The cultivated strain L. lactis sub

The cultivated strain L. lactis subsp. lactis IL1403was provided by Dr. Ogier from INRA (French National Institute for Agricultural Research, Jouy-en-Josas, France). Frozen storage cultures of L. lactis IL1403 were thawn and pregrown on Petri dishes with M17 Agar (LAB M, UK) for 24 h at 35 C. One colony from a pregrown Petri dish was used as an inoculum for a 10 mL culture in liquid M17 Broth (FLUKA) at 35 C. 1 mL of bacterial suspension grown overnight (exactly 24 h) was used as inoculum for the next liquid 10 mL M17 broth culture and grown 12e14 h which allowed the L. lactis IL1403 bacteria to reach the middle of the exponential growth phase. The
number of bacteria was determined by plating on M17 Agar and incubating for 3 days at 35 C, and average number of bacteria in the mid-exponential culturewas determined (4.15þ/0.15)*108 cfu/mL. The inoculum needed for the experimentswas prepared by diluting samples of the mid-exponential culture in peptone water. The
calculated inoculum concentrations in calorimetric and in parallel samples were varied from 106 to 100 cfu/mL with the 10-fold increment. It was important to have the correct desired number of colonies in the samples as special attentionwas paid to study growth of individual colonies. From the practical point of view it was the
most difficult to get up to about three colonies, and not more, in a sample (inoculation rate 100 cfu/mL). These colonies are separated from each other sufficiently and grow thus as independent individual colonies. True, in these cases direct visual inspection of samples after the completion of the experiments together with the analysis of poweretime curves enabled to reach an unequivocal verdict on the success of the experiments. However, taking into account that the length of the experiments is typically about one month, the pure trial and error strategy was not the most feasible. Thus dilution procedures were developed and carefully implemented to assure that serial dilutions end with the desired inoculation rates. The exact following of the procedures of preparation of bacterial cultures described above which ensured high reproducibility at lower inoculation rates validated by direct counting of the colonies in the samples after the experiments, allowed to be confident that the number of bacteria in samples was also as assumed at inoculation rates higher than 102 cfu/mL.

thawn and pregrown

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ปลูกพันธุ์ L. lactis ถั่ว lactis IL1403was โดยดร. Ogier จาก INRA (ฝรั่งเศสแห่งชาติ สถาบันวิจัยเกษตร Jouy-น้ำ-Josas ฝรั่งเศส) เก็บแช่แข็งวัฒนธรรมของ L. lactis IL1403 ได้ thawn และ pregrown ในจาน Petri กับ Agar M17 (ห้องปฏิบัติการ M, UK) ใน 24 ชมที่ค. 35 ฝูงหนึ่งจากจานเพาะเชื้อ pregrown ถูกใช้เป็น inoculum ที่สำหรับวัฒนธรรม 10 mL ในเหลว M17 ซุป (FLUKA) ที่มล 1 C. 35 ของแอร์พอร์ตโอเวอร์ไนท์ปลูก (ตรง 24 h) ใช้เป็น inoculum วัฒนธรรมซุปน้ำ 10 mL M17 ถัดไปและ h 12e14 ปลูกซึ่งได้รับอนุญาต L. lactis IL1403 แบคทีเรียถึงกึ่งกลางของระยะเรขา ระงับเชื้อแบคทีเรีย ที่กำหนดจำนวนของแบคทีเรีย โดยชุบใน M17 Agar และ incubating สำหรับ 3 วันที่ 35 C และจำนวนเฉลี่ยของแบคทีเรียใน culturewas กลางเนนที่กำหนด (4.15þ / 0.15) * 108 cfu/mL Inoculum ที่จำเป็นสำหรับ experimentswas โดยตัวอย่างวัฒนธรรมกลางเนนน้ำ peptone diluting ที่ความเข้มข้นของ inoculum คำนวณ ใน calorimetric และ ในตัวอย่างควบคู่กันได้แตกต่างกันจาก 106 ไป 100 cfu/mL กับเพิ่ม 10-fold ก็ต้องมีจำนวนที่ถูกต้องของอาณานิคมในตัวอย่างเป็น attentionwas พิเศษที่จ่ายเพื่อศึกษาการเจริญเติบโตของอาณานิคมแต่ละ จากจุดมุมมองที่จริง มันเป็นการยากที่สุดไปถึงอาณานิคมประมาณสาม และ อื่น ๆ ไม่ ในตัวอย่าง (inoculation อัตรา 100 cfu/mL) อาณานิคมเหล่านี้จะแยกออกจากกันเพียงพอ และเจริญเติบโตจึงเป็นอาณานิคมขึ้นอยู่กับแต่ละ ความจริง ในกรณีเหล่านี้เปิดใช้งานโดยตรงตรวจสอบภาพตัวอย่างหลังเสร็จสิ้นการทดลองพร้อมกับการวิเคราะห์ของ poweretime โค้งถึงการพิพากษา unequivocal สำเร็จการทดลอง อย่างไรก็ตาม การพิจารณาที่ความยาวของการทดลองโดยทั่วไปประมาณหนึ่งเดือน กลยุทธ์แท้ลองผิดไม่เป็นไปได้มากที่สุด ดังนั้น ขั้นตอนการเจือจางถูกพัฒนา และนำมาใช้อย่างระมัดระวังมั่นตอน dilutions ประจำราคา inoculation ต้อง ต่อไปนี้แน่นอนของกระบวนการเตรียมการของแบคทีเรียวัฒนธรรมอธิบายข้างต้นซึ่งมั่นใจ reproducibility สูงต่ำ inoculation ราคาถูกตรวจสอบ โดยตรงนับอาณานิคมในตัวอย่างหลังการทดลอง สามารถมั่นใจได้ว่า จำนวนแบคทีเรียในตัวอย่างยังเป็นสมมติ inoculation ราคาสูงกว่า 102 cfu/mLthawn และ pregrown

