prepared by vortexing 2.5 g DW soil with 22.5 ml 0.85% NaCl for 1 min and centrifuging the slurry for 5 min at 1000 g, subsequently removing the supernatant. The pellet was resuspended in 25 ml 0.85% NaCl and vortexed and centrifuged again. The two supernatants were pooled. This extract was diluted to contain approximately 5000 CFU/ml (according to plate counting) for the individual soils.
The EcoPlates were incubated at 25 C in plastic bags containing a soaked paper towel in order to minimize evaporation from the wells. Besides a carbon source, each well contains a tetrazolium redox dye that leads to formation of purple colour (formazan) when reduced by microbial respiration. The colour change is measured by the absorbance of light at 595 nm. After initiation of colour development the plates were read 5 times during the following 30 h by using a microtitre plate reader (FLUOstar Galaxy, BMG Labtech GmbH, Germany). For all 5 readings, the number of positive wells (well colour > 0.1) (Muller et al., 2001) was counted and the average well colour development (AWCD) was calculated. For each plate a reading with AWCD at 0.45 0.1 was used in the further data analysis. This was to ensure that differences in inoculation cell densities did not affect the obtained results (Garland and Mills, 1991). The relative use of a specific carbon source, pi, was calculated as the ratio between the OD595 of a single well and the total OD595 for all the positive wells in a sample.
เตรียมดินที่มีความเค็ม vortexing 2.5 กรัมราคา 22.5 มล. 0.85 % นาน 1 นาที และสารสำหรับ 5 นาทีที่ความเข้มข้น 1 , 000 กรัม ภายหลังการถอดนำ . เม็ดเป็น resuspended 25 ml 0.85% โซเดียมคลอไรด์ vortexed ไฟฟ้าอีกครั้ง สอง supernatants ถูกรวม . สารสกัดนี้เจือจางให้มีประมาณ 5 , 000 cfu / ml ตามจานนับ ) สำหรับดินแต่ละecoplates ที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียส ในถุงพลาสติกที่มีแช่ผ้าขนหนูกระดาษเพื่อลดการระเหยของน้ำจากบ่อน้ำ นอกจากเป็นแหล่งคาร์บอนแต่ละก็มี tetrazolium 1 สีที่นำไปสู่การก่อตัวของสีสีม่วง ( ปฏิบัติการ ) เมื่อลดการหายใจของจุลินทรีย์ เปลี่ยนสี วัดจากค่าของแสงที่ 595 นาโนเมตร หลังจากการเริ่มต้นของการพัฒนาสีจาน ( อ่าน 5 ครั้ง ใน 30 ชั่วโมง โดยใช้แผ่น microtitre อ่านต่อไปนี้ ( fluostar Galaxy , bmg labtech GmbH , Germany ) อ่านทั้งหมด 5 , จํานวนของเวลส์เป็นบวก ( ดีสี > 0.1 ) ( Muller et al . , 2001 ) และถูกนับโดยเฉลี่ยคือสีพัฒนา ( awcd ) คือการคำนวณ สำหรับแต่ละจาน การอ่านกับ awcd ที่ 0.45 0.1 ถูกนำมาใช้ในการวิเคราะห์ข้อมูลต่อไป นี้คือเพื่อให้แน่ใจว่า ความแตกต่างในการปลูกเซลล์มีความหนาแน่นไม่มีผลต่อผลการทดลอง ( พวงมาลัยและโรงสี , 1991 ) เทียบการใช้แหล่งคาร์บอนที่เฉพาะเจาะจงและถูกคำนวณเป็นอัตราส่วนระหว่าง od595 ของเดียวกัน และ od595 รวมทั้งหมดบวกเวลล์ ในตัวอย่าง
การแปล กรุณารอสักครู่..
