Exosome isolationUltracentrifugatio

Exosome isolation
Ultracentrifugation (UC)
Exosomal fraction from 1mL of serum was purified by four successive
centrifugation steps. At first, centrifugation at 300 ×g for 10 min
was performed, serumwas dilutedwith sterile PBS in 1:1 ratio and centrifuged
at 10,000×g for 30min followed by ultracentrifugation for 2h at
200,000 ×g (Optima MAX-XP, Beckman Coulter, rotor TLA 100.3). The
crude exosomepelletwaswashed once in a large volumeof PBS, filtered
through a 0.2 μm syringe filter and centrifuged at 200,000 ×g for 1 h,
then re-suspended in PBS. All centrifugations were performed at 4 °C.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แยก ExosomeUltracentrifugation (UC)เศษ Exosomal จาก 1mL ของซีรั่มที่บริสุทธิ์ โดยสี่ต่อเนื่องcentrifugation ขั้นตอน ที่แรก centrifugation ที่ 300 × g สำหรับ 10 นาทีดำเนิน serumwas dilutedwith กอซ PBS ในอัตราส่วน 1:1 และ centrifuged10, 000 ซื้อ g สำหรับ 30 นาทีตาม ด้วย ultracentrifugation สำหรับเอช 2 ที่ซื้อ 200000 g (พติแม็กซ์-XP, Beckman Coulter ใบพัด TLA 100.3) ที่exosomepelletwaswashed ดิบใน volumeof ใหญ่ PBS กรองครั้งถึง 0.2 μm เข็มตัวกรอง และ centrifuged ที่ 200000 × g สำหรับ 1 hแล้วเลื่อนออกไปอีกใน PBS Centrifugations ทั้งหมดดำเนินที่ 4 องศาเซลเซียส

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

exosome แยก
ultracentrifugation (UC)
ส่วน Exosomal จาก 1 มลเซรั่มบริสุทธิ์สี่ต่อเนื่อง
ขั้นตอนการหมุนเหวี่ยง ตอนแรกการหมุนเหวี่ยงที่ 300 ×กรัมเป็นเวลา 10 นาที
ได้ดำเนินการ serumwas dilutedwith พีบีเอสผ่านการฆ่าเชื้อในอัตราส่วน 1: 1 และหมุนเหวี่ยง
ที่ 10,000 ×กรัม 30 นาทีตามด้วย ultracentrifugation สำหรับ 2H ที่
200,000 ×กรัม (Optima MAX-XP, Beckman Coulter, โรเตอร์ TLA 100.3)
น้ำมันดิบ exosomepelletwaswashed ครั้งในพีบีเอส volumeof ขนาดใหญ่ที่ผ่านการกรอง
ผ่านตัวกรองเข็มฉีดยา 0.2 ไมโครเมตรและหมุนเหวี่ยงที่ 200,000 ×กรัมเป็นเวลา 1 ชั่วโมง,
จากนั้นอีกครั้งที่ลอยอยู่ในพีบีเอส centrifugations ทั้งหมดถูกดำเนินการใน 4 ° C

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

โซโซมแยก
ultracentrifugation ( UC )
exosomal เศษส่วนจาก 1ml ซีรั่มบริสุทธิ์ 4 ขั้นตอน
ปั่นต่อเนื่อง ตอนแรกปั่น 300 × 10
กรัมสำหรับมิน ได้ดําเนินการ serumwas dilutedwith PBS เป็นหมันในอัตราส่วนไฟฟ้า
ที่ 10 × G สำหรับ 30 นาที ตามด้วย ultracentrifugation สำหรับ 2H ที่
200000 × G ( Optima max-xp Beckman Coulter , ใบพัด , TLA 100.3 )
ดิบ exosomepelletwaswashed ครั้งนึงเท่ากับ PBS ขนาดใหญ่ กรองผ่าน 0.2 M
μเข็มตัวกรองไฟฟ้าที่ 200000 × g 1 H ,
แล้วแขวนลอยใน PBS ทั้งหมด centrifugations จำนวน 4 ° C