sterile marine water, and immediately processed in the
onboard laboratory as described previously (Bran˜a et al.,
2015).
Strain M-201T (5CECT 8512T5DSM 28392T) was isolated
on selective media, comprising 1/3 tryptic soy agar (TSA,
Merck) and 1/6 M-BLEB [9 g MOPS BLEB base (Oxoid) in
1 l Cantabrian Sea water] agar, containing the antifungal
cycloheximide (80 mg ml21) and anti-Gram-negative bacteria
nalidixic acid (20 mg ml21) under aerobic conditions
(Bran˜a et al., 2015). The strain was maintained on TSA
medium at 4 uC and as suspensions of mycelial fragments
and spores in glycerol (20%, v/v) at 220 uC and 280 uC.
Biomass for chemical and molecular studies was obtained by
cultivation using TSA at 28 uC for 1 week. Phylogenetic
analysis based on 16S rRNA gene sequences revealed that
the organism was most closely related to Myceligenerans
crystallogenes CD12E2-27T (98.2 %). Therefore a taxonomic
study using a polyphasic approach was carried out to
establish the taxonomic position of the novel isolate.
Cultural characteristics were determined after incubation
on TSA for 2–3 weeks at 28 uC. Cell morphology and cell
dimensions were examined by light microscopy (model
CX41; Olympus) after growth for 7 days on TSA medium.
Scanning electron microscopy was performed with cells
from old cultures grown in R5A (Ferna´ndez et al., 1998) as
previously described (Cui et al., 2004; Rheims et al., 1998)
using a JSM-6610LV (JEOL) scanning electron microscope.
Growth was tested at 4, 10, 15, 20, 25, 28, 37, 40 and 50 uC
on TSA. For NaCl tolerance experiments, TSA was used as
the basal medium, and the NaCl concentration range used
was 0.5–18.0%, at intervals of 2.5 %. The pH range for
growth was investigated between pH 4.0 and 11.0 at
intervals of 1 pH unit, using the following buffer systems:
pH 4.0–5.0, 0.1 M citric acid/0.1 M sodium citrate;
pH 6.0–8.0, 0.1 M KH2PO4/0.1 M NaOH; pH 9.0–11.0,
0.1 M NaHCO3/0.1 M Na2CO3 (Wang et al., 2011).
Myceligenerans xiligouense DSM 15700T, Myceligenerans
crystallogenes DSM 17134T, Myceligenerans halotolerans
DSM 21949T, and ‘Myceligenerans salitolerans’ KCTC
29128, were used as reference strains for phenotypic tests.
Metabolic properties and enzyme activities were determined
by means of the API 50 CHB and API ZYM systems
(bioMe´rieux) according to the manufacturer’s instructions.
Oxidation of 95 different substrates was tested using GP2
microplates (Biolog) within the density range specified by
the manufacturer (20% turbidity). Susceptibility to antibiotics
was examined by placing antibiotic discs (Oxoid)
(a) (b)
(c) (d)
Fig. 1. Scanning electron micrographs of strain M-201T showing the well-developed mycelium at different magnifications
(a, 750; b, 3000; c, 30000) and the spore morphology at 30000 magnification (d). Bars, 20 mm (a), 5 mm (b), 0.5 mm (c, d).
Myceligenerans cantabricum sp. nov.
http://ijs.sgmjournals.org
