into different test tubes containing 0.2 mL of extracts in methanol
at different concentrations. BHT was used for comparative
standard. A control containing 0.2 mL of methanol and
5 mL of the above emulsion was prepared. The tubes were
placed at 50 C in the water bath. Absorbance was taken at
zero time (t ¼ 0) at 470 nm. Measurement of absorbance was
continued until the color of b-carotene disappeared in the control
(t ¼ 180 min) at 15 min intervals. A mixture prepared as
above without b-carotene served as blank. The experiment
was carried out in triplicate. The antioxidant activity of the extracts
was evaluated in terms of the bleaching of b-carotene
using the following equation:
Antioxidant activity ¼
1 ðA0 AtÞ=
A0
0 A0
t
100
Where A0 and A0
0 were the absorbance measured at zero time
of the incubation for test sample and control, respectively, and
At and At
0 were the absorbance measured for the test sample
and the control, respectively, after incubation for 180 min.
Extract concentration providing 50% inhibition (IC50) was calculated
from the graph of inhibition percentage against extract
concentration.
2.3.3. Linoleic peroxidation method
The antioxidant activity of rambutan peel and seed extracts
was based on the thiocyanate method described previously by
Jayaprakasha et al. (2001) with slight modifications. The extracts
were dissolved in methanol for stock solutions. BHT
was used as comparative standard. The solution containing
stock extract solution or BHT at various concentrations in
2.5 mL of potassium phosphate buffer (0.04 mol/L, pH 7.0)
was transferred to 2.5 mL of linoleic acid emulsion containing
0.28 g Tween-40, 0.28 g linoleic acid dissolved in potassium
phosphate buffer (0.04 mol/L, pH 7.0). A control, containing
2.5 mL linoleic acid emulsion and 2.5 mL potassium phosphate
buffer (0.04 mol/L, pH 7.0) was prepared. The mixture
was incubated at 37 C for 64 h. Aliquots (0.1 mL) were
drawn from the incubation mixture at 8-h intervals and then
mixed with 5.0 mL of 75% (v/v) ethanol, 0.1 mL of 300 g/L
ammonium thiocyanate and 0.1 mL of 20 mmol/L ferrous
chloride in 0.96 mol/L HCl and allowed to stand at room temperature
for 3 min. The absorbance was measured at 500 nm.
The experiments on antioxidant activity were run in triplicate
and the percent inhibition of lipid peroxidation was calculated
using the following formula:
Percent inhibition ¼ 100 ½A1=A0 100
Where A0 was the absorbance of the control reaction and A1
was the absorbance in the presence of the extracts. The antioxidant
activities were illustrated as IC50 values.
2.3.4. DPPH
radical scavenging activity
The stable free radical scavenging activity was determined
by the 1,1-diphenyl-2-picryl-hydracyl (DPPH
) (Sigmae
Aldrich GmbdH, Germany) method of Gu¨lc¸ın, Oktay, Kirec¸ci,
and Ku¨frevıoglu (2003) ˘ . A 0.1 mmol/L DPPH
solution in
methanol was prepared, and then 1 mL of this solution was
ลงในหลอดทดสอบที่แตกต่างที่มี 0.2 มิลลิลิตรของสารสกัดในเมทานอล
