.6. Oxygen radical absorbance capac

.6. Oxygen radical absorbance capacity (ORAC) assay
The assay was carried out as described previously (Huang et al., 2005) with
minor modification. The ORAC assay was carried out on a microplate reader (DTX
880, Beckman Coulter, USA). Trolox, a water-soluble analog of vitamin E, was used
as a control standard. Briefly, the extract and trolox were diluted in a 96-well
microplate. Trolox was prepared in concentrations of 100, 75, 50, 25, 12.5 and
0lM while the dilution factors of 20, 200, 400, 800, 1600 and 3200were applied
for the extract sample. In the analysis, 180ll of fluorescein working solution, 30ll
of phosphate working buffer and 30ll of diluted sample/trolox were loaded into
each well. The reaction was carried out at 37C and the plate was incubated for
10 min before adding 2,2
0
-azobis (2-amidinopropane) dihydrochloride (AAPH).
After adding AAPH, the plate was shaken to mix the reagents in each well before
recording the initial fluorescence (f0). Fluorescence readings were taken at 0 s (s)
(f0) and then every 90 s thereafter (f1, f2, f3,...) for 50 cycles. The final ORAC values
were calculated by using a regression equation between trolox concentration and
the net area under the curve by MATLAB program and were expressed as micromole
trolox equivalents (TE) per gram of dry pericarp weight (lmol TE/g DW). All the
reaction mixtures were prepared in duplicate, and at least three independent assays
were performed for each sample

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

.6 ออกซิเจนรุนแรง absorbance (ORAC) กำลังทดสอบทำการวิเคราะห์ออกตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (หวง et al., 2005) ด้วยแก้ไขเล็กน้อย วิเคราะห์ ORAC ถูกดำเนินการบนเครื่อง microplate อ่าน (DTX880, Beckman Coulter สหรัฐอเมริกา) ใช้ Trolox แอนะล็อกที่ละลายในของวิตามินอีเป็นการควบคุมมาตรฐาน สั้น ๆ trolox และสารสกัดได้ผสมใน 96-ดีmicroplate Trolox ถูกเตรียมในความเข้มข้น 100, 75, 50, 25, 12.5 และ0lM ในขณะที่ปัจจัยเจือจาง 20, 200, 400, 800, 1600 และ 3200 ใช้สำหรับตัวอย่างของสารสกัด ในการวิเคราะห์ 180ll ของ fluorescein ทำโซลูชั่น 30llของฟอสเฟต บัฟเฟอร์ทำงานและ 30ll ของ trolox แตกออกอย่างถูกโหลดลงในแต่ละบ่อ ปฏิกิริยาเกิดขึ้นใน 37 C และจานถูก incubated สำหรับ10 นาทีก่อนที่จะเพิ่ม 2,20dihydrochloride - azobis (2-amidinopropane) (AAPH)หลังจากเพิ่ม AAPH จานถูกเขย่าผสม reagents ในแต่ละดีก่อนบันทึก fluorescence เริ่ม (f0) อ่าน fluorescence ที่ถ่ายที่ 0 s (s)(f0) และจากนั้นทุก ๆ 90 s หลังจากนั้น (f1, f2, f3,...) สำหรับ 50 รอบ ค่า ORAC ขั้นสุดท้ายมีคำนวณ โดยใช้สมการถดถอยระหว่างความเข้มข้นของ trolox และตั้งสุทธิภายใต้เส้นโค้งด้วยโปรแกรม MATLAB และถูกแสดงเป็น micromoleเทียบเท่า trolox (TE) ต่อกรัมของน้ำหนัก pericarp แห้ง (lmol TE/g DW) ทั้งหมดนี้มีเตรียมน้ำยาผสมปฏิกิริยาซ้ำ และ assays อิสระน้อยสามดำเนินการแต่ละอย่าง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