น้ำทะเลที่ผ่านการฆ่าเชื้อ และประมวลผลในทันทีห้องปฏิบัติการบนเครื่องเป็นอธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Bran˜a et al.,2015)สายพันธุ์ M 201T (5CECT 8512T5DSM 28392T) ถูกแยกเลือกสื่อ ประกอบด้วยวุ้นถั่วเหลือง tryptic 1 ใน 3 (TSAเมอร์ค) และ 1/6 M-BLEB [9 กรัม MOPS BLEB ฐาน (Oxoid) ในอาหารเลี้ยงเชื้อ 1 ลิตรน้ำทะเล Cantabrian] ที่ประกอบด้วยการต้านเชื้อราแบคทีเรีย anti-Gram-negative และ cycloheximide (ml21 80 มิลลิกรัม)กรดนาลิดิซิก (ml21 20 mg) ภายใต้สภาพแอโรบิก(Bran˜a et al. 2015) สายพันธุ์ที่ถูกรักษาไว้บน TSAปานกลาง 4 uC และ เป็นสารแขวนลอยเล็ก ๆ mycelialและสปอร์ในกลีเซอรอล (20%, v/v) ที่ 220 uC และ 280 uCชีวมวลสำหรับการศึกษาสารเคมี และโมเลกุลที่ได้รับโดยเพาะปลูกที่ใช้ TSA ที่ 28 uC สำหรับ 1 สัปดาห์ ผลวิเคราะห์อิง 16S rRNA เปิดเผยลำดับยีนที่สิ่งมีชีวิตสุดเกี่ยวข้องกับ Myceligeneranscrystallogenes CD12E2-27T (98.2%) ดังนั้นการอนุกรมวิธานศึกษาโดยใช้วิธี polyphasic การดำเนินการสร้างตำแหน่งอนุกรมวิธานของ isolate นวนิยายลักษณะทางวัฒนธรรมกำหนดหลังจากบ่มบน TSA สำหรับ 2 – 3 สัปดาห์ที่ 28 uC สัณฐานวิทยาของเซลล์และเซลล์ขนาดถูก examined โดยกล้องจุลทรรศน์แสง (รุ่นCX41 Olympus) หลังจากเจริญเติบโตบน TSA ปานกลาง 7 วันการสแกนชาวดัตช์ทำกับเซลล์จากวัฒนธรรมเก่าที่เติบโตใน R5A (Ferna´ndez et al. 1998) เป็นเคยอธิบายไว้ (Cui et al. 2004 Rheims et al. 1998)โดยใช้กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราด JSM-6610LV (JEOL)เจริญเติบโตได้รับการทดสอบที่ 4, 10, 15, 20, 25, 28, 37, 40 และ 50 uCบน TSA สำหรับการทดลองเผื่อ NaCl, TSA ใช้เป็นสื่อพื้นฐาน และช่วงความเข้มข้นของ NaCl ที่ใช้คือ 0.5 – 18.0%, 2.5% ช่วงเวลา ช่วงการวัดสำหรับรับการตรวจสอบการเจริญเติบโตระหว่าง pH 4.0 และ 11.0 ที่ช่วงของ pH 1 หน่วย ใช้ระบบบัฟเฟอร์การต่อไปนี้:ค่า pH 4.0 – 5.0, 0.1 M กรด/0.1 M โซเดียมซิเตรตค่า pH 6.0 – 8.0, KH2PO4/0.1 M NaOH 0.1 M ค่า pH 9.0-11.00.1 M NaHCO3/0.1 M Na2CO3 (Wang et al. 2011)Myceligenerans xiligouense DSM 15700T, Myceligeneranscrystallogenes DSM 17134T, Myceligenerans halotoleransDSM 21949T และ 'Myceligenerans salitolerans' KCTC29128 ถูกใช้เป็นสายพันธุ์อ้างอิงสำหรับการทดสอบฟีโนไทป์กำหนดคุณสมบัติเผาผลาญและการทำงานของเอนไซม์โดยระบบ API 50 ประเทศและ API ZYM(bioMe´rieux) ตามคำแนะนำของผู้ผลิตออกซิเดชันของพื้นผิวต่าง ๆ 95 ทดสอบใช้ GP2microplates (Biolog) ภายในช่วงความหนาแน่นตามผู้ผลิต (ความขุ่น 20%) ความไวต่อการใช้ยาปฏิชีวนะการตรวจสอบ โดยการวางแผ่นยาปฏิชีวนะ (Oxoid)(ก) (ข)(c) (d)รูปที่ 1 การสแกน micrographs อิเล็กตรอนของสายพันธุ์ M 201T แสดงยังมีการพัฒนาที่กำลังขยายแตกต่างกัน(a, b, 3000; c, 30000; 750) และสัณฐานวิทยาสปอร์ที่ 30000 กำลังขยาย (d) บาร์ 20 มม. (ก) 5 mm (b) (c, d) 0.5 mmMyceligenerans cantabricum sp.พ.ย.http://ijs.sgmjournals.org
การแปล กรุณารอสักครู่..

น้ำทะเลผ่านการฆ่าเชื้อและการประมวลผลทันทีใน
ห้องปฏิบัติการ onboard ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Bran~a et al.,
2015).
สายพันธุ์ M-201T (5CECT 8512T5DSM 28392T) ที่แยกได้
ในสื่อเลือกประกอบด้วย 1/3 วุ้นถั่วเหลือง tryptic (TSA,
เมอร์ค) และ 1/6 M-bleb [9 กรัมฐาน MOPS bleb (Oxoid) ใน
1 ลิตรน้ำทะเล Cantabrian] วุ้นที่มีเชื้อรา
cycloheximide (80 มิลลิกรัม ml21) และต่อต้านแกรมลบแบคทีเรีย
กรด nalidixic (20 mg ml21) ภายใต้เงื่อนไขแอโรบิก
(Bran~a et al., 2015) สายพันธุ์ที่ถูกเก็บรักษาไว้ใน TSA
กลางที่ 4 UC และสารแขวนลอยเศษเส้นใย
และสปอร์ในกลีเซอรีน (20% v / v) ที่ 220 UC และ 280 UC.
