2.3.4. Ultrasonic pretreatment (Variant IV)
Ground waste bread samples (30 g dry matter basis) were
slurred in ca. 150 mL of distilled water preheated to 35 C in a
300 mL conical flasks. The flasks were placed in an ultrasonic bath
SONIC-0.5 (Polsonic, Poland) for 5 min, as described by the
manufacturer the power of the bath was 250W and ultrasonic frequency
was 40 kHz. After this time the experimental procedure
was the same as in Section 2.3.1.
2.3.5. Separate hydrolysis and fermentation (SHF) (Variant V)
Waste bread samples (37.5 g dry matter basis) were weighted
into the mashing cups and slurred with ca. 180 mL of distilled
water. pH of the slurry was adjusted to 6.0 using 1 mol L1
H2SO4 or NaOH solutions. The cups were placed in a LB 12 laboratory
mashing device (Lochner Labor + Technik, Germany) preheated
to 45 C. The mashing was conducted with 150 rpm
(2.5 Hz) stirring speed and 2 C min1 heating and cooling rate.
When the temperature of the slurry reached 60 C thermostable
a-amylase (Termamyl SC DS, 2 mL kg1 of raw material dry matter)
was added and the bath of the mashing device was further
heated to 85 C. The starch liquefaction was conducted for
60 min. Then the samples were cooled to 55 C, its pH was adjusted
to 5.8 with 7.11 mol L1 H2SO4, glucoamylase (SAN Extra L,
1.25 mL kg1 of raw material dry matter) and protease (Neutrase
0.8 L, 0.875 mL kg1 of raw material dry matter) were added and
the hydrolysis was conducted for 90 min. After this time the samples
were cooled to 20 C, the pH of the samples was adjusted to
4.5 using 1 mol L1 H2SO4 solution, and total weight of the mashes
was adjusted to 250 g using distilled water resulting in a final raw
material loading at 150 g kg1 of mash. 200 g aliquots of the
mashes were transferred to 300 ml conical flasks, inoculated with
2 ml of yeast slurry (yeast concentration of 1 g kg1 of mash) and
sealed with rubber stopper with fermentation tube and sampling
port. Further procedure was the same as described in Section 2.3.1.
2.4. Analytical methods
Fermentation dynamics was assessed gravimetrically measuring
the weight loss of fermentation medium due to CO2 release as
described earlier [12]. The samples for physico-chemical analysis
(ca. 20 mL aliquots) were taken every 24 h of fermentation. The
non dissolved solids concentration was determined as follows: ca.
10 g of fermentation media (with an accuracy of 0.001 g) were filtered
through pre-dried (105 C, 4 h) and pre-weighted filter paper,
the residual dissolved solids were washed with ca. 250 mL of distilled
water. The filters with remaining non-dissolved solids were
dried in an oven at 60 C for 12 h next at 105 C for 4 h. Afterwards
the filters were cooled to room temperature in a desiccator and
weighted with an accuracy of 0.001 g. The difference in the weight
of the filter with and without of non-dissolved particles gave the
concentration of them in the fermentation medium which was
expressed as grams of non-dissolved solids per kilogram. For HPLC,
reducing sugar and dissolved solids analysis the samples of fermentation
media were centrifuged at 6000 rpm (5243g) at 4 C using
MPW-351R centrifuge (MPW Med. Instruments, Poland) and clear
supernatants were taken for analyses. The reducing sugars concentration
(as glucose) was determined using the DNS method [26].
