The present work showed that teeth

The present work showed that teeth samples of dolphins preserved in collections were a good source of mitochondrial DNA for population genetics and taxonomic studies. The positive results in obtaining DNA showed that the pre-treatment of samples chosen for decontamination from exogenous sources was efficient and did not damage totally the DNA, leaving enough DNA for the amplification of the region of interest. Rosenbaum et al. (1997) did not succeed in obtaining DNA from Baleen plates after soaking them overnight in absolute ethanol, as was done in the present work. They were able to obtain DNA only when submitted them to a surface cleaning with this component. In the case of teeth the DNA is localised internally surrounding the pulp cavity, therefore, it may be less exposed to the ethanol. The demineralization process was necessary because it was expected that mineral compounds were likely to inibit the PCR, which were also responsible for the higher preservation of DNA at this regions. Kiesslich et al. (2002) described an efficient and quick method of DNA purification by the use of dialysis using nitrocellulose membranes. The silica-GUSCN protocol for DNA extraction was efficient for the present purpose of extracting DNA from grained teeth, showing that it was a good protocol for difficult templates as was stated previously by Hoelzel (1998). More recently, other authors have used other extraction protocols for preserved part of specimens from collections, such as Proteinase-k for lisis, Phenol/Chloroform for purification, and absolute ethanol for precipitation (Rosenbaum et al., 1997; Sweet and Hildebrand, 1998) and alternatively using nitrocelulose-mediated dialysis for purification (Kiesslich et al., 2002). The sílica-GUSCN protocole has the advantage of providing highly pure DNA, eliminating known and unknown PCR inibitors (Höss and Pääbo, 1993; Yang, 1997).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

งานปัจจุบันพบว่า ตัวอย่างฟันของปลาโลมาที่เก็บรักษาไว้ในคอลเลกชันเป็นแหล่งที่ดีของ mitochondrial DNA พันธุศาสตร์เชิงประชากรและการศึกษาอนุกรมวิธาน ผลบวกในการรับดีเอ็นเอพบว่า รักษาก่อนตัวอย่างสำหรับ decontamination จากแหล่งบ่อยมาก และไม่ได้เสียทั้งหมดดีเอ็นเอ ออกจากดีเอ็นเอเพียงพอสำหรับการขยายภาคน่าสนใจ ไม่ Rosenbaum et al. (1997) ได้ประสบความสำเร็จในการรับดีเอ็นเอจาก Baleen แผ่นหลังอย่างนั้นค้างคืนแน่นอนเอทานอล ที่ทำงานปัจจุบัน พวกเขาเคยได้รับดีเอ็นเอเฉพาะเมื่อส่งพวกเขาไปที่พื้นผิวทำความสะอาด ด้วยคอมโพเนนต์นี้ ในกรณีของดีเอ็นเอเป็นไหนรอบโพรงเยื่อภายในฟัน ดังนั้น มันได้น้อยสัมผัสกับเอทานอล การ demineralization ไม่จำเป็นเนื่องจากมันถูกคาดว่า สารแร่มีแนวโน้มที่จะ inibit PCR ซึ่งยังรับผิดชอบสูงในการบำรุงรักษาของดีเอ็นเอในภูมิภาคนี้ Kiesslich et al. (2002) กล่าวถึงวิธีการมีประสิทธิภาพ และรวดเร็วในการทำให้บริสุทธิ์ของดีเอ็นเอ โดยใช้หน่วยที่ใช้เยื่อหุ้ม nitrocellulose ซิลิก้า GUSCN โพรโทคอลการสกัดดีเอ็นเอถูกมีประสิทธิภาพสำหรับวัตถุประสงค์มีการสกัดดีเอ็นเอจากฟัน grained แสดงว่า มันเป็นโพรโทคอลที่ดีสำหรับแม่แบบยากตามที่ได้ระบุไว้ก่อนหน้านี้ โดย Hoelzel (1998) เมื่อเร็ว ๆ นี้ คนใช้โปรโตคอลอื่น ๆ สกัดสำหรับหนึ่งรักษาไว้เป็นตัวอย่างจากคอลเลกชัน เช่น Proteinase k สำหรับ lisis วาง/สำหรับฟอก คลอโรฟอร์มและเอทานอลนอนสำหรับฝน (Rosenbaum et al., 1997 หวานและ Hildebrand, 1998) และอีกวิธีหนึ่งคือ ใช้หน่วย nitrocelulose mediated ฟอก (Kiesslich et al., 2002) Protocole sílica GUSCN มีประโยชน์ให้ DNA บริสุทธิ์สูง ตัดรู้จัก และไม่รู้จัก PCR inibitors (Höss และ Pääbo, 1993 ยาง 1997)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การทำงานในปัจจุบันแสดงให้เห็นว่ากลุ่มตัวอย่างฟันของปลาโลมาเก็บรักษาไว้ในคอลเลกชันเป็นแหล่งที่ดีของยลดีเอ็นเอสำหรับพันธุศาสตร์ประชากรและการศึกษาอนุกรมวิธาน ผลบวกในการได้รับดีเอ็นเอแสดงให้เห็นว่าการรักษาก่อนของกลุ่มตัวอย่างเลือกสำหรับการปนเปื้อนจากแหล่งภายนอกมีประสิทธิภาพและไม่เกิดความเสียหายโดยสิ้นเชิงไม่ดีเอ็นเอออกจากดีเอ็นเอเพียงพอสำหรับการขยายของภูมิภาคท​​ี่น่าสนใจ Rosenbaum, et al (1997) ไม่ประสบความสำเร็จในการได้รับดีเอ็นเอจากแผ่นบาลีหลังจากแช่ค้างคืนในเอทานอลที่แน่นอนตามที่ได้ทำในการทำงานในปัจจุบัน พวกเขาก็สามารถที่จะได้รับดีเอ็นเอเฉพาะเมื่อส่งพวกเขาที่จะทำความสะอาดพื้นผิวที่มีส่วนนี้ ในกรณีที่ฟันดีเอ็นเอเป็นภาษาท้องถิ่นโดยรอบภายในโพรงเยื่อกระดาษดังนั้นมันอาจจะน้อยกว่าที่จะสัมผัสเอทานอล กระบวนการ demineralization เป็นสิ่งจำเป็นเพราะมันเป็นที่คาดว่าสารประกอบแร่มีแนวโน้มที่จะ inibit PCR ซึ่งยังเป็นผู้รับผิดชอบในการดูแลรักษาที่สูงขึ้นของดีเอ็นเอในภูมิภาคนี้ Kiesslich et al, (2002) อธิบายวิธีที่มีประสิทธิภาพและรวดเร็วของการทำให้บริสุทธิ์ดีเอ็นเอจากการใช้ของการฟอกเลือดโดยใช้เยื่อ nitrocellulose โปรโตคอลซิลิกา GUSCN สำหรับการสกัดดีเอ็นเอมีประสิทธิภาพเพื่อวัตถุประสงค์ในปัจจุบันในการสกัดดีเอ็นเอจากเนื้อฟันที่แสดงให้เห็นว่ามันเป็นโปรโตคอลที่ดีสำหรับแม่ยากอย่างที่ได้ระบุไว้ก่อนหน้านี้โดย Hoelzel (1998) เมื่อเร็ว ๆ นี้ผู้เขียนอื่น ๆ ได้ใช้โปรโตคอลสกัดอื่น ๆ เพื่อเป็นส่วนหนึ่งที่เก็บรักษาไว้ของตัวอย่างจากคอลเลกชันเช่นโปร-k สำหรับ lisis, ฟีนอล / คลอโรฟอร์มสำหรับการทำให้บริสุทธิ์และเอทานอลแน่นอนสำหรับการตกตะกอน (Rosenbaum, et al, 1997;. หวานและ Hildebrand 1998 ) และอีกทางเลือกหนึ่งที่ใช้ฟอกไต nitrocelulose สื่อกลางสำหรับการทำให้บริสุทธิ์ (Kiesslich et al., 2002) ซิลิกา-GUSCN protocole มีความได้เปรียบในการให้ดีเอ็นเอบริสุทธิ์สูง, การขจัดรู้จักและไม่รู้จัก inibitors PCR (HössและPääbo 1993; ยาง, 1997)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