ชีวมวลสำหรับสารเคมีและชีวโมเลกุลศึกษาได้มาจาก
การเพาะปลูกโดยใช้ TSA วันที่ 28 UC 1 สัปดาห์ วิวัฒนาการ
การวิเคราะห์ตาม 16S rRNA ลำดับยีนเปิดเผยว่า
สิ่งมีชีวิตที่ถูกที่สุดที่เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดกับ Myceligenerans
CD12E2-27T crystallogenes (98.2%) ดังนั้นการจัดหมวดหมู่
การศึกษาโดยใช้วิธีการ polyphasic ได้ดำเนินการเพื่อ
สร้างตำแหน่งที่จัดหมวดหมู่ของการแยกนวนิยาย.
ลักษณะทางวัฒนธรรมได้รับการพิจารณาหลังจากการบ่ม
ใน TSA 2-3 สัปดาห์ที่ผ่านมาวันที่ 28 UC มือถือสัณฐานวิทยาและเซลล์
ขนาดได้รับการตรวจสอบโดยใช้กล้องจุลทรรศน์แสง (รุ่น
CX41; Olympus) หลังจากที่การเจริญเติบโตสำหรับ 7 วันบน TSA กลาง.
กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนได้ดำเนินการกับเซลล์
จากวัฒนธรรมเก่าที่ปลูกใน R5A เป็น (Ferna'ndez et al, 1998.)
ก่อนหน้านี้ อธิบาย (Cui et al, 2004;.. แรมส์, et al, 1998)
โดยใช้ JSM-6610LV (JEOL) กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน.
การเจริญเติบโตได้รับการทดสอบที่ 4, 10, 15, 20, 25, 28, 37, 40 และ 50 UC
ใน TSA สำหรับ NaCl ทดลองความอดทน TSA ถูกใช้เป็น
สื่อพื้นฐานและช่วงความเข้มข้นของโซเดียมคลอไรด์ที่ใช้
เป็น 0.5-18.0% ในช่วงเวลาที่ 2.5% ช่วงค่า pH สำหรับ
การเจริญเติบโตของการตรวจสอบระหว่างค่า pH 4.0 และ 11.0 ใน
ช่วงเวลา 1 หน่วยค่า pH โดยใช้ระบบบัฟเฟอร์ต่อไปนี้:
ค่า pH 4.0-5.0, 0.1 M กรดซิตริก / 0.1 M โซเดียมซิเตรต;
ค่า pH 6.0-8.0, 0.1 M KH2PO4 / 0.1 M NaOH; ค่า pH 9.0-11.0,
0.1 M NaHCO3 / 0.1 M Na2CO3 (Wang et al. 2011).
Myceligenerans xiligouense DSM 15700T, Myceligenerans
crystallogenes DSM 17134T, Myceligenerans halotolerans
DSM 21949T และ 'Myceligenerans salitolerans' KCTC
29128 ถูกนำมาใช้เป็นข้อมูลอ้างอิงสำหรับสายพันธุ์ การทดสอบฟีโนไทป์.
คุณสมบัติเผาผลาญอาหารและเอนไซม์ถูกกำหนด
โดยวิธีการของ API 50 CHB และระบบ API ZYM
(bioMe'rieux) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต.
ออกซิเดชันของพื้นผิวที่แตกต่างกัน 95 ได้รับการทดสอบโดยใช้ GP2
microplates (Biolog) อยู่ในช่วงความหนาแน่นที่ระบุไว้ โดย
ผู้ผลิต (20% ความขุ่น) ความไวต่อยาปฏิชีวนะ
ที่ถูกตรวจสอบโดยการวางแผ่นยาปฏิชีวนะ (Oxoid)
(ก) (ข)
(ค) (ง)
รูป 1. กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบสแกนความเครียด M-201T แสดงเส้นใยทั้งการพัฒนาที่กำลังขยายที่แตกต่างกัน
(A, 750; B, 3000;? C, 30000)? และสัณฐานวิทยาของสปอร์ที่ 30000 ขยาย (ง) บาร์, 20 มิลลิเมตร (a) 5 มิลลิเมตร (ข), 0.5 มิลลิเมตร (C, D).
Myceligenerans cantabricum SP พฤศจิกายน
http://ijs.sgmjournals.org
การแปล กรุณารอสักครู่..