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การปลูกเชื้อ L . lactis subsp . il1403was lactis ให้โดย ดร. โอชิเยร์ ( ฝรั่งเศสจากทีมนักวิจัยของสถาบันเพื่อการวิจัยการเกษตรแห่งชาติ jouy en josas , ฝรั่งเศส ) วัฒนธรรมของ L . lactis il1403 แช่เย็น ) และ thawn pregrown บนจานเพาะเลี้ยงกับ m17 ( Lab M , UK ) 24 H 35  Cฝูงหนึ่งจาก pregrown จานเพาะเชื้อถูกใช้เป็นกล้าเชื้อสำหรับ 10 ml วัฒนธรรมในของเหลว m17 broth ( fluka ) ที่ 35  C 1 มิลลิลิตร bacterial suspension โตข้ามคืน ( ตรง 24 H ) ถูกใช้เป็นกล้าเชื้อสำหรับถัดไป 10 มล. ของเหลว m17 ซุปวัฒนธรรมและพัฒนา 12e14 H ซึ่งได้รับอนุญาต L . lactis il1403 แบคทีเรีย ไปถึงช่วงกลางของระยะการเจริญเติบโตที่ชี้แจง
จำนวนของแบคทีเรียที่ถูกกำหนดโดยชุบบน m17 วุ้น และไข่ 3 วัน 35  C และปริมาณของแบคทีเรียในกลางแทน culturewas กำหนด ( 4.15 þ /  0.15 ) * 108 CFU / ml เชื้อที่จำเป็นสำหรับ experimentswas เตรียมโดยเจือจางตัวอย่างของวัฒนธรรมแบบกลางในเปปโตนน้ำ
คำนวณปริมาณและความเข้มข้นในแคโละริเมทในตัวอย่างขนานแตกต่างกันจาก 106 100 cfu / ml ด้วย 10 เท่าเพิ่มขึ้น มันเป็นสิ่งสำคัญที่จะมีความถูกต้องหมายเลขที่ต้องการของอาณานิคมในตัวอย่างพิเศษ attentionwas จ่ายเพื่อศึกษาการเจริญเติบโตของอาณานิคมของบุคคล จากมุมมองในทางปฏิบัติมันเป็น
ที่ยากที่สุดได้ถึงประมาณสามอาณานิคม , และไม่มากกว่านี้ในตัวอย่าง ( อัตรา 100 cfu / ml ฉีด ) อาณานิคมเหล่านี้ถูกแยกออกจากกันอย่างพอเพียงและเติบโตจึงเป็นอาณานิคมบุคคลอิสระ จริง ในกรณีเหล่านี้โดยตรงตรวจสอบภาพตัวอย่างหลังเสร็จสิ้นการทดลองพร้อมด้วยวิเคราะห์ poweretime โค้งเปิดถึงคำตัดสินที่ชัดเจนในความสำเร็จของการทดลอง อย่างไรก็ตามคำนึงถึงว่าระยะเวลาการทดลองเป็นปกติประมาณ 1 เดือน การพิจารณาคดีบริสุทธิ์และข้อผิดพลาดกลยุทธ์ไม่ได้เป็นไปได้มากที่สุด ดังนั้นในขั้นตอนถูกพัฒนาและดำเนินการอย่างรอบคอบ เพื่อให้มั่นใจว่าวิธีการอนุกรมสิ้นสุดกับที่ต้องการใช้อัตราต่อไปนี้ที่แน่นอนของขั้นตอนการเตรียมเชื้อวัฒนธรรมที่อธิบายไว้ข้างต้น ซึ่งมั่นใจว่าคาร์บอนสูงที่ลดอัตราการตรวจสอบโดยนับโดยตรงของอาณานิคมในกลุ่มตัวอย่างหลังการทดลอง ให้มั่นใจว่า จำนวนแบคทีเรียในตัวอย่างก็เป็นสมมติที่ใช้อัตราสูงกว่า 102 CFU / ml และ

thawn pregrown