The dissolved solids content (apparent extract) was determined
by the density measurement of the clarified fermentation medium
as described previously [29]. The concentration of sugars (glucose,
maltotriose and dextrins (DP4+)), fermentation by-products (glycerol,
lactic acid) and ethanol was determined using high performance
liquid chromatography (HPLC). Prior to analysis clear
supernatant after centrifugation of fermentation media was diluted
with bidistilled water in a 1:3 v/v ratio and filtered through nylon
syringe filter (0.2 lm). The analysis was performed using Prominence
chromatograph (Shimadzu, Japan) equipped with Rezex
ROA-Organic Acid H + column (300 7.8 mm) (Phenomenex,
USA). Following parameters of HPLC analysis were applied: injection
volume-20 lL, elution temperature-60 C, mobile phase-
0.005 mol L1 H2SO4, mobile phase flow rate-0.6 mL min1. The
analytes were detected using refractive index detector (RID-10A
2.3.4 พัฒนา, pretreatment อัลตราโซนิค (ตัวแปร IV)มีตัวอย่างขนมปังเสียพื้นดิน (ข้อมูลพื้นฐานเรื่องแห้ง 30 กรัม)slurred ใน ca 150 mL ของน้ำกลั่นต่ำถึง 35 C ในการ300 mL ทรงกรวยน้ำ น้ำถูกวางในการอัลตราโซนิกSONIC-0.5 (Polsonic โปแลนด์) ใน 5 นาที ตามด้วยการผู้ผลิตพลังงานของน้ำถูก 250W และความถี่อัลตราโซนิกมี 40 kHz หลังจากนี้เวลาขั้นตอนการทดลองเดียวกันกับหัวข้อ 2.3.12.3.5 การแยกไฮโตรไลซ์และหมัก (SHF) (ตัวแปร V)มีการถ่วงน้ำหนักขนมปังเสียตัวอย่าง (ข้อมูลพื้นฐานเรื่องแห้ง 37.5 g)ลงในถ้วย mashing และ slurred กับ ca 180 mL ของกลั่นน้ำ pH ของสารละลายถูกปรับปรุง 6.0 ใช้โมล 1 L 1โซลูชั่นกำมะถันหรือ NaOH ถ้วยไว้ในห้องปฏิบัติการ 12 ปอนด์mashing อุปกรณ์ (แรงงาน Lochner + Technik เยอรมนี) ต่ำการค. 45 การ mashing ถูกดำเนินการกับ 150 รอบต่อนาทีความเร็วการกวน (2.5 Hz) และ 2 C นาที 1 เครื่องทำความร้อน และเย็นอัตราเมื่ออุณหภูมิของสารละลายที่ถึง 60 C thermostableมี amylase (Termamyl SC DS, 2 mL กิโลกรัม 1 เรื่องวัตถุดิบแห้ง)เพิ่ม และอ่างอาบน้ำอุปกรณ์ mashing ถูกเพิ่มเติมอุณหภูมิ 85 c Liquefaction แป้งถูกดำเนินการ60 นาที จากตัวอย่างได้ระบายความร้อนด้วย 55 C มีการปรับปรุงค่า pH ของไป 5.8 มีโมล 7.11 L 1 กำมะถัน glucoamylase (ซานเสริม L1.25 mL กก. 1 ของวัตถุดิบแห้งเรื่อง) และรติเอส (Neutrase0.8 L, 0.875 mL 1 กิโลกรัมของวัตถุดิบแห้งเรื่อง) ถูกเพิ่มเข้ามา และไฮโตรไลซ์ถูกดำเนินการสำหรับ 90 นาที หลังจากนี้เวลาตัวอย่างมีการระบายความร้อนด้วยกับ 20 C, pH ของตัวอย่างถูกปรับปรุงให้ใช้โซลูชัน L 1 กำมะถัน 1 โมล และน้ำหนักรวมของ mashes 4.5มีการปรับปรุงการ 250 กรัมใช้น้ำกลั่นเป็นผลสุดท้ายที่ดิบวัสดุที่โหลดที่ 150 g กก. 1 ของสาย aliquots 200 g ของmashes ถูกโอนไป 300 มล.