2. Materials and methods
2.1. Sample set
The sample collection consisted of 64 samples of cold-pressed lemon oil obtained by industrial extraction from 3 different geographic origins: Italy (n=46), Argentina (n=13) and Spain (n=5). Italian lemon fruits were harvested from November 2010 to May 2011, while Argentinian lemon fruits were harvested in May and June 2011. Spanish fruits were harvested from November 2010 to May 2011. The samples were obtained from industrial suppliers and were a mix of several cultivars. Because samples were obtained from industrial suppliers who bought lemon fruits from different farmers, it was impossible to obtain monovarietal CPLOs. Argentinian samples were obtained from Eureka, Lisbon, and Genova cultivars, Spanish samples were obtained from Fino and Verna cultivars, and Italian samples were obtained mainly from Feminello but also from Commune, Santa Teresa, and Sfusato cultivars. In this work, the geographic origin denomination did not consider differences among the cultivars.
To distinguish between the different extraction processes, emphasis was placed on the Italian sample set. The Italian sample set consisted of 46 samples extracted with 4 main different processes: BOE (Brown Oil Extractor) (n=11), Sfumatrice (n=11), Pelatrice (n=11), and FMC (FMC© extractor) (n=13).
The most common method is the FMC-type extractor, which is widely used in orange processing worldwide. In this method, the oil and juice are simultaneously extracted by a cutter tube that pierces the fruit and removes the juice while the oil is extracted. The separate juice and oil products are then piped away for further processing and finishing (Reeve, 2005).
The Brown Oil Extractor (BOE or Brown) process is particularly common in the United States and South America, and rare in Europe. It differs from FMC because the oil is extracted from lemons, first, by gently puncturing the flavedo, or peel, with thousands of stainless steel needle points. The oil sacks are then ruptured, releasing the oil, which is subsequently captured in a water spray. Next, this water spray is centrifuged to separate the water and to polish and finish the oil (Reeve, 2005).
The third main method of processing involves Pelatrice-type rasping equipment. This process is similar to the Brown process, but rather than using stainless steel needle points to pierce the fruit and remove the oil, the fruit is subjected to rolling disc graters that allow the flavedo to be rasped (Reeve, 2005).
The last method, Sfumatrice, involves extracting the oil from the half peels without juice. Peels fall into the oil extracting section and are taken by a rotating drum that rolls and presses them against a stationary profile. This causes a repeated deformation of the half peel and a breakage of the oil sacks. Oil is collected by a water rain provided through a set of sprayers. The mixture of water and essential oil falls into a tank and is then conveyed to the following stages of finishing and separation (Reeve, 2005).
The volatile and non-volatile fractions of the oil were subjected to various analytical methods, as described above.
2.2. FT-MIR
Three spectra of each sample (one for the CPLOR) were recorded, using a PerkinElmer Spectrum One spectrometer equipped with a DTGS detector, an Ever-Glo source, and a KBr/germanium beam splitter. Samples were deposited without any preparation on an ATR cell equipped with a diamond crystal. Spectra were recorded between 4000 cm-1 and 650 cm-1 with a nominal resolution of 4 cm-1 and 16 co-added accumulations. Air was taken as reference for the background spectrum before each sample. Between spectra, the ATR plate was cleaned in situ by scrubbing with ethanol solution. A background spectrum was regularly collected and compared to the previous background spectrum to verify cleanliness. This procedure was also used as instrument qualification.
2.3. GC-FID and GC-MS
The CPLO was injected into a GC 6890 (Agilent) equipped with a double injector and two DB-1 capillary columns (60 m × 0.25 mm, film thickness 0.25 μm, J&W 122-1062). One column was connected to an MS 5973N (Agilent) for identification, and the other to an FID for quantitation. The temperature programme was as follows: 50 °C for 5 min, increased to 120 °C at a rate of 3 °C/min, then increased to 250 °C at a rate of 5 °C/min, 5 min isothermal, then increased to 300 °C at a rate of 15 °C/min, and then 20 min isothermal; split ratio, 1:50; injection volume, 0.2 μl; injector and detector temperatures, both 250 °C; carrier gas, helium at constant flow rates of 1.8 ml/min and 2.1 ml/min, respectively. The CPLO was diluted 1:10 in dichloromethane before being submitted to GC-FID-MS analysis. For all GC-MS analyses, mass spectra were generated by EI at 70eV at a scan ranging from m/z: 29-250 during the first 20 min and then at a scan ranging from m/z: 29-450.
