(2002) using RP-HPLC. Initially, a

(2002) using RP-HPLC. Initially, a volume of 12.5 mL of the
substrate HHL (2.17 mM) was mixed with 50 mL of each
hydrolyzed WPC (10 mg/mL), both of which were prepared
with a 100 mM borate buffer, pH 8.3, containing 300 mM
NaCl, and the mixture was incubated at 37 °C for 10 min. A
volume of 200 mL of ACE (4 mU), prepared in the same
buffer, was subjected to a similar treatment. The two solutions
were subsequently mixed, and after incubation at 37
°C for 30 min, the reaction was stopped by the addition of
125 mL of HCl (1 mol/L). Next, the mixture was filtered
through a 0.22 mm membrane for analysis by RP-HPLC.
Standard solutions of HA, in concentrations ranging from
0.05 to 7.25 mmol/L, were also subjected to a similar treatment
to generate a standard curve.
For the analysis of ACE-IA, a GraceSmart RP-18 column
was used, and the HA and HHL were detected at 228 nm.
The elution flow rate was 0.5 mL/min with a two-solvent
system: (1) 0.05% trifluoroacetic acid (TFA) in water and
(2) 0.05% TFA in acetonitrile with a 5–60% acetonitrile gradient
for the first 10 min, 2 min at 60% acetonitrile and
1 min at 5% acetonitrile. This procedure was followed by
isocratic elution (A solvent) for 4 min at a constant flow
rate of 0.5 mL/min.
The ACE-IA was expressed as a percentage of inhibition
and as an IC50 value. IC50 is defined as the concentration of
hydrolysate (mg/mL) necessary to reduce the activity of
ACE by 50%.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

(2002) โดยใช้ RP HPLC เริ่มต้น ปริมาณของ 12.5 mL ของพื้นผิว HHL (2.17 มิลลิเมตร) ถูกผสมกับ 50 mL ของแต่ละhydrolyzed WPC (10 mg/mL), ซึ่งทั้งสองได้เตรียมกับ 100 มม. borate บัฟเฟอร์ pH 8.3 ประกอบด้วย 300 มม.NaCl และส่วนผสมที่ incubated ที่ 37 ° C สำหรับ 10 นาที Aปริมาณ 200 mL ของ ACE (หมู่ 4), เตรียมพร้อมในเดียวกันบัฟเฟอร์ ถูกยัดเยียดการรักษาที่คล้ายกัน โซลูชั่นสองในเวลาต่อมารวม และ หลังบ่มที่ 37° C สำหรับ 30 นาที ปฏิกิริยาถูกหยุดลง โดยการเพิ่ม125 mL ของ HCl (1 โมล/L) ถัดไป ส่วนผสมที่กรองผ่านเยื่อ 0.22 มิลลิเมตรสำหรับการวิเคราะห์ด้วย RP HPLCโซลูชั่นมาตรฐานของ HA ในความเข้มข้นตั้งแต่0.05 ใน 7.25 mmol/L ถูกยังต้องรักษาเหมือนกันการสร้างเส้นโค้งมาตรฐานสำหรับการวิเคราะห์ของเอส-IA คอลัมน์ GraceSmart RP-18ใช้ และฮาและ HHL พบที่ 228 nmอัตราการไหล elution ถูก 0.5 mL/min ด้วยสองตัวทำละลายระบบ: (1) 0.05% trifluoroacetic กรด (TFA) ในน้ำ และ(2) 0.05% TFA ใน acetonitrile ด้วย acetonitrile ไล่ 5-60%สำหรับแรก 10 นาที 2 นาทีที่ 60% acetonitrile และ1 นาทีที่ acetonitrile 5% ขั้นตอนนี้ถูกตามด้วยelution isocratic คิด (เป็นตัวทำละลาย) สำหรับ 4 นาทีไหลคงที่อัตรา 0.5 mL/minเอส-IA ที่แสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ของการยับยั้งการและเป็น IC50 ค่า IC50 ถูกกำหนดให้เป็นความเข้มข้นของด้วย (mg/mL) จำเป็นต้องลดการเอ 50%