น้ำทรงกรวย inoculated ด้วย2 ml ของสารละลายยีสต์ (ยีสต์เข้มข้นของ 1 g kg 1 ของหน่วย) และปิดผนึก ด้วยจุกยางที่มีหลอดหมักและสุ่มตัวอย่างพอร์ต ขั้นตอนต่อไปได้เหมือนกับที่อธิบายไว้ในหัวข้อ 2.3.12.4 การวิเคราะห์วิธีหมัก dynamics ถูกประเมินวัด gravimetricallyน้ำหนักของกลางหมักเนื่องจาก CO2 ปล่อยเป็นอธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [12] ตัวอย่างสำหรับการวิเคราะห์ทางเคมีและฟิสิกส์(ca. 20 mL aliquots) ได้นำทุก 24 ชมของหมักดอง ที่กำหนดความเข้มข้นของของแข็งไม่ละลายดัง: caถูกกรอง 10 กรัมหมักสื่อ (มีความถูกต้องของ 0.001 g)ผ่านก่อนแห้ง (105 C, 4 h) และก่อนถ่วงน้ำหนักกระดาษกรองของแข็งละลายส่วนที่เหลือถูกล้าง ด้วย ca 250 mL ของกลั่นน้ำ กรอง ด้วยของแข็งไม่ใช่ส่วนยุบที่เหลือได้อบแห้งในเตาอบที่ 60 C สำหรับ h 12 ถัดไปที่ 105 C สำหรับ 4 h. ภายหลังตัวกรองที่ได้ระบายความร้อนด้วยอุณหภูมิห้องใน desiccator เป็น และถ่วงน้ำหนักแม่นยำ 0.001 g ความแตกต่างของน้ำหนักของตัวกรองที่มี และไม่มีของอนุภาคที่ไม่ใช่ส่วนยุบให้การความเข้มข้นของพวกเขาในการหมักซึ่งแสดงเป็นกรัมของแข็งที่ไม่ใช่ส่วนยุบต่อกิโลกรัม สำหรับ HPLCลดน้ำตาลและการวิเคราะห์ของแข็งที่ละลายตัวอย่างของหมักดองสื่อถูก centrifuged ที่ 6000 รอบต่อนาที (5243g) ที่ใช้ 4 Cเครื่องหมุนเหวี่ยง MPW 351R (เครื่องมือประ MPW โปแลนด์) และล้างsupernatants ถูกใช้สำหรับวิเคราะห์ ความเข้มข้นของน้ำตาลลดลง(เป็นน้ำตาลกลูโคส) ที่ถูกกำหนดโดยใช้วิธีการ DNS [26]กำหนดเนื้อหาของแข็งละลาย (แยกชัดเจน)โดยวัดความหนาแน่นปานกลางใสหมักตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [29] ความเข้มข้นของน้ำตาล (กลูโคสmaltotriose และ dextrins (DP4 +)), หมักสินค้าพลอย (กลีเซอรกรด) และเอทานอลถูกกำหนดใช้ประสิทธิภาพสูงเหลว chromatography (HPLC) ก่อนการวิเคราะห์ชัดเจนsupernatant หลัง centrifugation หมักสื่อถูกทำให้เจือจางน้ำ bidistilled ในอัตราส่วนเป็น 1:3 v/v และกรองผ่านผ้าไนล่อนกรองเข็ม (0.2 lm) ทำการวิเคราะห์โดยใช้ความโดดเด่นchromatograph (Shimadzu ญี่ปุ่น) พร้อม Rezexราวอินทรีย์กรด H + คอลัมน์ (300 7.8 mm) (Phenomenexสหรัฐอเมริกา) ใช้พารามิเตอร์ต่อไปนี้วิเคราะห์ HPLC: ฉีดปริมาตร 20 lL, elution อุณหภูมิ 60 C ระยะเคลื่อนที่ -0.005 โมล L 1 กำมะถัน ระยะเคลื่อนไหลอัตรา 0.6 mL นาที 1 ที่analytes พบใช้ดรรชนีจับ (RID-10A
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.3.4. Ultrasonic pretreatment (Variant IV)
Ground waste bread samples (30 g dry matter basis) were
slurred in ca. 150 mL of distilled water preheated to 35 C in a
300 mL conical flasks. The flasks were placed in an ultrasonic bath
SONIC-0.5 (Polsonic, Poland) for 5 min, as described by the
manufacturer the power of the bath was 250W and ultrasonic frequency
was 40 kHz. After this time the experimental procedure
was the same as in Section 2.3.1.