งานปัจจุบัน พบว่า ฟัน ตัวอย่างของปลาโลมาเก็บรักษาไว้ในคอลเลกชันเป็นแหล่งที่ดีของ mitochondrial DNA พันธุศาสตร์ประชากรและการศึกษาการศึกษา ผลในเชิงบวกในการได้รับดีเอ็นเอ พบว่า กลุ่มตัวอย่างที่ใช้ในการบำบัดสารพิษจากแหล่งภายนอกมีประสิทธิภาพ และไม่ได้เสียหายโดยสิ้นเชิง ดีเอ็นเอออกจากดีเอ็นเอมากพอสำหรับการเพิ่มปริมาณของพื้นที่ที่สนใจ โรเซนบอม et al . ( 1997 ) ไม่ประสบความสำเร็จในการได้รับดีเอ็นเอจากบาลีนแผ่นหลังจากแช่ไว้ค้างคืนแน่นอน เอทานอล ดังที่ทำในงานปัจจุบัน พวกเขาสามารถได้รับ DNA เมื่อยื่นให้ทำความสะอาดผิวหน้าด้วยส่วนนี้ในกรณีของฟันดีเอ็นเอเป็นภาษาท้องถิ่นภายในรอบเยื่อโพรง , ดังนั้นจึงอาจจะไม่สัมผัสกับเอทานอล กระบวนการแร่ธาตุจำเป็น เพราะคาดว่าเป็นสารแร่ มีแนวโน้มที่จะ inibit pcr ที่ต้องรับผิดชอบสูงรักษาดีเอ็นเอในภูมิภาค kiesslich et al .( 2002 ) อธิบายที่มีประสิทธิภาพและรวดเร็ววิธีการบำบัดน้ำเสียโดยการใช้ดีเอ็นเอใช้ไนโตร ไต เยื่อ โปรโตคอล guscn ซิลิกาสำหรับการสกัดดีเอ็นเอให้มีประสิทธิภาพเพื่อสกัดดีเอ็นเอจากฟันปัจจุบันเม็ด แสดงว่า มันเป็นขั้นตอนที่ดีสำหรับแม่แบบยากตามที่ได้ระบุไว้ก่อนหน้านี้ โดย hoelzel ( 1998 ) เมื่อเร็วๆ นี้ผู้เขียนได้ใช้โปรโตคอลอื่น ๆสำหรับการรักษาส่วนของการสกัดตัวอย่างจากคอลเลกชัน เช่น proteinase-k สำหรับ lisis ล / คลอโรฟอร์มและเอทานอลที่บริสุทธิ์ แน่นอนสำหรับการตกตะกอน ( โรเซนบอม et al . , 1997 ; หวานและ ฮิลเดอแบรน , 1998 ) และอีกวิธีหนึ่งคือการใช้ nitrocelulose ) สำหรับฟอกไต ( kiesslich et al . , 2002 )s íไลก้า guscn โพรโทคอลที่มีประโยชน์ให้ดีเอ็นเอสูงบริสุทธิ์ , ขจัดรู้จักและไม่รู้จัก inibitors PCR ( H ö ss และ P ääโบ , 1993 ;
ยาง , 1997 )