2. Materials and methods2.1. Strain

2. Materials and methods
2.1. Strain and medium
C. acetobutylicum ATCC 824 (corresponding also to C. acetobutylicum
DSM 792) strain was used in all the fermentations. The
cells were stored on reinforced clostridia medium (RCM) plates at 4 ◦C. The culture was inoculated in 10 ml clostridia growth medium
(CGM) (Wiesenborn et al., 1988) containing 30 g l−1 glucose. The
CGM liquid precultures were gassed with nitrogen to ensure anaerobic
conditions using the Hungate technique and kept at 37 ◦C for
18–20 h to ensure cell growth. The 10 ml liquid preculture was
transferred to a 100 ml serum bottle containing CGM. At least two
culture transfers were made before inoculating the reactor. The
CGM comprised the components below per liter of double distilled
water. Solution I: 5 g yeast extract; 0.75 g KH2PO4; 0.75 g K2HPO4;
1 g NaCl. Solution II: 2 g (NH4)2SO4; 0.2 g MnSO4·H2O; 0.01 g
MnSO4·H2O; 0.01 g FeSO4·7H2O; 0.5 g l-asparagine and 60 g glucose.
Solution I ingredients were autoclaved together at 120 ◦C for
20 min; stock liquids of all solution II and the glucose were prepared
and autoclaved separately and mixed into the final medium according
to the concentrations above. The FeSO4·7H2O and asparagine
were sterile filtered. The final medium had a pH of 6.4–6.5.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 ต้องใช้และสื่อ
C. acetobutylicum ATCC 824 (ตรงยังกับ C. acetobutylicum
DSM 792) ต้องใช้ใช้ในการหมักแหนมทั้งหมด ใน
เซลล์ถูกเก็บไว้ใน clostridia เสริมกลาง (RCM) แผ่นที่ 4 ◦C วัฒนธรรมถูก inoculated ใน 10 ml clostridia เติบโต medium
(CGM) (Wiesenborn et al., 1988) ประกอบด้วยกลูโคส l−1 30 g ใน
CGM เหลว precultures มี gassed กับไนโตรเจนให้ไม่ใช้
เงื่อนไขใช้เทคนิค Hungate และเก็บไว้ที่ 37 ◦C สำหรับ
h 18-20 ให้เซลล์เจริญเติบโต Preculture ของเหลว 10 ml ถูก
โอนไปขวดเซรั่ม 100 มล.ประกอบด้วย CGM น้อยสอง
ทำการถ่ายโอนวัฒนธรรมก่อน inoculating ปล่อย ใน
CGM ประกอบด้วยเนื้อหาด้านล่างต่อลิตรของคู่กลั่น
น้ำ สารสกัดจากยีสต์โซลูชัน 5 i: g 0.75 g KH2PO4 K2HPO4 0.75 g;
NaCl 1 g โซลูชั่น II: 2 g (NH4) 2SO4 0.2 g MnSO4·H2O 0.01 g
MnSO4·H2O 0.01 g FeSO4·7H2O 0.5 g l asparagine และ 60 g กลูโคส
โซลูชันฉันได้ autoclaved กันที่ 120 ◦C สำหรับ
20 นาที เตรียมเหลวหุ้นของโซลูชันทั้งหมด II และน้ำตาลกลูโคส
และ autoclaved ต่างหาก และแบบผสมเป็นการวางตามกลางสุดท้าย
การที่ความเข้มข้นด้านบน FeSO4·7H2O และ asparagine
กอซถูกกรอง สื่อสุดท้ายมี pH 6.4-6.5