0.6 ความสามารถในการดูดซับออกซิเจนที่รุนแรง (ORAC)
การวิเคราะห์ทดสอบที่ได้รับการดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้(Huang et al., 2005)
ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย การทดสอบ ORAC ได้ดำเนินการเกี่ยวกับการอ่าน microplate (ที่ DTX
880 Beckman Coulter, สหรัฐอเมริกา) Trolox
เป็นอะนาล็อกที่ละลายน้ำได้วิตามินอีถูกนำมาใช้เป็นมาตรฐานการควบคุม สั้น ๆ , สารสกัดและ trolox ถูกปรับลดใน 96 หลุม
microplate Trolox ถูกจัดทำขึ้นในระดับความเข้มข้น 100, 75, 50, 25, 12.5 และ
0lM ขณะที่ปัจจัยการลดสัดส่วนของ 20, 200, 400, 800, 1600 และ 3200?
ถูกนำไปใช้สำหรับตัวอย่างสารสกัด ในการวิเคราะห์การ 180ll ของ fluorescein ทำงานแก้ปัญหา 30ll
ฟอสเฟตบัฟเฟอร์การทำงานและการ 30ll ของกลุ่มตัวอย่างเจือจาง / trolox
ถูกโหลดลงในแต่ละดี ปฏิกิริยาที่ได้ดำเนินการที่ 37 องศาเซลเซียสและแผ่นที่ถูกบ่มเป็นเวลา
10 นาทีก่อนที่จะเพิ่ม 2,2
0
-azobis (2 amidinopropane) dihydrochloride (AAPH).
หลังจากเพิ่ม AAPH จานถูกเขย่าผสมน้ำยาในแต่ละดี
ก่อนที่จะบันทึกการเรืองแสงครั้งแรก(F0) อ่านเรืองแสงถูกนำมาที่ 0 วินาที (s)
(F0) และจากนั้นทุก 90 วินาทีหลังจากนั้น (F1, F2, F3, ... ) สำหรับ 50 รอบ ค่า ORAC
สุดท้ายจะถูกคำนวณโดยใช้สมการถดถอยระหว่างความเข้มข้นของTrolox
และพื้นที่สุทธิใต้เส้นโค้งโดยโปรแกรมMATLAB
และถูกแสดงเป็นไมโครโมเทียบเท่าtrolox (TE) ต่อกรัมของน้ำหนักแห้งเปลือก (lmol TE / g DW) ทั้งหมดผสมปฏิกิริยาได้จัดทำขึ้นที่ซ้ำกันและอย่างน้อยสามอิสระตรวจได้ดำเนินการสำหรับแต่ละตัวอย่าง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

6 . ความจุการดูดกลืนแสงออกซิเจนรุนแรง ( ORAC ) (
) ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( Huang et al . , 2005 ) กับ
การปรับปรุงเล็กน้อย โดยวิธี ORAC ได้ดําเนินการในพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย ( อ่าน 880 Beckman Coulter ดีทีเ กซ์
, USA ) อนาล็อกสารละลายของวิตามิน E ใช้
เป็นตัวควบคุมมาตรฐาน สั้น ๆ , สารสกัดและสารลด ในพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทยเป็น 96 ดี

เตรียมสารในความเข้มข้น 100 , 75 , 50 , 25 , 12.5 และ
0lm ในขณะที่การปัจจัย 20 , 200 , 400 , 800 , 1600 กับ 3200  ประยุกต์
เพื่อสกัดตัวอย่าง ในการวิเคราะห์การทำงานของ 180ll ี่โซลูชั่น 30ll
ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ และการทำงานของ 30ll เจือจางตัวอย่าง / สารถูกโหลดเข้า
แต่ละอย่างดี ปฏิกิริยาที่ถูกดำเนินการใน 37  C และจานบ่มสำหรับ
10 นาทีก่อนที่จะเพิ่ม 2 , 2
0
- azobis ( 2-amidinopropane ) : ( aaph ) .
หลังจากการเพิ่ม aaph จานที่ถูกเขย่าผสมสารเคมีในแต่ละก่อน
บันทึกการเริ่มต้น ( ละ ) การอ่าน การถ่ายที่ 0 s ( s )
( ละ ) แล้วทุก 90 วินาทีหลังจากนั้น ( F1 , F2 , F3 , . . . ) อีก 50 รอบ และ ORAC ค่า
สุดท้ายคำนวณโดยใช้สมการถดถอยระหว่างสารความเข้มข้นและ
สุทธิพื้นที่ใต้เส้นโค้งโดยใช้โปรแกรม MATLAB และถูกแสดงเป็นไมโครโมล
สารเทียบเท่า ( TE ) 1 กรัม น้ำหนักเปลือกแห้ง ( lmol te / กรัม แห้ง ) ส่วนผสมทั้งหมด
ปฏิกิริยาเตรียมในที่ซ้ำกัน และอย่างน้อยสามอิสระ )
) มีการสำหรับแต่ละตัวอย่าง