Sweetened tea was prepared by bringing one litre of deionized water to a boil, steeping three
tea bags (2.5 g black tea/bag; Lipton brand) for 5 min, removing the tea bags, and then adding 62 g of sucrose. 100ml aliquots of the sweetened tea were distributed into 250 ml Erlenmeyer flasks, autoclaved, and cooled. To inoculate, 20 ml of previously fermented tea ('starter tea') was added, and a section of 'mother culture' (approx. 7.5 g wet weight, cut with a sterile scalpel) was placed on the surface of the tea-sucrose solution. Inoculated flasks were incubated in stationary culture at 28°C for seven days. In certain trials, tea was omitted and the cultures were grown on pure sucrose solutions; in other trials the starter culture was omitted. At the end of the incubation a second, nascent layer (a 'baby' culture) had formed. Both the parent and nascent cultures were removed from the flask with sterile forceps and cut into small pieces (roughly 2 x 2 em) with a razor. Then the pieces of Kombucha culture and their culture fluid were recombined in a sterile Waring Blender and macerated together on high for 90 sec. The resultant slurry was diluted appropriately in 0.85M saline dilution blanks and plated onto potato dextrose agar (PDA) and Luria broth agar (LBA) both formulated by Difco (Detroit, Michigan). Plates were incubated at 28°C in darkness for 4 days at which point colony counts were made. Colony-forming units (CFUs) of bacteria were counted on LBA and consisted of two distinct morphological types: type 1 was a light mustard colour, and type 2 was clear. CFUs
of yeast were counted on PDA and also consisted of two types: type A gave white , shiny, circular colonies ; type B gave bumpy pearl-coloured colonies with an irregular edge. No attempt was made to identify the individual bacterial and yeast species, but the yeasts and bacteria were readily distinguishable based on size. Colony forming units (CFUs) of bacteria were counted on LBA. CFUs of yeasts (shiny, white circular colonies) and mixed yeast-bacterial consortia (bumpy, white, irregular colonies) were counted onPDA.
ชาหวาน เตรียมโดยนำหนึ่งลิตรของน้ำคล้ายเนื้อเยื่อประสานไปต้ม , steeping สาม
ถุงชา ( ชาดำ 2.5 กรัม / ถุง แบรนด์ลิปตันเป็นเวลา 5 นาที เอาถุงชาออก แล้วเพิ่ม 62 กรัมซูโครส 100ml เฉยๆของหวานชาถูกกระจายเป็น 250 ml เออร์เลนเมเยอร์ flasks , สังเคราะห์ , และเย็น การปลูกฝี , 20 มิลลิลิตร ก่อนหน้านี้ชา ( ชาหมัก 'starter ' ) คือเพิ่มและส่วนของ ' แม่ ' วัฒนธรรม ( ประมาณ 7.5 กรัม น้ำหนักเปียก ตัดด้วยมีดผ่าตัดหมัน ) ถูกวางไว้บนพื้นผิวของซูโครสชา โซลูชั่น ที่ใส่ขวดถูกบ่มในวัฒนธรรมเครื่องเขียนที่ 28 ° C เป็นเวลา 7 วัน ในการทดลองหนึ่ง ชาถูกละเว้น และวัฒนธรรมที่ปลูกบนโซลูชั่นน้ำตาลซูโครสบริสุทธิ์ ในการทดลองอื่น ๆเริ่มต้นที่วัฒนธรรมถูกละเว้น .ในตอนท้ายของระยะเวลาที่สอง ตั้งไข่ ชั้น ( วัฒนธรรม ' เด็กทารก ' ) ได้ก่อตั้งขึ้น ทั้งแม่ และ วัฒนธรรม ที่พึ่งถูกเอาออกจากขวด กับคีมเป็นหมัน และหั่นเป็นชิ้นเล็ก ๆ ( ประมาณ 2 X 2 เอ็ม ) ด้วยมีดโกน แล้วชิ้นส่วนของวัฒนธรรมและวัฒนธรรมของพลังของเหลวเป็นวัตถุดิบในเครื่องปั่น waring ปลอดเชื้อและ macerated ด้วยกันสูง 90 วินาทีซึ่งเจือจางความเข้มข้นที่เหมาะสมใน 0.85m น้ำเกลือเจือจางช่องว่างและชุบลงในอาหารเลี้ยงเชื้อ potato dextrose agar ( PDA ) และลุเรีย broth ( LBA ) ทั้งยุทธศาสตร์ โดย difco ( ดีทรอยต์มิชิแกน ) แผ่นอุณหภูมิ 28 องศา C ในที่มืดเป็นเวลา 4 วัน ซึ่งจุดที่ปริมาณเชื้อได้ หน่วยสร้างอาณานิคม ( cfus ) ของแบคทีเรียถูกนับใน LBA และประกอบด้วยสองประเภทที่แตกต่างกัน : โดยประเภทที่ 1 คือสีมัสตาร์ดอ่อน และชนิดที่ 2 ได้ชัดเจน cfus
ของยีสต์ถูกนับบน PDA และประกอบด้วยสองประเภท : ประเภทให้ขาว เปล่งประกาย โคโลนีกลม ชนิด B ให้เป็นหลุมเป็นบ่อ ไข่มุกสีอาณานิคมขอบผิดปกติ ไม่มีความพยายามในการระบุตัวบุคคล แบคทีเรียและยีสต์สายพันธุ์ แต่ยีสต์และแบคทีเรียถูกพร้อมจินตนาการตามขนาดหน่วยสร้างอาณานิคม ( cfus ) ของแบคทีเรียถูกนับโด . cfus ยีสต์ ( เงาสีขาวกลมอาณานิคม ) และยีสต์ผสมแบคทีเรีย ( consortia เป็นหลุมเป็นบ่อ , ขาว , อาณานิคมผิดปกติ ) นับ onpda .
การแปล กรุณารอสักครู่..