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 สายพันธุ์และขนาดกลาง
C. acetobutylicum ATCC 824 (ตรงไปยัง C. acetobutylicum
DSM 792) สายพันธุ์ที่ถูกนำมาใช้ในกระบวนการหมักทั้งหมด
เซลล์ที่ถูกจัดเก็บไว้ในสื่อ clostridia เสริม (RCM) แผ่นที่ 4 ◦ C. วัฒนธรรมที่ได้รับเชื้อในกลาง 10 มล. การเจริญเติบโตของ clostridia
(CGM) (Wiesenborn และคณะ. 1988) มี 30 gl-1 กลูโคส
CGM precultures ของเหลวได้ด้วยแก๊สไนโตรเจนเพื่อให้แน่ใจว่าไม่ใช้ออกซิเจน
เงื่อนไขโดยใช้เทคนิคการ Hungate และเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 37 ◦ C เป็นเวลา
18-20 ชั่วโมงเพื่อให้แน่ใจว่าการเติบโตของเซลล์ 10 มล. preculture ของเหลวได้รับการ
ถ่ายโอนไปยังขวด 100 มล. ซีรั่มที่มีส่วนผสมของ CGM อย่างน้อยสอง
การถ่ายโอนวัฒนธรรมที่ถูกสร้างขึ้นก่อนที่จะฉีดวัคซีนเครื่องปฏิกรณ์
CGM ประกอบด้วยชิ้นส่วนด้านล่างต่อลิตรของน้ำสอง
น้ำ โซลูชั่นฉัน: 5 กรัมสารสกัดจากยีสต์; 0.75 กรัม KH2PO4; 0.75 กรัม K2HPO4;
1 กรัมโซเดียมคลอไรด์ ทางออกที่สอง: 2 กรัม (NH4) 2SO4; 0.2 กรัม MnSO4 · H2O; 0.01 กรัม
MnSO4 · H2O; 0.01 กรัม FeSO4 · 7H2O; 0.5 กรัมต่อลิตร-asparagine และ 60 กรัมกลูโคส
โซลูชั่นส่วนผสมผมเบาด้วยกันที่ 120 ◦ C เป็นเวลา
20 นาที; ของเหลวหุ้นของการแก้ปัญหาทุกครั้งที่สองและน้ำตาลกลูโคสถูกจัดเตรียม
และเบาแยกและผสมลงในกลางตามขั้นสุดท้าย
ที่มีความเข้มข้นสูงกว่า FeSO4 · 7H2O และ asparagine
เป็นหมันกรอง กลางขั้นสุดท้ายมี pH 6.4-6.5

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . ความเครียดและขนาดกลาง
C acetobutylicum ATCC 824 ( ที่ยังค acetobutylicum
DSM 792 ) สายพันธุ์ที่ใช้ใน fermentations ทั้งหมด
ถูกเก็บไว้ในเซลล์เสริม Clostridia ขนาดกลาง ( จำนวน ) แผ่น 4 ◦ C . วัฒนธรรมเป็นเชื้อใน 10 ml Clostridia การเจริญเติบโตปานกลาง
( CGM ) ( wiesenborn et al . , 1988 ) ที่มี 30 g L − 1 กลูโคส
CGM precultures gassed ด้วยไนโตรเจนเหลวเป็นเพื่อให้แน่ใจว่าเงื่อนไข anaerobic
โดยใช้เทคนิค hungate และเก็บไว้ที่ 37 ◦ C
18 – 20 H เพื่อให้แน่ใจว่าการเจริญเติบโตของเซลล์ 10 ml ของของเหลวพันธุ์คือ
ส่งไป 100 ml เซรั่มขวดที่มี CGM . อย่างน้อยสอง
วัฒนธรรมทำก่อนโอนณเครื่องปฏิกรณ์ได้
CGM ประกอบด้วยส่วนประกอบด้านล่าง ต่อ ลิตร คู่
กลั่นน้ำโซลูชั่นชั้น : 5 กรัมยีสต์สกัด ; 0.75 กรัม kh2po4 ; 0.75 กรัม k2hpo4 ;
โซเดียมคลอไรด์ 1 กรัม โซลูชั่น II 2 G ( NH4 ) 2so4 ; 0.2 กรัม mnso4 ด้วย H2O ; 0.01 g
mnso4 ด้วย H2O ; 0.01 กรัม feso4 ด้วย 7h2o ; 0.5 กรัม Name และกลูโคส 60 กรัม ส่วนผสมสังเคราะห์เข้าด้วยกันเป็นโซลูชั่นผม

◦ 120 องศาเซลเซียส 20 นาที ; หุ้นของเหลวทั้งหมดโซลูชั่น II และเตรียมกลูโคส
แล้วต่างหาก และผสมลงในอาหารสังเคราะห์
สุดท้ายตามเพื่อความเข้มข้นข้างต้น การ feso4 ด้วย 7h2o asparagine
ถูกฆ่าเชื้อและกรอง สื่อสุดท้ายมี pH 6.4 – 6.5 .