Polymerase chain reaction (PCR) pri

Polymerase chain reaction (PCR) primers were designed
for 10 microsatellite markers using Fast PCR version 3.2
(Kalendar 2003). Annealing and amplification conditions
were standardized and potential interlocus primer interactions
were minimized in an effort to allow for multiplexing
microsatellite loci in a single PCR. Following an initial test
of unlabelled primer sets, four microsatellite loci were
chosen for further optimization. The forward primer of
each of these microsatellites was fluorescently labelled
(Table 1) and all combinations of microsatellite multiplexing
reactions were tested (data not shown). Three of the microsatellite
loci multiplexed well (
Habd
3,
Habd
6,
Habd
9).
Habd
7
was PCR-amplified independently and added to the
multiplex set prior to analysis on an ABI 3100 automated
sequencer (Applied Biosystems).

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วิธี Polymerase chain reaction (PCR) ไพรเมอร์ได้รับการออกแบบ
สำหรับเครื่องหมายไมโคร 10 โดยใช้จาน PCR รุ่น 3.2
(ปฏิทิน 2003) การอบและการขยายเงื่อนไข
ให้เป็นมาตรฐานและมีศักยภาพในการปฏิสัมพันธ์ interlocus ไพรเมอร์
ได้รับการลดลงในความพยายามที่จะอนุญาตให้มีการมัลติ
ตำแหน่งไมโครใน PCR เดียว ต่อไปนี้การทดสอบครั้งแรก
ของชุดไพรเมอร์ที่ไม่มีป้ายกำกับสี่ตำแหน่งไมโครถูก
เลือกสำหรับการเพิ่มประสิทธิภาพต่อไป ไพรเมอร์ไปข้างหน้าของ
แต่ละไมโครเหล่านี้เป็นป้าย fluorescently
(ตารางที่ 1) และการรวมกันทั้งหมดของมัลติไมโคร
ปฏิกิริยาได้มีการทดสอบ (ไม่ได้แสดงข้อมูล) สามของไมโคร
ตำแหน่ง multiplexed ดี (
Habd
3
Habd
6
Habd
9).
Habd
7
เป็น PCR-amplified อิสระและเพิ่มการ
มัลติเพล็กตั้งก่อนที่จะมีการวิเคราะห์เกี่ยวกับอัตโนมัติ ABI 3100
ซีเควน (Applied Biosystems)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ปฏิกิริยาลูกโซ่ ( PCR ) โดยใช้ไพรเมอร์ที่ออกแบบมา10 ใช้เครื่องหมายใช้รุ่น 3.2 ) อย่างรวดเร็ว( kalendar 2003 ) การอบและเงื่อนไขเพิ่มจำนวนมีมาตรฐานและศักยภาพของ interlocus ไพรเมอร์ถูกลดลงในความพยายามที่จะอนุญาตให้สำหรับการมัลติเพล็กซ์ใช้เทคนิคในวิธีเดียว ต่อไปนี้การทดสอบครั้งแรกชุดรองพื้น unlabelled สี่ชนิดคือ ตามลำดับเลือกสำหรับการเพิ่มประสิทธิภาพต่อไป ส่งต่อรองพื้นของแต่ละเหล่านี้มีไมโครแซเทลไลต์ fluorescently ติดป้าย( ตารางที่ 1 ) และชุดทั้งหมดใช้มัลติเพล็กซ์ปฏิกิริยาที่ทดสอบ ( ข้อมูลไม่แสดง ) สามของไมโครแซเทลไลต์ดีมัลติเพลกซ์ ( ตามลำดับhabd3habd6habd9 )habd7 .คือสามารถขยายได้อย่างอิสระและเพิ่มไปแบบชุดก่อนการวิเคราะห์เกี่ยวกับ ABI 3100 แบบอัตโนมัติซีเควน ( Applied Biosystems )