ที่ความเข้มข้นที่แตกต่างกัน บาทที่ใช้ในการเปรียบเทียบ
มาตรฐาน การควบคุมที่มี 0.2 มิลลิลิตรของเมทานอลและ
5 มิลลิลิตรของอิมัลชันดังกล่าวข้างต้นได้จัดทำขึ้น หลอดถูก
วางไว้ที่ 50 C ในอ่างน้ำ การดูดกลืนแสงที่ถูกนำมาที่
ศูนย์เวลา (t ¼ 0) ที่ 470 นาโนเมตร การวัดการดูดกลืนแสงได้รับการ
อย่างต่อเนื่องจนสีของขแคโรทีนหายไปในการควบคุม
(t ¼ 180 นาที) ที่ 15 ช่วงเวลานาที ส่วนผสมที่เตรียมไว้เป็น
ดังกล่าวข้างต้นโดยไม่ต้องขแคโรทีนทำหน้าที่เป็นที่ว่างเปล่า การทดลองที่
ได้รับการดำเนินการในการเพิ่มขึ้นสามเท่า ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของสารสกัด
ถูกประเมินในแง่ของการฟอกขาวของขแคโรทีน
โดยใช้สมการดังต่อไปนี้:
กิจกรรมต้านอนุมูลอิสระ¼
1? ðA0? AtÞ = A0 0? A0 ที?? ? 100 ที่ A0 และ A0 0 ถูกดูดกลืนแสงที่วัดได้ที่ศูนย์เวลาของการบ่มสำหรับตัวอย่างการทดสอบและการควบคุมตามลำดับและที่และที่0 มีการดูดกลืนแสงที่วัดได้สำหรับตัวอย่างการทดสอบและการควบคุมตามลำดับหลังจากบ่มเป็นเวลา 180 นาที. สารสกัดจาก ความเข้มข้นให้ยับยั้ง 50% (IC50) ที่คำนวณได้จากกราฟของเปอร์เซ็นต์การยับยั้งต่อต้านสารสกัดเข้มข้น. 2.3.3 ไลโนเลอิวิธี peroxidation ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระจากเปลือกเงาะและสารสกัดจากเมล็ดก็ขึ้นอยู่กับวิธีการ thiocyanate ที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้โดยJayaprakasha และคณะ (2001) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย สารสกัดถูกละลายในเมทานอลสำหรับการแก้ปัญหาสต็อก บาทถูกใช้เป็นมาตรฐานเปรียบเทียบ วิธีการแก้ปัญหาที่มีหุ้นหรือสารสกัดบาทที่ระดับความเข้มข้นต่าง ๆ ใน2.5 มิลลิลิตรของโพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (0.04 โมล / ลิตรค่า pH 7.0) ถูกย้ายไป 2.5 มิลลิลิตรของอิมัลชันที่มีกรดไขมัน0.28 กรัม Tween-40, 0.28 กรัมกรดไลโนเลอิกละลายในโพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (0.04 โมล / ลิตรค่า pH 7.0) การควบคุมที่มี2.5 มิลลิลิตรอิมัลชันกรดไลโนเลอิกและ 2.5 มิลลิลิตรโพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (0.04 โมล / ลิตรค่า pH 7.0) ได้ถูกจัดทำ ส่วนผสมที่ได้รับการบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 64 ชั่วโมง aliquots (0.1 มิลลิลิตร) ถูกดึงออกมาจากส่วนผสมบ่มในช่วงเวลา 8 ชั่วโมงแล้วนำมาผสมกับ 5.0 มิลลิลิตร 75% (v / v) เอทานอล 0.1 มิลลิลิตร 300 กรัม / ลิตรthiocyanate แอมโมเนียมและ 0.1 มิลลิลิตร 20 mmol / L เหล็กคลอไรด์ใน 0.96 mol / L HCl และอนุญาตให้ยืนที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 3 นาที การดูดกลืนแสงวัดที่ 500 นาโนเมตร. ทดลองในการต้านอนุมูลอิสระได้รับการทำงานในเพิ่มขึ้นสามเท่าและยับยั้งเปอร์เซ็นต์ของการเกิด lipid peroxidation ที่คำนวณโดยใช้สูตรต่อไปนี้: การยับยั้งร้อยละ¼ 100 ½A1 = A0? 100 ในกรณีที่เป็น A0 การดูดกลืนแสงของการเกิดปฏิกิริยาการควบคุมและ A1 ก็ดูดกลืนแสงในการปรากฏตัวของสารสกัด สารต้านอนุมูลอิสระที่ได้รับการจัดกิจกรรมที่แสดงเป็นค่า IC50. 2.3.4 DPPH ต้านอนุมูลอิสระที่มีเสถียรภาพต้านอนุมูลอิสระถูกกำหนดโดย 1,1-diphenyl-2-picryl-hydracyl (DPPH ) (Sigmae GmbdH ดิช, เยอรมนี) วิธีการGülçin, Oktay, Kirec¸ci, และ Ku¨frevıoglu (2003) ˘ 0.1 mmol / L DPPH สารละลายในเมทานอลได้จัดทำขึ้นและจากนั้น 1 มิลลิลิตรของการแก้ปัญหานี้คือ
การแปล กรุณารอสักครู่..