Compounds were identified by analyzing and comparing mass spectra and linear retention indice
2 . วัสดุและวิธีการ2.1 . ชุดตัวอย่างตัวอย่างคอลเลกชันจำนวน 64 ตัวอย่างสกัดเย็นน้ำมันที่ได้จากการสกัดมะนาวอุตสาหกรรมจากต้นกำเนิดทางภูมิศาสตร์ที่แตกต่างกัน 3 : อิตาลี ( n = 46 ) , อาร์เจนตินา ( n = 13 ) และสเปน ( n = 5 ) ผลมะนาวอิตาลีถูกเก็บเกี่ยวจากพฤศจิกายน 2553 - พฤษภาคม 2554 ในขณะที่ Argentinian มะนาวผลเก็บเกี่ยวในเดือนพฤษภาคมและมิถุนายน 2554 ผลไม้ สเปน เก็บจากพฤศจิกายน 2553 ถึงพฤษภาคม 2554 ตัวอย่างที่ได้จากอุตสาหกรรมซัพพลายเออร์และการผสมผสานของหลายพันธุ์ เพราะกลุ่มตัวอย่างอุตสาหกรรมซัพพลายเออร์ที่ซื้อผลไม้มะนาวจากเกษตรกรที่แตกต่างกัน มันเป็นไปไม่ได้ที่จะได้รับ monovarietal cplos . ตัวอย่างที่ได้จากอาร์เจนตินา ยูเรก้า ลิสบอน และ เจนัว พันธุ์ ตัวอย่างที่ได้จากฟีโน่ และ สเปนเวอร์นาพันธุ์ และตัวอย่างอิตาลีได้รับส่วนใหญ่มาจาก feminello แต่จากชุมชน Santa Teresa , และพันธุ์ sfusato . ในงานนี้ นิกายแหล่งกำเนิดทางภูมิศาสตร์ไม่ได้พิจารณาความแตกต่างระหว่างพันธุ์ที่จะแยกแยะระหว่างการสกัดกระบวนการต่าง ๆ เน้นวางอยู่บนชุดตัวอย่างของอิตาลี ตัวอย่างภาษาอิตาลีจำนวน 46 ตัวอย่างชุดสกัดด้วยกระบวนการที่แตกต่างกัน 4 หลัก : BOE ( ระบายน้ำมันสีน้ำตาล ) ( n = 11 ) sfumatrice ( n = 11 ) pelatrice ( n = 11 ) และ FMC ( FMC สงวนลิขสิทธิ์ ) ระบาย ( n = 13 )วิธีที่พบมากที่สุดเป็นชนิดแยก FMC ซึ่งเป็นที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในทั่วโลกของส้ม ในวิธีนี้ , น้ำมันและน้ำจะพร้อมกันสกัดด้วยเครื่องตัดท่อที่เจาะผลไม้และเอาน้ำในขณะที่น้ำมันสกัด น้ำผลไม้ แยก และผลิตภัณฑ์น้ำมันแล้วประปาไปสำหรับการประมวลผลต่อไปและสิ้นสุด ( Reeve , 2005 )แยกน้ำมันสีน้ำตาล ( BOE หรือสีน้ำตาล ) กระบวนการโดยทั่วไปโดยเฉพาะอย่างยิ่งในสหรัฐอเมริกาและอเมริกาใต้ และหายากในยุโรป มันแตกต่างจาก FMC เพราะน้ำมันสกัดจากมะนาว แรก โดยการค่อย ๆเจาะฟลาเวโด หรือลอก กับพันจุดเข็มเหล็กสแตนเลส น้ำมันถุงจะแตก ปล่อยน้ำมัน ซึ่งต่อมาถูกจับในละอองน้ำ ถัดไป , สเปรย์น้ำนี่ไฟฟ้าแยกน้ำและขัดและเสร็จสิ้นน้ำมัน ( Reeve , 2005 )วิธีหลักที่สามของการประมวลผลที่เกี่ยวข้องกับ pelatrice ประเภทเสียงอุปกรณ์ กระบวนการนี้คล้ายกับกระบวนการสีน้ำตาล แต่แทนที่จะใช้จุดเข็มสแตนเลสเจาะผลไม้และเอาน้ำมันออก ผลคือต้องรีดแผ่น graters