออก และดีเอ็นเอตกตะกอนในไอโซโพรพานอล ( 2 : 3 v / v ) ผสมเบา ๆโดยกลับหัวหลอดไม่กี่ครั้งใส่ในน้ำแข็งเป็นเวลา 15 นาที จากนั้นปั่นในไมโครเซนตริฟิวจ์ที่ 13 , 000 กรัม 5 นาที หลังการปั่นเหวี่ยง , สูงคือทิ้ง ; ดีเอ็นเอเม็ดถูกล้างใน 75% แน่นอนเอทานอล และไฟฟ้าที่ 13000 กรัม 5 นาที หลังจากอากาศแห้งเม็ดดีเอ็นเอเป็นอีกครั้งที่แขวนลอยใน TE buffer ( 10 มม. ทริส1mm EDTA pH 8.0 ) และเก็บไว้ที่ - 20 ° C จนถึงการวิเคราะห์ ที่ความเข้มข้นและความบริสุทธิ์ประมาณ ดีเอ็นเอ