or
rapid amplification of cDNA end (RACE) technology, and the openreading frame (ORF) sequences of these eleven genes were further confirmed with the designed primers (Table 1). According to
a previous study (Zhou et al., 2010a), PCR product purifying and
sequencing were performed as follows: the amplified PCR products were analyzed on a 1.0% agarose gel, and specific bands of
expected size were purified by Gel/PCR Extraction Kit (Biomiga,
China). Isolated DNA fragments were TA-cloned into the pGEM-T
Easy Vector (Promega, USA) and then transformed into competent
Top10 Escherichia coli cells. Putative positive clones were identified
by PCR with T7 and SP6 sequencing primers before sequenced by
AuGCT (Beijing, China) on a 377 automated DNA sequencer (PerkinElmer, USA).
orrapid amplification of cDNA end (RACE) technology, and the openreading frame (ORF) sequences of these eleven genes were further confirmed with the designed primers (Table 1). According toa previous study (Zhou et al., 2010a), PCR product purifying andsequencing were performed as follows: the amplified PCR products were analyzed on a 1.0% agarose gel, and specific bands ofexpected size were purified by Gel/PCR Extraction Kit (Biomiga,China). Isolated DNA fragments were TA-cloned into the pGEM-TEasy Vector (Promega, USA) and then transformed into competentTop10 Escherichia coli cells. Putative positive clones were identifiedby PCR with T7 and SP6 sequencing primers before sequenced byAuGCT (Beijing, China) on a 377 automated DNA sequencer (PerkinElmer, USA).
การแปล กรุณารอสักครู่..

หรือ
การขยายตัวอย่างรวดเร็วของปลาย cDNA (RACE) เทคโนโลยีและกรอบ openreading (ORF) ลำดับของยีนเหล่านี้สิบเอ็ดได้รับการยืนยันอีกด้วยไพรเมอร์ได้รับการออกแบบ (ตารางที่ 1) ตาม
การศึกษาก่อนหน้า (. โจวและคณะ, 2010a), PCR ผลิตภัณฑ์บริสุทธิ์และ
การเรียงลำดับได้ดำเนินการดังต่อไปนี้: ผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ขยายการวิเคราะห์ที่ 1.0% agarose เจล, และวงดนตรีที่เฉพาะเจาะจงของ
ขนาดที่คาดว่าจะได้รับการทำให้บริสุทธิ์ด้วยเจล / PCR สกัด Kit (Biomiga,
จีน) ดีเอ็นเอที่แยกได้ TA-โคลนเข้า pGEM-T
ง่ายเวกเตอร์ (Promega, ประเทศสหรัฐอเมริกา) และจากนั้นกลายเป็นอำนาจ
Top10 Escherichia coli เซลล์ โคลนบวกสมมุติถูกระบุ
โดยวิธี PCR กับ T7 และไพรลำดับ SP6 ก่อนที่จะติดใจโดย
AuGCT (ปักกิ่ง, จีน) ในซีเควนดีเอ็นเอ 377 อัตโนมัติ (PerkinElmer, ประเทศสหรัฐอเมริกา)
การแปล กรุณารอสักครู่..

หรือ การเพิ่มปริมาณอย่างรวดเร็วของ cDNA
สุดท้าย ( แข่ง ) เทคโนโลยี และ openreading กรอบ ( ORF ) ลำดับของยีนสิบเอ็ดเหล่านี้ยืนยันเพิ่มเติมด้วยการออกแบบไพรเมอร์ ( ตารางที่ 1 ) ตาม
การศึกษาก่อนหน้านี้ ( โจว et al . , 2010a ) ซึ่งเป็นผลิตภัณฑ์ที่บริสุทธิ์และ
ลำดับได้ดังนี้ การขยาย PCR วิเคราะห์บนผลิตภัณฑ์เจล , 1.0% และเฉพาะกลุ่ม
คาดว่าขนาดได้ทำให้บริสุทธิ์ด้วยชุดสกัดเจล PCR ( biomiga
, จีน ) แยกดีเอ็นเอถูกทาโคลนเข้าไปใน pgem-t
ง่ายเวกเตอร์ ( promega , USA ) และจากนั้นแปลงเป็นเชี่ยวชาญ
TOP10 Escherichia coli เซลล์ โคลนบวกซึ่งถูกระบุ
โดยวิธี PCR และการจัดลำดับดีเอ็นเอด้วย * * 3 sp6 ก่อนนี้ด้วย
augct ( ปักกิ่ง , จีน ) ที่เป็นลำดับ DNA แบบอัตโนมัติ ( Perkinelmer , USA )
การแปล กรุณารอสักครู่..
