Sample Collection and Characterization. Fresh squid samples
were randomly acquired from November 24 to 30, 2011, at
supermarkets in the city of Oporto, Portugal. All samples were Loligo
gahi, from Argentina Southwest Atlantic Ocean (FAO: 41). After
arrival at the laboratory, samples were minced and homogenized.
Moreover, hemolymph samples were obtained from Octopus vulgaris
specimen harvested live from the Northwest Atlantic Portuguese coast.
Sample collection, biometric characterization (Table 1), and
preparation were performed in accordance with EC regulation no.
333/2007.27 Moisture of squids was evaluated using 10 g of
homogenized sample according to Portuguese Standard NP 2282-
1991 and the official AOAC method.28
Samples were kept frozen, in polycarbonate containers, at .20 °C,
until analysis.
Sample Extraction, Hydrolysis, and Solid-Phase Extraction.
After defrosting, samples were minced and homogenized, and 1 g was
added of 1 mL of ascorbic acid (1 mg/mL) and 6 mL of acetonitrile.
Once vortex stirred, the sample was ultrasonicated for 5 min and
extracted by centrifugation at 4 °C and 10000g for 10 min. The
supernatant was collected and concentrated to dryness at 37 °C under
a gentle N2 stream.
For the enzymatic hydrolysis, the extract was redissolved in 4 mL of
sodium acetate buffer. Then, 20 ìL of â-glucuronidase/arylsulfatase
was added and the oxygen atmosphere replaced by nitrogen. After
incubation at 37 °C for 45 min, the enzymatic reaction was stopped by
Table 1. Squid and Octopus Sample Characterization
การเก็บตัวอย่างและทำให้
ตัวอย่างปลาหมึกสด สุ่มได้จาก 24 พฤศจิกายน 30 , 2011 , ใน
ซุปเปอร์มาร์เก็ตในเมืองปอร์โต , โปรตุเกส ตัวอย่าง loligo
gahi จากอาร์เจนตินาใต้มหาสมุทรแอตแลนติก ( FAO : 41 ) หลังจาก
มาถึงห้องปฏิบัติการ จำนวนและสับบด .
นอกจากนี้ ตัวอย่างเลือดที่ได้จาก Octopus vulgaris
ตัวอย่างเก็บเกี่ยวสดจากทิศตะวันตกเฉียงเหนือชายฝั่งโปรตุเกสมหาสมุทรแอตแลนติก .
ตัวอย่างคอลเลกชัน , ไบโอเมตริกซ์คุณสมบัติ ( ตารางที่ 1 ) และ
การเตรียมการตามระเบียบ กกต. ไม่
333 / 2007.27 ความชื้นของปลาหมึกจะถูกประเมินโดยใช้ 10 กรัม
บดตัวอย่างตามภาษาโปรตุเกสมาตรฐาน NP การต -
1991 และวิธีที่ 28 องศา เซลเซียส อย่างเป็นทางการ
ตัวอย่างถูกเก็บแช่แข็งในภาชนะโพลีคาร์บอเนตที่ 20 ° C ,
จนถึงการวิเคราะห์ ตัวอย่าง การแยก และสกัดเฟสของแข็ง .
หลังจากการละลายน้ำแข็งตัวอย่าง และสับบด , และ 1 g
เพิ่ม 1 มิลลิลิตรของกรดแอสคอร์บิค ( 1 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร ) และ 6 มิลลิลิตร ไน .
เมื่อทุกคน จำนวน ultrasonicated เป็นเวลา 5 นาทีและ
3 4 ° C ที่สกัดได้ด้วย และ 10000g
นาน 10 นาทีรวบรวมและนำแห้งที่อุณหภูมิ 37 องศา C เข้มข้นภายใต้กระแสอ่อนโยน N2
.
สำหรับการย่อยด้วยเอนไซม์ , สารสกัดที่ได้ redissolved 4 ml
โซเดียมอะซิเตตบัฟเฟอร์ แล้ว 20 ì l âที่มีอวัยวะ / arylsulfatase
เพิ่มออกซิเจนและบรรยากาศแทนที่ด้วยไนโตรเจน หลังจากบ่มที่ 37 ° C
45 นาที ปฏิกิริยาของเอนไซม์ที่ถูกหยุดโดย
โต๊ะ 1ปลาหมึกและปลาหมึกตัวอย่างคุณลักษณะ
การแปล กรุณารอสักครู่..