2.3.5. Separate hydrolysis and fermentation (SHF) (Variant V)
Waste bread samples (37.5 g dry matter basis) were weighted
into the mashing cups and slurred with ca. 180 mL of distilled
water. pH of the slurry was adjusted to 6.0 using 1 mol L1
H2SO4 or NaOH solutions. The cups were placed in a LB 12 laboratory
mashing device (Lochner Labor + Technik, Germany) preheated
to 45 C. The mashing was conducted with 150 rpm
(2.5 Hz) stirring speed and 2 C min1 heating and cooling rate.
When the temperature of the slurry reached 60 C thermostable
a-amylase (Termamyl SC DS, 2 mL kg1 of raw material dry matter)
was added and the bath of the mashing device was further
heated to 85 C. The starch liquefaction was conducted for
60 min. Then the samples were cooled to 55 C, its pH was adjusted
to 5.8 with 7.11 mol L1 H2SO4, glucoamylase (SAN Extra L,
1.25 mL kg1 of raw material dry matter) and protease (Neutrase
0.8 L, 0.875 mL kg1 of raw material dry matter) were added and
the hydrolysis was conducted for 90 min. After this time the samples
were cooled to 20 C, the pH of the samples was adjusted to
4.5 using 1 mol L1 H2SO4 solution, and total weight of the mashes
was adjusted to 250 g using distilled water resulting in a final raw
material loading at 150 g kg1 of mash. 200 g aliquots of the
mashes were transferred to 300 ml conical flasks, inoculated with
2 ml of yeast slurry (yeast concentration of 1 g kg1 of mash) and
sealed with rubber stopper with fermentation tube and sampling
port. Further procedure was the same as described in Section 2.3.1.
2.4. Analytical methods
Fermentation dynamics was assessed gravimetrically measuring
the weight loss of fermentation medium due to CO2 release as
described earlier [12]. The samples for physico-chemical analysis
(ca. 20 mL aliquots) were taken every 24 h of fermentation. The
non dissolved solids concentration was determined as follows: ca.
10 g of fermentation media (with an accuracy of 0.001 g) were filtered
through pre-dried (105 C, 4 h) and pre-weighted filter paper,
the residual dissolved solids were washed with ca. 250 mL of distilled
water. The filters with remaining non-dissolved solids were
dried in an oven at 60 C for 12 h next at 105 C for 4 h. Afterwards
the filters were cooled to room temperature in a desiccator and
weighted with an accuracy of 0.001 g. The difference in the weight
of the filter with and without of non-dissolved particles gave the
concentration of them in the fermentation medium which was
expressed as grams of non-dissolved solids per kilogram. For HPLC,
reducing sugar and dissolved solids analysis the samples of fermentation
media were centrifuged at 6000 rpm (5243g) at 4 C using
MPW-351R centrifuge (MPW Med. Instruments, Poland) and clear
supernatants were taken for analyses. The reducing sugars concentration
(as glucose) was determined using the DNS method [26].