ให้ฟลาเวโดจะ rasped ( Reeve , 2005 )วิธีสุดท้าย sfumatrice เกี่ยวข้องกับการสกัดน้ำมันจากเปลือกครึ่งโดยน้ำผลไม้ เปลือกตกอยู่ในน้ำมันสกัดส่วนและถูกกลองหมุนที่ม้วนและกดให้กับโปรไฟล์ของเครื่องเขียน นี้เกิดซ้ำการเสียรูปของครึ่งเปลือกและการแตกของน้ำมัน กระสอบ น้ำมันจะถูกเก็บรวบรวมโดยน้ำฝนให้ผ่านชุดของเครื่องพ่นสารเคมี . ส่วนผสมของน้ำและน้ำมันอยู่ในถัง แล้วถ่ายทอดไปยังขั้นตอนของการตกแต่งและการแยกต่อไปนี้ ( Reeve , 2005 )สารระเหยและไม่ระเหยเศษส่วนของน้ำมันที่ถูกภายใต้วิธีการวิเคราะห์ต่างๆตามที่อธิบายไว้ข้างต้น2.2 . ft-mirสามช่วงของแต่ละตัวอย่าง ( สำหรับ cplor ) ที่ถูกบันทึกไว้โดยใช้ Perkinelmer สเปกตรัมหนึ่งกล้องพร้อมเครื่อง dtgs , เคย Glo แหล่ง และ KBS / เจอร์เมเนียม beam splitter . จำนวนเงินโดยไม่มีการเตรียมการ ATR เซลล์พร้อมกับเพชรคริสตัล สเปกตรัมได้ถูกบันทึกไว้ระหว่าง 4000 cm-1 650 cm-1 ด้วยความละเอียดปกติ 4 cm-1 และ 16 บริษัทเพิ่มการสะสม . เครื่องถ่ายเป็นข้อมูลอ้างอิงสำหรับสเปกตรัมพื้นก่อนที่แต่ละตัวอย่าง ระหว่างสเปกตรัมของเอทีอาร์จานสะอาดใน situ โดยขัดถูด้วยสารละลายเอทานอล พื้นหลังคลื่นอยู่เป็นประจำเพื่อเทียบกับสเปกตรัมพื้นหลังก่อนหน้านี้เพื่อตรวจสอบความสะอาด ขั้นตอนนี้ยังใช้เป็นคุณสมบัติเครื่องมือ2.3 gc-fid และกรดการ cplo ถูกฉีดเข้าไปใน GC 6890 ( Agilent ) พร้อมหัวฉีดคู่และสองคอลัมน์ capillary db-1 ( 60 m × 0.25 มิลลิเมตร ความหนา 0.25 μ M , J & W 122-1062 ) คอลัมน์หนึ่งถูกเชื่อมต่อกับ MS 5973n ( Agilent ) สำหรับประชาชน และอีกเป็นสลักสำหรับเซลล์ . อุณหภูมิโปรแกรมดังนี้ 50 ° C เป็นเวลา 5 นาที เพิ่มเป็น 120 ° C ในอัตรา 3 ° C / นาที แล้วเพิ่มเป็น 250 ° C ในอัตรา 5 ° C / นาที , 5 นาทีและอุณหภูมิคงที่ และเพิ่มขึ้นถึง 300 องศา C ที่อัตรา 15 ° C / นาที แล้ว 20 นาทีคำนวณอัตราส่วน 1 : 50 ; ปริมาณ ; แยก , ฉีด , 0.2 μลิตร หัวฉีด และอุณหภูมิในเครื่องทั้ง 250 ° C ; ผู้ให้บริการก๊าซฮีเลียมคงที่ที่อัตราการไหล 2 มล. / นาทีและ 2.1 มิลลิลิตรต่อนาที ตามลำดับ การ cplo เจือจาง 1 : 10 ในไดคลอโรมีเทน ก่อนที่จะถูกส่งไปยังการวิเคราะห์ gc-fid-ms . ทั้งหมดและวิเคราะห์มวล โดยถูกสร้างขึ้นโดย EI ที่ 70ev ที่สแกนตั้งแต่ M / Z : 29-250 ช่วง 20 นาทีจากนั้นก็สแกนตั้งแต่ M / Z : 29-450 .สารประกอบที่ถูกระบุโดยการวิเคราะห์สเปกตรัมและการเปรียบเทียบมวล indi เชิงเส้น
การแปล กรุณารอสักครู่..