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

(2002) โดยใช้ RP-HPLC ในขั้นต้นปริมาณ 12.5
มิลลิลิตรที่พื้นผิวHHL (2.17 มม) ผสมกับ 50
มลของแต่ละไฮโดรไลซ์WPC (10 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร)
ซึ่งทั้งสองได้จัดทำกับ100 มิลลิบัฟเฟอร์ borate ค่า pH 8.3 ที่มี 300
มิลลิโซเดียมคลอไรด์และส่วนผสมที่ได้รับการบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาที
ปริมาณ 200 มิลลิลิตร ACE (4 MU)
จัดทำขึ้นในเดียวกันบัฟเฟอร์ได้ภายใต้การรักษาที่คล้ายกัน สองการแก้ปัญหาที่ถูกผสมต่อมาและหลังจากการบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาทีปฏิกิริยาหยุดนอกเหนือจาก125 มล HCl (1 โมล / ลิตร) ถัดไปส่วนผสมถูกกรองผ่านเยื่อ 0.22 มิลลิเมตรสำหรับการวิเคราะห์โดย RP-HPLC. โซลูชั่นมาตรฐาน HA ในความเข้มข้นตั้งแต่0.05 ไป 7.25 มิลลิโมล / ลิตร, ถูกยัดเยียดยังรักษาที่คล้ายกันในการสร้างกราฟมาตรฐาน. สำหรับการวิเคราะห์ ของ ACE-IA เป็น GraceSmart RP-18 คอลัมน์ถูกนำมาใช้และHA และ HHL ตรวจพบที่ 228 นาโนเมตร. อัตราการไหลชะเป็น 0.5 มิลลิลิตร / นาทีมีสองตัวทำละลายระบบ(1) 0.05% กรด TRIFLUOROACETIC (TFA ) ในน้ำและ(2) 0.05% TFA ใน acetonitrile กับ 5-60% ลาด acetonitrile สำหรับครั้งแรก 10 นาที 2 นาทีที่ acetonitrile 60% ​​และ1 นาทีที่ 5% acetonitrile ขั้นตอนนี้จะตามมาด้วยการชะ isocratic (A ตัวทำละลาย) 4 นาทีที่ไหลคงที่อัตรา0.5 มิลลิลิตร / นาที. ACE ที่เอียได้รับการแสดงเป็นร้อยละของการยับยั้งและเป็นค่าIC50 IC50 ถูกกำหนดให้เป็นความเข้มข้นของไฮโดรไล(มิลลิกรัม / มิลลิลิตร) จำเป็นที่จะต้องลดกิจกรรมของACE โดย 50%

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

( 2002 ) โดยใช้ๆ . เริ่มต้น ปริมาณ 12.5 มิลลิลิตร (
hhl ( 2.17 มิล ) ผสมกับ 50 ml ของแต่ละ
ไฮโดรไลซ์เวย์โปรตีน ( 10 mg / ml ) ซึ่งเตรียม
กับ 100 มม. บอเรตบัฟเฟอร์ pH 8.3 ที่มีขนาด 300 มม.
และส่วนผสมที่ถูกบ่มที่ 37 องศาซี 10 นาทีเป็น
ปริมาณ 200 มล. ของเอซ ( 4 มม. ) ที่เตรียมไว้ในบัฟเฟอร์เดียวกัน
, ภายใต้การรักษาที่คล้ายกัน สองโซลูชั่น
ถูกผสมแล้วและหลังบ่มที่ 37
° C นาน 30 นาที ปฏิกิริยาถูกหยุดโดยนอกเหนือจาก
125 มล. ของ HCl ( 1 โมล / ลิตร ) ต่อไป ส่วนผสมจะถูกกรองผ่านเมมเบรน
0.22 มม. สำหรับการวิเคราะห์โดยๆ .
โซลูชั่นมาตรฐานของฮา ในความเข้มข้นตั้งแต่
0.05 7.25 มิลลิโมล / ลิตร ยังต้อง
รักษาที่คล้ายกับการสร้างเส้นโค้งมาตรฐาน สำหรับการวิเคราะห์ ace-ia
,คอลัมน์ gracesmart rp-18
ถูกใช้ และฮาและ hhl พบที่ 228 nm .
( อัตราการไหลเท่ากับ 0.5 มล. / นาทีกับสองระบบตัวทำละลาย
( 1 ) 0.05 % กรดไตรฟลูออโรอะซิติก ( ระดับ ) ในน้ำและ
( 2 ) ระดับ 0.05 % ใน Acetonitrile กับ 5 – 60% ไนลาด
สำหรับ 10 นาทีแรก 2 นาทีที่ไน 60% และ
1 นาทีที่ 5 % ไน . ขั้นตอนนี้ตามด้วย
Isocratic ( ( ตัวทำละลาย ) สำหรับ 4 นาที ที่อัตราการไหลคงที่ของ 0.5 มิลลิลิตร / นาที

ace-ia ถูกแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ของการยับยั้ง
และเป็น ic50 ค่า ic50 หมายถึงความเข้มข้นของไฮโดรไล
( มิลลิกรัม / มิลลิลิตร ) ที่จำเป็นเพื่อลดกิจกรรมของ
Ace โดย 50%