The dissolved solids content (apparent extract) was determined
by the density measurement of the clarified fermentation medium
as described previously [29]. The concentration of sugars (glucose,
maltotriose and dextrins (DP4+)), fermentation by-products (glycerol,
lactic acid) and ethanol was determined using high performance
liquid chromatography (HPLC). Prior to analysis clear
supernatant after centrifugation of fermentation media was diluted
with bidistilled water in a 1:3 v/v ratio and filtered through nylon
syringe filter (0.2 lm). The analysis was performed using Prominence
chromatograph (Shimadzu, Japan) equipped with Rezex
ROA-Organic Acid H + column (300 7.8 mm) (Phenomenex,
USA). Following parameters of HPLC analysis were applied: injection
volume-20 lL, elution temperature-60 C, mobile phase-
0.005 mol L1 H2SO4, mobile phase flow rate-0.6 mL min1. The
analytes were detected using refractive index detector (RID-10A
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.3.4 . เครื่องทำขนมปัง ( ตัวแปร 4 )
ตัวอย่างขยะพื้นดิน 30 กรัมน้ำหนักแห้งพื้นฐาน )
รู้เรื่องในประมาณ 150 มิลลิลิตรน้ำตั้ง 35 C
300 มล. ในขวดรูปกรวย . ขวดที่ถูกวางไว้ในเครื่องอาบน้ำ
sonic-0.5 ( polsonic , โปแลนด์ ) 5 นาที ตามที่อธิบายไว้โดย
ผู้ผลิตพลังของนํ้าคือ 250W และอัลตราโซนิก ความถี่ 40 kHz
.หลังจากเวลานี้
กระบวนการทดลองเช่นเดียวกับในส่วน 2.3.1 .
2.3.5 . การแยกและกระบวนการหมัก ( shf ) ( ตัว V )
ตัวอย่างขนมปังเสีย ( 37.5 กรัม แห้งหนักพื้นฐาน )
เข้าบดถ้วยและรู้เรื่องด้วยประมาณ 180 มิลลิลิตร
กลั่นน้ำ pH ของสารละลายปรับใช้ 1 mol / 6.0 1
กรดซัลฟิวริก หรือใช้โซลูชั่น ถ้วยอยู่ในปอนด์ 12 ห้องปฏิบัติการ
เครื่องบด ( ล็อกเนอร์ แรงงาน เทคโนโลยี เยอรมัน ) ตั้ง 45
c บดจำนวน 150 รอบต่อนาที
( 2.5 Hz ) ความเร็วในการกวนและ 2 C มิน 1 ความร้อนและอุณหภูมิ .
เมื่ออุณหภูมิของน้ำใน ถึง 60 C
a-amylase ( เทอร์มามิล SC DS 2 มิลลิลิตรต่อกิโลกรัม 1 วัสดุแห้งดิบ )
เพิ่มและนํ้าของ mashing อุปกรณ์เพิ่มเติม
อุ่น 85 Cแป้ง , มีวัตถุประสงค์เพื่อ
60 นาทีแล้วจำนวนเย็น 55 C , pH ของปรับ
ดีขึ้นกับ 7.11 mol กรดซัลฟิวริก ( 1 ลิตร เหมือนซานพิเศษ L ,
1.25 มล. 1 กิโลกรัม วัตถุดิบแห้ง ) และโปรตีน ( โปรตีน 0.8 มิลลิลิตรต่อกิโลกรัม 0.875
L 1 วัสดุแห้งดิบ ) และการเพิ่ม
เป็น 90 นาที หลังจากเวลานี้ ตัวอย่าง
ถูกเย็น 20 CpH ของตัวอย่างปรับใช้
1 L 1 4.5 mol กรดซัลฟิวริก โซลูชั่น และน้ำหนักรวมของ mashes
ปรับใช้น้ำกลั่น 250 กรัม ส่งผลให้สุดท้ายวัสดุดิบ
โหลด 150 กรัมต่อกิโลกรัม 1 บด 200 กรัมเฉยๆของ
mashes โอน 300 ml ขวดกรวย ,
2 มิลลิลิตร ใส่น้ำ ( ปริมาณยีสต์ยีสต์ 1 กรัมต่อกิโลกรัม 1
บด ) และปิดด้วยจุกยาง กับ ท่อหมัก
พอร์ตและการสุ่มตัวอย่าง ขั้นตอนต่อไปก็เหมือนกับที่อธิบายไว้ในมาตราที่ 2.3.1 .