น้ำในทะเลที่เป็นหมัน และผลในทันทียานปฏิบัติการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( รำข้าว˜เป็น et al . ,2015 )m-201t สายพันธุ์ ( 5cect 8512t5dsm 28392t ) คือแยกสื่อที่เลือกประกอบด้วย 1 / 3 ( TSA อาหารถั่วเหลือง ,เมอร์ค ) และ 1 / 6 m-bleb [ 9 G mops bleb ฐาน ( oxoid )1 l กันตาเบรียน้ำทะเล ] วุ้นที่มีเชื้อราร้อยเรียง ( 80 มิลลิกรัม ml21 ) และต่อต้านแบคทีเรียแกรมลบสะพานกรุงธน ( 20 มิลลิกรัม ml21 ) ภายใต้สภาวะแอโรบิก( แบรน˜เป็น et al . , 2015 ) ความเครียด คือ รักษาว่าขนาดกลางที่ 4 และเป็นชิ้นส่วนของเส้น ฯลฯและสปอร์ในกลีเซอรอล ( 20 % v / v ) ที่ 220 UC และ 280 ฯลฯ .ระบบเคมีและโมเลกุลในการศึกษาได้โดยการใช้ประโยชน์ที่ 28 เป็นต้น ใน 1 สัปดาห์ วิวัฒนาการการวิเคราะห์ 16S rRNA ยีนตามลำดับ พบว่าสิ่งมีชีวิตส่วนใหญ่เกี่ยวข้องกับ myceligeneranscrystallogenes cd12e2-27t ( แบบ % ) ดังนั้นทางอนุกรมวิธานการศึกษาใช้วิธีการ polyphasic ถูกหามออกไปสร้างตำแหน่งทางอนุกรมวิธานของนวนิยายแยก .ลักษณะทางวัฒนธรรมถูกกำหนดหลังจากบ่มใน 2 - 3 สัปดาห์ตั้งแต่ 28 เป็นต้น . สัณฐานวิทยาของเซลล์และเซลล์คือการตรวจสอบด้วยกล้องจุลทรรศน์แสง ( รุ่นcx41 ; โอลิมปัส ) หลังจากที่ขยายตัว 7 วันบน TSA )กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องกราดแสดงกับเซลล์จากเดิมที่เติบโตในวัฒนธรรม r5a ( ferna ใหม่ ndez et al . , 1998 ) เช่นอธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( ชเว et al . , 2004 ; ไรม์ส et al . , 1998 )ใช้ jsm-6610lv ( Jeol ) กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนการทดสอบที่ 4 , 10 , 15 , 20 , 25 , 28 , 37 , 40 และ 50 เป็นต้นที่ TSA ขนาดทดลองสำหรับความอดทนหรือใช้เป็นสื่อพื้นฐาน และความเข้มข้นของเกลือในช่วงที่ใช้คือ 0.5 – 18.0 % ในช่วง 2.5 % pH ในช่วงสำหรับการตรวจสอบระหว่าง pH 4.0 และ 11.0 ที่ช่วงเวลา 1 หน่วยการใช้บัฟเฟอร์ pH ดังต่อไปนี้ระบบ :pH 4.0 และ 5.0 , 0.1 M citric acid / 0.1 โมลาร์โซเดียมซิเตรตที่ pH 6.0 - 8.0 , kh2po4 / 0.1 M NaOH 0.1 M ; พีเอช 9.0 – 11.00.1 โมลาร์โซเดียมไบคาร์บอเนต / 0.1 M Na2CO3 ( Wang et al . , 2011 )myceligenerans xiligouense DSM 15700t myceligenerans ,crystallogenes DSM 17134t myceligenerans halotolerans ,DSM 21949t และ " " kctc myceligenerans salitolerans29128 ถูกใช้เป็นสายพันธุ์อ้างอิงสำหรับการทดสอบคุณสมบัติ .การเผาผลาญอาหารและเอนไซม์กิจกรรมวิเคราะห์คุณสมบัติโดยวิธีการของ API 50 chb zym API และระบบ( ไบโอมใหม่ rieux ) ตามคำแนะนำของผู้ผลิตออกซิเดชันของพื้นผิวที่แตกต่างกัน คือ ทดสอบโดยใช้ GP2 95microplates ( biolog ) ภายในช่วงที่ระบุ โดยความหนาแน่นผู้ผลิต ( 20% ความขุ่น ) ความไวต่อยาปฏิชีวนะตรวจสอบโดยการวางแผ่น ( oxoid ) ยาปฏิชีวนะ( ก ) ( ข )( C ) ( D )รูปที่ 1 กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน micrographs สายพันธุ์ m-201t แสดงเต่ง magnifications เส้นใยที่แตกต่างกัน( A , B , C 750 ; 3 ; 30 , 000 ) และสปอร์สัณฐานที่ 30000 ขยาย ( D ) บาร์ , 20 มิลลิเมตร ( มม. ) 5 ( B ) , 0.5 มม. ( C , D )myceligenerans cantabricum sp .http://ijs.sgmjournals.org
การแปล กรุณารอสักครู่..