ในหลอดทดลองที่แตกต่างกันที่มี 0.2 มิลลิลิตรของสารสกัดเมทานอล
ที่ความเข้มข้นต่างๆ บาทใช้มาตรฐานเปรียบเทียบ
การควบคุมที่มี 0.2 มิลลิลิตรของเมทานอลและ
5 ml ของอิมัลชันข้างต้นที่เตรียมไว้ หลอดถูก
อยู่ที่ 50 องศาเซลเซียส ในน้ำอาบ ค่าถ่ายที่ศูนย์ เวลา ( t ¼
0 ) ที่ 470 นาโนเมตร การวัดการดูดกลืนแสงคือ
อย่างต่อเนื่องจนสีของเบต้าแคโรทีนหายไปในการควบคุม
( T ¼ 180 นาทีที่ 15 นาที ช่วงเวลา ส่วนผสมที่เตรียมไว้ เช่น เบต้าแคโรทีนทำหน้าที่เป็น
ข้างบนโดยไม่ว่าง การทดลอง
ครั้งนี้ทั้งสามใบ ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของสารสกัด
ถูกประเมินในแง่ของการฟอกสี -
โดยใช้สมการต่อไปนี้ :
ฤทธิ์ต้าน¼
1 A0 ð ที่Þ =
A0
0 A0
T
100
และที่ A0 A0
0 เป็นค่าวัดที่ศูนย์เวลา
ของการบ่มตัวอย่างทดสอบ และควบคุม ตามลำดับ และที่และที่
0 เป็นค่าวัดสำหรับการทดสอบตัวอย่าง
และควบคุม ตามลำดับ หลังจากบ่มเป็นเวลา 180 นาที สารสกัดความเข้มข้น 50 %
ให้ยับยั้ง ic50 ) คือคำนวณ
จากกราฟของค่าความเข้มข้นสารยับยั้งต่อ
.
2.3.3 .วิธีที่ดีที่สุด
สารต้านอนุมูลอิสระของเปลือกเงาะและเมล็ดสารสกัด
ตามวิธีที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ โดยไทโอไซยาเนต
jayaprakasha et al . ( 2001 ) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย สารสกัดที่ละลายในเมทานอล
หุ้นโซลูชั่น บาท
ถูกใช้เป็นมาตรฐานเปรียบเทียบ สารละลายที่มี
หุ้นสกัดหรือบาทที่ความเข้มข้นต่าง ๆ ใน
25 ml ของโพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( 0.04 mol / L , pH 7.0 )
ย้ายไป 2.5 มิลลิลิตรของกรด linoleic อิมัลชันที่มี
tween-40 0.28 กรัม , 0.28 กรัมกรดไลโนเลอิละลายโพแทสเซียม
ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( 0.04 mol / L , pH 7.0 ) การควบคุมที่มี
2.5 มล. กรดไลโนเลอิอิมัลชันและ 2.5 ml โพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( 0.04 mol / l
, pH 7.0 ) ที่เตรียมไว้ ส่วนผสม
ถูกบ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 64 ชั่วโมงเฉยๆ ( 0.1 มิลลิลิตร
วาดจากส่วนผสมที่บ่มประมาณช่วงเวลาแล้ว
ผสมกับ 5.0 มล 75 % ( v / v ) เอทานอล , 0.1 มิลลิลิตร 300 กรัม / ลิตร
แอมโมเนียมไทโอไซยาเนต 0.1 มิลลิลิตร 20 มิลลิโมล / ลิตรเหล็ก
( 0.96 mol / L HCl และอนุญาตให้ยืน ที่
อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 3 นาที นวัด 500 nm .
ทดลองสารต้านอนุมูลอิสระถูกเรียกทั้งสามใบ
และเปอร์เซ็นต์การยับยั้ง lipid peroxidation คือคำนวณโดยใช้สูตรต่อไปนี้ :
¼ 100 เปอร์เซนต์ ½ A0 A1 = 100
ที่ A0 คือการดูดกลืนแสงของการควบคุมปฏิกิริยาและ A1
คือการดูดกลืนแสงในการปรากฏตัวของสารสกัด กิจกรรมของสารต้านอนุมูลอิสระมีภาพประกอบเป็น ic50 ค่า
.
2.3.4 . dpph กิจกรรม
เป็นตัวเร่งปฏิกิริยามีกำจัดอนุมูลอิสระได้ โดย 1,1-diphenyl-2-picryl-hydracyl ( dpph แล้ว
) (
sigmae ดิช gmbdh , เยอรมนี ) วิธีของกูตั้ง LC ¸ı N , oktay kirec ¸ , CI ,
และ KU ตั้ง frev ı oglu ( 2003 ) ˘ . เป็น 0.1 ลิตร dpph
เตรียมสารละลายเมทานอล mmol แล้ว 1 มิลลิลิตรของสารละลายนี้
การแปล กรุณารอสักครู่..