2.4 . วิธีการวิเคราะห์และประเมินการวัดพลวัต
gravimetrically การสูญเสียน้ำหนักเนื่องจากการปล่อย CO2 เป็นอาหารเลี้ยงเชื้อชนิด
อธิบายไปก่อนหน้านี้ [ 12 ] ตัวอย่างการวิเคราะห์ทางกายภาพและเคมี (
.20 เฉยๆมิลลิลิตร ) ถ่ายทุกชั่วโมงที่ 24 ของการหมัก
ไม่ใช่ของแข็งละลายน้ำความเข้มข้นตั้งใจดังนี้ : .
10 กรัมของสื่อการหมัก ( ด้วยความถูกต้องของ 0.001 g )
ผ่านกรองก่อนแห้ง ( 105 C 4 H ) และก่อนน้ำหนักกระดาษกรอง
ที่เหลือละลายได้ถูกล้างด้วยประมาณ 250 มิลลิลิตร
กลั่นน้ำ ตัวกรองกับส่วนที่เหลือไม่ใช่ของแข็งละลายได้
อบในเตาอบที่อุณหภูมิ 60 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 12 ชั่วโมง ถัดไปที่ 105 C เป็นเวลา 4 ชั่วโมง หลังจากนั้น
ตัวกรองเป็นเย็นที่อุณหภูมิห้องในเดซิกเคเตอร์และ
ถ่วงน้ำหนักด้วยความถูกต้องของ 0.001 กรัม ความแตกต่างในน้ำหนัก
ของตัวกรองที่มีและไม่มีที่ไม่ละลายอนุภาคให้
ความเข้มข้นของพวกเขาใน การหมักขนาดกลางซึ่ง
แสดงเป็นกรัมไม่ละลายต่อกิโลกรัม สำหรับ HPLC
ลดน้ำตาลและของแข็งละลายน้ำวิเคราะห์ตัวอย่างของสื่อและเป็นระดับที่ 6000 รอบต่อนาที (
5243g ) ที่ 4 C ใช้
mpw-351r เครื่องหมุนเหวี่ยง ( mpw Med . เครื่องมือ , โปแลนด์ ) และชัดเจน
supernatants นำมาวิเคราะห์ . การลดน้ำตาลความเข้มข้น
( กลูโคส ) ตั้งใจใช้ DNS วิธี [ 26 ] .
ละลายของแข็ง ( แยกชัดเจน ) ตั้งใจ
โดยการวัดความหนาแน่นของการชี้แจงหมักปานกลาง
ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [ 29 ] ความเข้มข้นของน้ำตาล ( กลูโคส ,
มอลโตไทรโอสเดกซ์ตริน ( และ dp4 ) ผลพลอยได้จากการหมัก ( กลีเซอรอล
กรด ) และเอทานอลก็ตัดสินใจใช้วิธีโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง ( HPLC )
. ก่อนการวิเคราะห์ชัดเจน
น่านหลังการปั่นเหวี่ยงสื่อการหมักเจือจาง
bidistilled กับน้ำในอัตราส่วน 1 : 3 v / V และกรองผ่านตัวกรองเข็มไนลอน
( 0.2 ไมโครเมตร ) ผลจากการวิเคราะห์โดยใช้โดด
Chromatograph ( Shimadzu ญี่ปุ่น ) พร้อมกับคอลัมน์ rezex
ที่กรดอินทรีย์ H ( 300 7.8 มิลลิเมตร ) ( phenomenex
, USA ) พารามิเตอร์ต่อไปนี้การวิเคราะห์ HPLC ใช้ฉีด
volume-20 จะใช้เฟสเคลื่อนที่ temperature-60 C -
0.005 โมล L กรดซัลฟิวริก 1 ,การไหลของเฟสเคลื่อนที่ rate-0.6 มิลลิลิตรต่อนาที 1 พบว่ามีการใช้เครื่องตรวจจับสาร
( rid-10a ดัชนีหักเห
การแปล กรุณารอสักครู่..
