Initially experiment was started on

Initially experiment was started on HPLC connected with photo diode array detector at different detection wavelength.
But sensitivity of analyte was very low as no detection happened at ng/ml level.
Then analyte was scanned on spectroflourimeter, and the compound was identified as florescence sensitive at excitation 274 and emission 340 wavelengths.
The robustness test showed that to create a chromatogram with a minimal variation in separation, one should strictly control the fraction of organic modifier and the pH of the mobile phase.
Buffers (disodium monohydrogen phosphate, Potassium dihydrogen orthophosphate) at different pH with varying concentrations of organic phases (methanol, acetonitrile) were tried.
Optimum resolution and appropriate retention times of analyte was obtained with potassium dihydrogen orthophosphate buffer and acetonitrile as an organic modifier.
So the experiment started by utilizing isocratic flow condition by 20 mM potassium dihydrogen orthophosphate and
acetonitrile at different concentration ratio and different pH range between (2.5 to 6.5) by orthophosphoric acid.
Adjusting the pH to 2.9 of 20-mM KH2PO4 buffer and its flow with acetonitrile at a ratio of 60:40 associated with better resolution of analyte.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เริ่มทดลองเริ่มต้นใน HPLC กับภาพไดโอดอาร์เรย์จับที่ความยาวคลื่นต่าง ๆ ตรวจสอบ แต่ความไวของ analyte ต่ำมากเป็นตรวจสอบไม่เกิดขึ้นที่ระดับ ng/ml แล้ว analyte ถูกสแกนบน spectroflourimeter และสารประกอบที่ระบุเป็น florescence สำคัญในการกระตุ้น 274 และความยาวคลื่น 340 เล็ดรอด การทดสอบเสถียรภาพพบว่า สร้าง chromatogram ที่ มีการเปลี่ยนแปลงน้อยที่สุดในการแยก หนึ่งควรควบคุมเศษปรับอินทรีย์และ pH ของเฟสเคลื่อนที่บัฟเฟอร์ (หัว monohydrogen ฟอสเฟต โพแทสเซียมไฮโดรเจน orthophosphate) ที่ pH แตกต่างกับความเข้มข้นแตกต่างกันของระยะอินทรีย์ (เมทานอล acetonitrile) ได้พยายาม ความละเอียดที่เหมาะสมและการเก็บรักษาที่เหมาะสมของ analyte กล่าวกับโพแทสเซียมไดไฮโดรเจน orthophosphate บัฟเฟอร์ acetonitrile เป็นตัวปรับเปลี่ยนเป็นเกษตรอินทรีย์ ดังนั้น เริ่มทดลอง โดยใช้ isocratic คิดขั้นตอนเงื่อนไขโดย orthophosphate 20 มม.โพแทสเซียมไดไฮโดรเจน และacetonitrile ที่อัตราส่วนความเข้มข้นแตกต่างกันและช่วงค่า pH ที่แตกต่างกันระหว่าง (2.5-6.5) โดยกรด orthophosphoric ปรับ pH 2.9 KH2PO4 20 มม.บัฟเฟอร์และของไหล ด้วย acetonitrile ที่อัตราส่วนของ 60:40 เชื่อมโยง ด้วยความละเอียดสูงกว่าของ analyte

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในขั้นต้นทดลองเริ่มต้นในการ HPLC เพื่อเชื่อมต่อกับเครื่องตรวจจับอาร์เรย์ไดโอดภาพที่ความยาวคลื่นการตรวจสอบที่แตกต่างกัน.
แต่ความไวของการวิเคราะห์ในระดับต่ำมากในขณะที่การตรวจสอบไม่เกิดขึ้นที่ ng / ระดับมล.
จากนั้นวิเคราะห์ได้รับการสแกนใน spectroflourimeter และสารประกอบถูกระบุว่าเป็นบานสะพรั่งที่มีความสำคัญที่ กระตุ้น 274 และการปล่อย 340 ความยาวคลื่น.
การทดสอบความทนทานแสดงให้เห็นว่าการสร้าง chromatogram ที่มีการเปลี่ยนแปลงน้อยที่สุดในการคัดแยกหนึ่งอย่างเคร่งครัดควรควบคุมส่วนของการปรับปรุงอินทรีย์และค่า pH ของเฟสเคลื่อนที่ที่.
บัฟเฟอร์ (disodium ฟอสเฟต monohydrogen โพแทสเซียมไดไฮโดรเจนออร์โธฟอสเฟต) ที่ pH ที่แตกต่างกันที่แตกต่างกับความเข้มข้นของขั้นตอนอินทรีย์ (เมทานอล acetonitrile) กำลังพยายาม.
ความละเอียดที่เหมาะสมและเวลาการเก็บรักษาที่เหมาะสมในการวิเคราะห์ที่ได้รับกับโพแทสเซียมไดไฮโดรเจนบัฟเฟอร์ออร์โธฟอสเฟตและ acetonitrile เป็นปรับปรุงอินทรีย์.
ดังนั้นการทดลองที่ตั้งขึ้นโดยใช้สภาพการไหล isocratic 20 มิลลิออร์โธฟอสเฟตโพแทสเซียมไดไฮโดรเจนและ
acetonitrile ในอัตราความเข้มข้นที่แตกต่างกันและช่วงค่า pH ที่แตกต่างกันระหว่าง (2.5-6.5) โดยกรด orthophosphoric.
ปรับค่า pH 2.9 ของบัฟเฟอร์ 20 มิลลิ KH2PO4 และการไหลที่มี acetonitrile ในอัตราส่วน 60:40 ที่เกี่ยวข้องกับการที่ดีขึ้น ความละเอียดของการวิเคราะห์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เริ่มทดลอง เริ่มตั้งแต่ 4 เชื่อมต่อกับโฟโต้ไดโอดเรย์ตรวจจับแสงตรวจจับที่แตกต่างกัน
แต่ความไวของครูต่ำมาก ไม่มีการตรวจสอบเกิดขึ้นได้ในระดับนาโนกรัม / มิลลิลิตร .
แล้วครูก็สแกนใน spectroflourimeter และสารประกอบที่ถูกระบุว่าเป็นสําคัญในการกระตุ้นการผลิบานและความยาวคลื่น 340 .
ทนทานการทดสอบพบว่าการสร้างโครมาด้วยการเปลี่ยนแปลงน้อยที่สุดในการแยก , หนึ่งควรเคร่งครัดการควบคุมและปรับปรุงส่วนของอินทรีย์ ของเฟสเคลื่อนที่
บัฟเฟอร์ ( monohydrogen โซเดียมฟอสเฟต โพแทสเซียม dihydrogen ฟอสเฟต ) ที่ pH ที่แตกต่างกันขั้นตอนอินทรีย์ ( เมทานอล ความเข้มข้นของไน ) พยายาม
ความละเอียดสูงสุดและเหมาะสมในช่วงเวลาของครูได้ด้วยโพแทสเซียม dihydrogen ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ และไนเป็นคำขยายอินทรีย์
ดังนั้นการทดลองเริ่มต้นโดยการใช้เงื่อนไขการไหล Isocratic 20 มม. โพแทสเซียม dihydrogen ฟอสเฟต และ ที่อัตราส่วนความเข้มข้นที่แตกต่างกันและ
ไนช่วง pH ที่แตกต่างกันระหว่าง ( 2.5 6.5 ) โดยออร์โธฟอสฟอริกแอซิด .
ปรับ pH ประมาณ 20 มม. kh2po4 บัฟเฟอร์และการไหลของไนในอัตราส่วน 60 : 40 ที่เกี่ยวข้องกับความละเอียดที่ดีของครู .